i**n 发帖数: 283 | 1 有商用前景不?我觉得还是有点用的。 想想早上9点来,做转化。 下班的时候就可以
做 colony PCR, 或者上液体培养基过夜培养,第二天早上就可以 mini-prep. 用这个
菌株,悲催的生物研究生也能早几天毕业。 |
b******n 发帖数: 4225 | 2 NEB已经有商品化的fast growing turbo
visible colonies 6.5 hours after transformation
Isolate DNA after 4 hours of growth from a single overnight colony
http://www.neb.com/nebecomm/products/productC2984.asp
【在 i**n 的大作中提到】 : 有商用前景不?我觉得还是有点用的。 想想早上9点来,做转化。 下班的时候就可以 : 做 colony PCR, 或者上液体培养基过夜培养,第二天早上就可以 mini-prep. 用这个 : 菌株,悲催的生物研究生也能早几天毕业。
|
s******a 发帖数: 472 | 3 商业意思真敏锐
【在 i**n 的大作中提到】 : 有商用前景不?我觉得还是有点用的。 想想早上9点来,做转化。 下班的时候就可以 : 做 colony PCR, 或者上液体培养基过夜培养,第二天早上就可以 mini-prep. 用这个 : 菌株,悲催的生物研究生也能早几天毕业。
|
m*******n 发帖数: 387 | 4 这个买回来后
可以自己amplify,自己做competent cell吗?
【在 b******n 的大作中提到】 : NEB已经有商品化的fast growing turbo : visible colonies 6.5 hours after transformation : Isolate DNA after 4 hours of growth from a single overnight colony : http://www.neb.com/nebecomm/products/productC2984.asp
|
C*******e 发帖数: 4348 | 5 这个不知道版上有没有人试过
当年刚出来的时候我们实验室试过
一般般
【在 b******n 的大作中提到】 : NEB已经有商品化的fast growing turbo : visible colonies 6.5 hours after transformation : Isolate DNA after 4 hours of growth from a single overnight colony : http://www.neb.com/nebecomm/products/productC2984.asp
|
b******n 发帖数: 4225 | 6 我们实验室合作者提供了这个菌株的衍生菌株
用来表达蛋白,但是咱们还没试过
【在 C*******e 的大作中提到】 : 这个不知道版上有没有人试过 : 当年刚出来的时候我们实验室试过 : 一般般
|
b******n 发帖数: 4225 | 7 可以试试看,我觉得应该没什么问题
关键是感受态制备方法
【在 m*******n 的大作中提到】 : 这个买回来后 : 可以自己amplify,自己做competent cell吗?
|
d******1 发帖数: 709 | 8 10几年前就试过类似的菌株,而且克隆,表达一起用。 |
s********8 发帖数: 619 | 9 早就有了,MACH1 cells, 忘了是那个公司的了,不过invitrogen的gateway system就推
荐用这个,我给我们实验室做了很多感受态细胞,还挺好用的,八个小时可以挑菌. |
d**l 发帖数: 1546 | 10 本来8小时就可以有可见菌落。 比如top10, DH5a
【在 i**n 的大作中提到】 : 有商用前景不?我觉得还是有点用的。 想想早上9点来,做转化。 下班的时候就可以 : 做 colony PCR, 或者上液体培养基过夜培养,第二天早上就可以 mini-prep. 用这个 : 菌株,悲催的生物研究生也能早几天毕业。
|
|
|
d**l 发帖数: 1546 | 11 自己试试就知道了。 不信拉倒
【在 i**n 的大作中提到】 : 有商用前景不?我觉得还是有点用的。 想想早上9点来,做转化。 下班的时候就可以 : 做 colony PCR, 或者上液体培养基过夜培养,第二天早上就可以 mini-prep. 用这个 : 菌株,悲催的生物研究生也能早几天毕业。
|
i**n 发帖数: 283 | 12 Top 10 8个小时够呛吧?这个8小时菌落比top 10 12个小时的大多了
这个本身来源于 top 10. 简单的遗传操作,就长得巨快。机理未名。
貌似可以通过类似操作,可能让其它菌种也这样。
无图无真相啊。上图。 BTW,这个是 15个小时的菌落。
【在 d**l 的大作中提到】 : 本来8小时就可以有可见菌落。 比如top10, DH5a
|
i**n 发帖数: 283 | 13 在俩个不同的菌株上重复出来同样的结果。 应该和一小段 DNA 有关。 具体的机制不
清楚。 但是有很好的线索。 研究起来不是很难。
我不是搞细菌的,就是这个比较好玩。 想问问大家的意见。 值得用业余时间追下去不?
【在 i**n 的大作中提到】 : Top 10 8个小时够呛吧?这个8小时菌落比top 10 12个小时的大多了 : 这个本身来源于 top 10. 简单的遗传操作,就长得巨快。机理未名。 : 貌似可以通过类似操作,可能让其它菌种也这样。 : 无图无真相啊。上图。 BTW,这个是 15个小时的菌落。
|
i**n 发帖数: 283 | 14 另外 top 10 长得实在不能算快的。 DH10B是我用过的长得最快的。 应该比Top10快一
些。
【在 d**l 的大作中提到】 : 本来8小时就可以有可见菌落。 比如top10, DH5a
|
d**l 发帖数: 1546 | 15 15个小时够overnight了, 长出来不奇怪。
我以前都是早上到实验室第一件事就做transformation,然后涂板, 然后下班的时候
就可以挑菌落摇过夜。
【在 i**n 的大作中提到】 : Top 10 8个小时够呛吧?这个8小时菌落比top 10 12个小时的大多了 : 这个本身来源于 top 10. 简单的遗传操作,就长得巨快。机理未名。 : 貌似可以通过类似操作,可能让其它菌种也这样。 : 无图无真相啊。上图。 BTW,这个是 15个小时的菌落。
|
i**n 发帖数: 283 | 16 我是拿出来比较一下菌落大小的。 你要看8小时的话,这个是8小时的。板子涂的不好
,但是结果应该很清楚。 top 10 8小时在左边,这个突变体在右边。 这个菌株,8小
时的菌落大小和top 10 14 小时的差不多。
【在 d**l 的大作中提到】 : 15个小时够overnight了, 长出来不奇怪。 : 我以前都是早上到实验室第一件事就做transformation,然后涂板, 然后下班的时候 : 就可以挑菌落摇过夜。
|
h**********r 发帖数: 671 | 17 如果把你这个NB的DNA,转到NEB的那个长的快的菌里面,会怎么样?会不会吃顿饭的功
夫就长好了?
另外,top10有时也挺招人烦的。早上做转化吧,得熬夜挑克隆。下午想做完转化早点
回家,第二天早上一不小心又出卫星菌落了。上午挑完克隆摇菌,晚上又得熬夜提质粒
酶切跑电泳。
有时为了省个一天半天的真是累死人。 |
b****r 发帖数: 17995 | 18 我觉得说不定能卖个几万刀,别让人知道了,啥时候有好机会自己去申请个专利
不过你还是要先和那几个最快的商业菌做几个titer严格比较一下
【在 i**n 的大作中提到】 : 有商用前景不?我觉得还是有点用的。 想想早上9点来,做转化。 下班的时候就可以 : 做 colony PCR, 或者上液体培养基过夜培养,第二天早上就可以 mini-prep. 用这个 : 菌株,悲催的生物研究生也能早几天毕业。
|
a*******a 发帖数: 4233 | 19 TG1 我已经用了6年了。
8小时长出克隆, 4小时摇出菌 |
h******e 发帖数: 44 | 20 MachT1本来就说长得快。
长得快的一般都是细胞壁有点突变,对amp敏感程度比较低,一般也只有amp有效,无抗
或者换别的抗生素都没效的。你试试MachT1上kana板,和DH5a长一样慢。 |
|
|
i**n 发帖数: 283 | 21 这个,貌似和AMP无关。 上面的 LB plate 是没有任何抗生素的。
【在 h******e 的大作中提到】 : MachT1本来就说长得快。 : 长得快的一般都是细胞壁有点突变,对amp敏感程度比较低,一般也只有amp有效,无抗 : 或者换别的抗生素都没效的。你试试MachT1上kana板,和DH5a长一样慢。
|
h******e 发帖数: 44 | 22 ei,amp无关的话好像很好玩。可以试试各种抗生素,一般就能看到是依赖于哪条基础
通路了,也有可能是新的原理。 |
m*****z 发帖数: 1451 | 23 说实话,我想要长得慢的,最好前一天5点接菌,第二天早上10点才长好。
多好啊,不怕摇过了,质粒都丢了。
【在 i**n 的大作中提到】 : 有商用前景不?我觉得还是有点用的。 想想早上9点来,做转化。 下班的时候就可以 : 做 colony PCR, 或者上液体培养基过夜培养,第二天早上就可以 mini-prep. 用这个 : 菌株,悲催的生物研究生也能早几天毕业。
|