f******e 发帖数: 125 | 1 请问为什么提一个蛋白用超声打碎细菌时会有很多泡沫,提这个蛋白的变异体超声打碎
细菌时就不会有泡沫。这个泡沫是有什么导致的。
多谢 | s*******e 发帖数: 1010 | 2 因为某种特定蛋白导致泡沫增多是很少见的情况,你确认不是超声探头离液面太近? | s******y 发帖数: 28562 | 3 出现泡沫是因为可溶性的蛋白原则上就是一种变相的detergent.
变异体没有泡沫很可能是因为蛋白产生了aggregate,可溶性变差了。
【在 f******e 的大作中提到】 : 请问为什么提一个蛋白用超声打碎细菌时会有很多泡沫,提这个蛋白的变异体超声打碎 : 细菌时就不会有泡沫。这个泡沫是有什么导致的。 : 多谢
| b******y 发帖数: 627 | 4 Unless your protein expression is super high, I don't think the foam was
formed because of your protein. After all, you are breaking the bacterial
cells and a lot more other stuff around.
To figure it out, follow the lines of stilltide's question or different
buffer compositions were accidentally used for the two cultures, especially
detergent. | f******e 发帖数: 125 | 5 谢谢大家的回复, 第一次超声发现很多泡沫,上网查了说有可能探头插的不深.
第二次做,很注意,尽可能插的很深,但还是很多泡沫. 我回头再试几次.
especially
【在 b******y 的大作中提到】 : Unless your protein expression is super high, I don't think the foam was : formed because of your protein. After all, you are breaking the bacterial : cells and a lot more other stuff around. : To figure it out, follow the lines of stilltide's question or different : buffer compositions were accidentally used for the two cultures, especially : detergent.
| U**l 发帖数: 153 | 6 跑个SDS-PAGE看看吧。养细菌其实不是那么reproducible的,有没有泡沫这事有很多可
能的原因,很有可能和你要提的蛋白没啥关系。 | l**********1 发帖数: 5204 | 7 0.1% Triton X-100 加了后 再试一下
【在 f******e 的大作中提到】 : 谢谢大家的回复, 第一次超声发现很多泡沫,上网查了说有可能探头插的不深. : 第二次做,很注意,尽可能插的很深,但还是很多泡沫. 我回头再试几次. : : especially
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