h*****G 发帖数: 113 | 1 大家好,小弟最近构件质粒,插入GFP到一个基因的intron,利用endogenous的
promoter来表达GFP。基本的思路是Slice acceptor sequence-2A peptide-GFP, 因为
intron之前的exon没有刚好in frame, 所以需要在SA和2A之间加入几个碱基。现在的问
题不知道具体的SA 序列,在Addgene上看了几个plasmid,都没有把具体的序列位置给
标出来,所以也搞不清楚。比如这段序列是addgene一个plasmid的,表明是SA-2A序列
,也知道[]中的是2A序列。但是前面的话具体那段是SA呢,如果我需要在SA和2A之间
插入连个碱基,应该在哪里插入呢?
gcaagcttctgacctcttctcttcctcccacagggcctcgagagatctggcagcg[
gagagggcagaggaagtcttctaac
atgcggtgacgtggaggagaatcccggccct ]
或者各位大侠有没有常用的SA序列呢?非常感谢帮助指导。 |
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