h********n
发帖数: 4079 | 1 各位高人能不能说说, lentivirus一般需要多少时间可以感染细胞并且把基因弄到细胞
基因组上去? 5个小时够不够? 我用293T细胞.
谢谢指教. |
r***e
发帖数: 2539 | 2 293比较快。overnight应该可以看到GFP表达。
如果你要求表达量不高的话，可以试试。
一般2-3天才到最高表达量，做western blot。
5小时有点勉强了。
【在 h********n 的大作中提到】
: 各位高人能不能说说, lentivirus一般需要多少时间可以感染细胞并且把基因弄到细胞
: 基因组上去? 5个小时够不够? 我用293T细胞.
: 谢谢指教.
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h********n
发帖数: 4079 | 3 其实我是急着加 4-OHT, 又怕影响lentivirus的感染.
4-OHT会影响lentivirus的效率吗?
【在 r***e 的大作中提到】
: 293比较快。overnight应该可以看到GFP表达。
: 如果你要求表达量不高的话，可以试试。
: 一般2-3天才到最高表达量，做western blot。
: 5小时有点勉强了。
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j******i
发帖数: 939 | 4 5个小时足够lentivirus进入细胞了 一般半个小时就可以看到virus进入细胞了 不确定
最快多久能整合到基因组里 lentivirus还有个reverse transcription的过程 如果4-
OHT不是逆转录抑制剂的话 5个小时没有问题 你有lv-gfp做control的话 可以知道到底
有没有影响转录和插入了 |
h********n
发帖数: 4079 | 5 各位高人能不能说说, lentivirus一般需要多少时间可以感染细胞并且把基因弄到细胞
基因组上去? 5个小时够不够? 我用293T细胞.
谢谢指教. |
r***e
发帖数: 2539 | 6 293比较快。overnight应该可以看到GFP表达。
如果你要求表达量不高的话，可以试试。
一般2-3天才到最高表达量，做western blot。
5小时有点勉强了。
【在 h********n 的大作中提到】
: 各位高人能不能说说, lentivirus一般需要多少时间可以感染细胞并且把基因弄到细胞
: 基因组上去? 5个小时够不够? 我用293T细胞.
: 谢谢指教.
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h********n
发帖数: 4079 | 7 其实我是急着加 4-OHT, 又怕影响lentivirus的感染.
4-OHT会影响lentivirus的效率吗?
【在 r***e 的大作中提到】
: 293比较快。overnight应该可以看到GFP表达。
: 如果你要求表达量不高的话，可以试试。
: 一般2-3天才到最高表达量，做western blot。
: 5小时有点勉强了。
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j******i
发帖数: 939 | 8 5个小时足够lentivirus进入细胞了 一般半个小时就可以看到virus进入细胞了 不确定
最快多久能整合到基因组里 lentivirus还有个reverse transcription的过程 如果4-
OHT不是逆转录抑制剂的话 5个小时没有问题 你有lv-gfp做control的话 可以知道到底
有没有影响转录和插入了 |
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i*****g
发帖数: 11893 | 9 lenti不清楚
retrovirus 我知道最快8hr可以看见绿色荧光了
纯粹就infection而言，30min就进入细胞了。考虑到半衰期持续，我估计3hr后，可以
安全换液 |
