b******s
发帖数: 1089 | 1 Kit好用，但是很贵。一个盒子里没几个柱子。
我要做BIFC，有很多组合，需要提很多plasmids。想自己提纯。网上搜了一些protocol
，基本上都是盐沉淀之后酚氯仿纯化。试过发现转染效率都极低。我用的系统是植物的
protoplasts，有实验室用CsCL离心效果很好。想问问有没有更清洁安全的protocol？
谢谢 |
h******y
发帖数: 351 | 2 I have used the protocol in this paper. It worked really well.
http://www.plosone.org/article/info:doi/10.1371/journal.pone.00
A Rapid and Economic In-House DNA Purification Method Using Glass Syringe Fi
lters
protocol
【在 b******s 的大作中提到】
: Kit好用，但是很贵。一个盒子里没几个柱子。
: 我要做BIFC，有很多组合，需要提很多plasmids。想自己提纯。网上搜了一些protocol
: ，基本上都是盐沉淀之后酚氯仿纯化。试过发现转染效率都极低。我用的系统是植物的
: protoplasts，有实验室用CsCL离心效果很好。想问问有没有更清洁安全的protocol？
: 谢谢
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J****n
发帖数: 156 | 3 Try this.
Protocol: a rapid and economical procedure for purification of plasmid or
plant DNA with diverse applications in plant biology
Plant Methods 2010, 6:1 doi:10.1186/1746-4811-6-1
protocol
【在 b******s 的大作中提到】
: Kit好用，但是很贵。一个盒子里没几个柱子。
: 我要做BIFC，有很多组合，需要提很多plasmids。想自己提纯。网上搜了一些protocol
: ，基本上都是盐沉淀之后酚氯仿纯化。试过发现转染效率都极低。我用的系统是植物的
: protoplasts，有实验室用CsCL离心效果很好。想问问有没有更清洁安全的protocol？
: 谢谢
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b***2
发帖数: 348 | 4 我用过清华谢振华的 用于哺乳动物细胞转染的高纯度 质粒 DNA 的制备 的方案，拿到
一大堆用于转染的质粒，花的时间长点，但便宜。
：Try this.
：
：Protocol: a rapid and economical procedure for purification of plasmid or
：plant DNA with diverse applications in plant biology
：Plant Methods 2010, 6:1 doi:10.1186/1746-4811-6-1
：
：【 在 boulders (walnut) 的大作中提到: 】
……
【在 J****n 的大作中提到】
: Try this.
: Protocol: a rapid and economical procedure for purification of plasmid or
: plant DNA with diverse applications in plant biology
: Plant Methods 2010, 6:1 doi:10.1186/1746-4811-6-1
:
: protocol
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b******s
发帖数: 1089 | 5 非常感谢。我在公司主页看不到价格，能否告知Glass Syringe filters的价格？
Fi
【在 h******y 的大作中提到】
: I have used the protocol in this paper. It worked really well.
: http://www.plosone.org/article/info:doi/10.1371/journal.pone.00
: A Rapid and Economic In-House DNA Purification Method Using Glass Syringe Fi
: lters
:
: protocol
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b******s
发帖数: 1089 | 6 我以前也看到过。他们只用2ml的mini-prep，最后几个ul elute，然后做protoplasts
的转染，文章里说有70%的转染率。不知道你有没有试过？转染效率是否有这么高？我
要做BIFC，需要相对高的转染效率。谢谢
【在 J****n 的大作中提到】
: Try this.
: Protocol: a rapid and economical procedure for purification of plasmid or
: plant DNA with diverse applications in plant biology
: Plant Methods 2010, 6:1 doi:10.1186/1746-4811-6-1
:
: protocol
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h******y
发帖数: 351 | 7 I bought it from VWR.
https://us.vwr.com/store/catalog/product.jsp?catalog_number=28143-986
Case of 200 $284.91
Each filter has a binding capacity of about 100-150ug plasmid. You can use
several filters as shown in Figure 1 in the paper for maxiprep.
【在 b******s 的大作中提到】
: 非常感谢。我在公司主页看不到价格，能否告知Glass Syringe filters的价格？
:
: Fi
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c********b
发帖数: 363 | 8 其实我就用的Midi，抽一次可以用15个样。
而且，柱子还可以放在4度反复用（对同一个construct
midi一个kit要多好多柱子，而且我都是用的100ml的菌液
protocol
【在 b******s 的大作中提到】
: Kit好用，但是很贵。一个盒子里没几个柱子。
: 我要做BIFC，有很多组合，需要提很多plasmids。想自己提纯。网上搜了一些protocol
: ，基本上都是盐沉淀之后酚氯仿纯化。试过发现转染效率都极低。我用的系统是植物的
: protoplasts，有实验室用CsCL离心效果很好。想问问有没有更清洁安全的protocol？
: 谢谢
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J****n
发帖数: 156 | 9 我scale up他们的protocol for 100 ml菌液。work得很好，也很容易。
protoplasts
【在 b******s 的大作中提到】
: 我以前也看到过。他们只用2ml的mini-prep，最后几个ul elute，然后做protoplasts
: 的转染，文章里说有70%的转染率。不知道你有没有试过？转染效率是否有这么高？我
: 要做BIFC，需要相对高的转染效率。谢谢
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L*****e
发帖数: 135 | |
b******s
发帖数: 1089 | |
b******s
发帖数: 1089 | 12 请问这是回哪一贴？
【在 L*****e 的大作中提到】
: 销量只是一般
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