d****i 发帖数: 2346 | 1 就是有什么办法能把死细胞去除,只留下活的细胞继续加药筛选。谢谢! |
C********4 发帖数: 308 | 2 用 Ficoll
一种溶液 铺5ml在15ml试管里面,上面小心地铺上1ml你的悬浮细胞(原来的体积太大
,先离心一下,去掉一部分上清)。1500rpm 离心5min,注意选择离心机最慢速停止的
那种
死细胞沉淀在下面 ,活细胞在溶液里面。再pbs或者培养基洗涤一下活细胞,因为活细
胞不喜欢ficoll。
继续培养即可 |
t****t 发帖数: 86 | |
d****i 发帖数: 2346 | 4
你这里说的“一种溶液”就是FICOLL吧?非常感谢!
【在 C********4 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 用 Ficoll : 一种溶液 铺5ml在15ml试管里面,上面小心地铺上1ml你的悬浮细胞(原来的体积太大 : ,先离心一下,去掉一部分上清)。1500rpm 离心5min,注意选择离心机最慢速停止的 : 那种 : 死细胞沉淀在下面 ,活细胞在溶液里面。再pbs或者培养基洗涤一下活细胞,因为活细 : 胞不喜欢ficoll。 : 继续培养即可
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C********4 发帖数: 308 | 5 对的 我的意思就是 ficoll, 这是一种溶液,多聚蔗糖之类的大分子....实际上就是
密度梯度离心。常用来分离血液细胞们的。
我一般就用这个,快速又便宜。注意离心刹车速度,要选无档的
貌似还有一种kit Dead Cell Removal Kit # 130-090 101 MiltenyiBiotec公司
可能比ficoll贵或者更好 ...我看有人用过,但是我自己没用过
【在 d****i 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : : 你这里说的“一种溶液”就是FICOLL吧?非常感谢!
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d****i 发帖数: 2346 | 6
非常非常感谢!我去试试看。新年快乐!
【在 C********4 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 对的 我的意思就是 ficoll, 这是一种溶液,多聚蔗糖之类的大分子....实际上就是 : 密度梯度离心。常用来分离血液细胞们的。 : 我一般就用这个,快速又便宜。注意离心刹车速度,要选无档的 : 貌似还有一种kit Dead Cell Removal Kit # 130-090 101 MiltenyiBiotec公司 : 可能比ficoll贵或者更好 ...我看有人用过,但是我自己没用过
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L*****e 发帖数: 135 | |
s******s 发帖数: 13035 | 8 我以前用的是http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/10771?lang
=en®ion=US
应该是一样的东西
【在 C********4 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 对的 我的意思就是 ficoll, 这是一种溶液,多聚蔗糖之类的大分子....实际上就是 : 密度梯度离心。常用来分离血液细胞们的。 : 我一般就用这个,快速又便宜。注意离心刹车速度,要选无档的 : 貌似还有一种kit Dead Cell Removal Kit # 130-090 101 MiltenyiBiotec公司 : 可能比ficoll贵或者更好 ...我看有人用过,但是我自己没用过
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i*****g 发帖数: 11893 | 9 多谢了,Ficoll能去除
一般都是dilution了事 |