微注射，如何重悬离心后的lentivirus? - Biology版

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Biology版 - 微注射，如何重悬离心后的lentivirus?

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话题: 重悬话题: 离心话题: lentivirus话题: 病毒话题: 吹打

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P******r
发帖数: 966

重悬浓缩的病毒我们常用的操作是加PBS，晃几个小时，然后用枪头吹打重悬。
那么Lentivirus离心后的pellet究竟是什么东西？死的病毒还是活的病毒还是死细胞碎
片还是其它什么东西？如果只是用PBS晃而不用枪头吹打，可以得到大部分的活病毒吗？
现在碰到的问题是：枪头吹打的病毒会堵塞微注射器。
有效解惑者奉包子。

r***e
发帖数: 2539

pellet里当然有病毒颗粒了，但是绝大多数是死细胞碎片，不知道你有没有离心两次，
第二次用20%蔗糖cushion，能改善一些，但是不多。
两次离心完了，我是用HBSS重悬后，用枪头吹100次，然后EP管10000rpm离心15秒，取上
清，把大多数碎片去掉。一般的hamilton syringe不会堵。

吗？

【在 P******r 的大作中提到】

: 重悬浓缩的病毒我们常用的操作是加PBS，晃几个小时，然后用枪头吹打重悬。
: 那么Lentivirus离心后的pellet究竟是什么东西？死的病毒还是活的病毒还是死细胞碎
: 片还是其它什么东西？如果只是用PBS晃而不用枪头吹打，可以得到大部分的活病毒吗？
: 现在碰到的问题是：枪头吹打的病毒会堵塞微注射器。
: 有效解惑者奉包子。

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