b*****n
发帖数: 1841 | 1 质疑李文辉工作可靠性的，质问为什么不发专业杂志而发eLife的可以看看这个报道。
2013年4月17日，我所李文辉实验室在病毒学专业期刊（ Journal of Virology）在线
发表题为“钠离子-牛磺胆酸共转运多肽介导绒毛猴乙肝病毒感染树鼩肝细胞（Sodium
taurocholate cotransporting polypeptide mediates woolly monkey hepatitis B
virus infection of Tupaia hepatocytes）”的文章。
2013年4月17日，我所李文辉实验室在病毒学专业期刊（ Journal of Virology）在线
发表题为“钠离子-牛磺胆酸共转运多肽介导绒毛猴乙肝病毒感染树鼩肝细胞（Sodium
taurocholate cotransporting polypeptide mediates woolly monkey hepatitis B
virus infection of Tupaia hepatocytes）”的文章。
“新世界猴”、“旧世界猴”和“猿（包括人）”是灵长类的几个重要进化分支。绒
毛猴为一种新世界猴，是迄今为止发现的, 唯一确定可以天然感染HBV的猴子，其携带
的绒毛猴乙肝病毒（woolly monkey hepatitis B virus， WMHBV）在进化上与人及猿
类HBV分离，形成一个相对独立的分支。WMHBV可以感染绒毛猴以及与绒毛猴属于同一进
化分支的蜘蛛猴（spider monkey），但很难感染猩猩及人的肝细胞。除此之外，WMHBV
和人HBV一样可以有效感染类灵长类小动物树鼩（Tupaia belangeri）的肝细胞，但受
体未知。
在本篇文章中，多方面实验数据表明绒毛猴所携带的乙肝病毒WMHBV使用钠离子-牛磺胆
酸共转运多肽（NTCP）作为受体侵入靶细胞；结合2012年发现NTCP是人HBV受体的研究
，可以推测目前所有已知的灵长类HBV可能均使用NTCP作为主要的细胞受体感染肝细胞
。 本研究不但将NTCP作为人类HBV受体的发现扩展到了一个进化上离人类HBV较远的病
毒——WMHBV上，而且提供重要证据进一步表明NTCP是HBV感染肝细胞的功能性受体，深
化了对HBV感染分子机制的认识。
我所博士后钟国才为本文的第一作者，其他作者还有严欢，王海敏，何文辉，景致毅，
祁永和，付立冉，郜振超，黄屹，徐广伟博士，冯晓锋博士，隋建华博士。李文辉博士
为本文的通讯作者。该研究由国家973基金项目和北京市科委资助。 | C**S
发帖数: 522 | | I***a
发帖数: 13467 | | d**j
发帖数: 240 | 4 挺好的。科学本来就是这样啊。让人敬佩。
前些时候就这问题狂吵的怎么不见了。cell系列的系列评论文章出来了吗?
Sodium
Sodium
【在 b*****n 的大作中提到】
: 质疑李文辉工作可靠性的，质问为什么不发专业杂志而发eLife的可以看看这个报道。
: 2013年4月17日，我所李文辉实验室在病毒学专业期刊（ Journal of Virology）在线
: 发表题为“钠离子-牛磺胆酸共转运多肽介导绒毛猴乙肝病毒感染树鼩肝细胞（Sodium
: taurocholate cotransporting polypeptide mediates woolly monkey hepatitis B
: virus infection of Tupaia hepatocytes）”的文章。
:
:
: 2013年4月17日，我所李文辉实验室在病毒学专业期刊（ Journal of Virology）在线
: 发表题为“钠离子-牛磺胆酸共转运多肽介导绒毛猴乙肝病毒感染树鼩肝细胞（Sodium
: taurocholate cotransporting polypeptide mediates woolly monkey hepatitis B
| u**********0
发帖数: 248 | 5 我们实验室最近重复了elife的那篇文章的关键实验。Western发现HepG2细胞本身也有
较高的NTCP表达，人的原代肝细胞的NTCP水平比HepG2高一到两倍（文章中RNA水平要高
1万倍）。建立的NTCP稳定表达的HepG2细胞系，按照文章的方法没有成功感染HBV。
文章的发现很令人兴奋，很多实验室都期待用这个病毒体外感染的细胞模型去研究HBV
的系列问题。希望有更多的实验室能重复出这个结果。如果两年内只是这一个实验室在
发相关文章，而没有其他的lab发文章，可能还有什么问题。所以要谨慎乐观。 | s****9
发帖数: 932 | 6 你们有没有contact李文辉实验室，看看他们有没有什么建议。
HBV
【在 u**********0 的大作中提到】
: 我们实验室最近重复了elife的那篇文章的关键实验。Western发现HepG2细胞本身也有
: 较高的NTCP表达，人的原代肝细胞的NTCP水平比HepG2高一到两倍（文章中RNA水平要高
: 1万倍）。建立的NTCP稳定表达的HepG2细胞系，按照文章的方法没有成功感染HBV。
: 文章的发现很令人兴奋，很多实验室都期待用这个病毒体外感染的细胞模型去研究HBV
: 的系列问题。希望有更多的实验室能重复出这个结果。如果两年内只是这一个实验室在
: 发相关文章，而没有其他的lab发文章，可能还有什么问题。所以要谨慎乐观。
| b******k
发帖数: 2321 | 7 这个很劲爆啊，，，，
HBV
【在 u**********0 的大作中提到】
: 我们实验室最近重复了elife的那篇文章的关键实验。Western发现HepG2细胞本身也有
: 较高的NTCP表达，人的原代肝细胞的NTCP水平比HepG2高一到两倍（文章中RNA水平要高
: 1万倍）。建立的NTCP稳定表达的HepG2细胞系，按照文章的方法没有成功感染HBV。
: 文章的发现很令人兴奋，很多实验室都期待用这个病毒体外感染的细胞模型去研究HBV
: 的系列问题。希望有更多的实验室能重复出这个结果。如果两年内只是这一个实验室在
: 发相关文章，而没有其他的lab发文章，可能还有什么问题。所以要谨慎乐观。
| s****9
发帖数: 932 | 8 我刚才吃饱了撑着pubmed了一下“NTCP and HepG2”，HepG2确实不表达NTCP。为了用
HepG2研究NTCP，都需要做stable transfection。
看这段：
“Human hepatoblastoma cells (HepG2), cells that have lost native Ntcp
expression, were stably transfected with the rat Ntcp gene.”
PMID: 14598021。
不知道你们实验室是不是做HBV的，还是刚刚半路出家。
HBV
【在 u**********0 的大作中提到】
: 我们实验室最近重复了elife的那篇文章的关键实验。Western发现HepG2细胞本身也有
: 较高的NTCP表达，人的原代肝细胞的NTCP水平比HepG2高一到两倍（文章中RNA水平要高
: 1万倍）。建立的NTCP稳定表达的HepG2细胞系，按照文章的方法没有成功感染HBV。
: 文章的发现很令人兴奋，很多实验室都期待用这个病毒体外感染的细胞模型去研究HBV
: 的系列问题。希望有更多的实验室能重复出这个结果。如果两年内只是这一个实验室在
: 发相关文章，而没有其他的lab发文章，可能还有什么问题。所以要谨慎乐观。
| l****y
发帖数: 398 | 9 我记得当时版上有人说德国有个组也做出来了，抢发了science还是什么的，所以李投
了elife，德国那篇出来了吗
★ 发自iPhone App: ChineseWeb 7.8
【在 s****9 的大作中提到】
: 你们有没有contact李文辉实验室，看看他们有没有什么建议。
:
: HBV
| z*******6
发帖数: 679 | 10 问个弱问题... 确定treeshrew是灵长类的吗？我知道他也是做HCV的model... | l**********1
发帖数: 5204 | 11 BMJ
Gut is not trash journal
this journal 2013 one review
web link:
http://gut.bmj.com/content/62/8/1093.extract
its pp1094 left column top
cited here stuff sentence,
>Surprisingly, Yan et al did not provide
>Southern blot data demonstrating accumulation
of HBV DNA replication intermediates,
as this electrophoretic pattern is
a signature of productive virus replication.
Only one subfigure shows some evidence
of cccDNA formation, which
defines a successful infection by HBV;
however, unlike HBV DNA replication
intermediates, which are present in the
cytoplasm, cccDNA is found only in the
nucleus, and does not, itself, replicate. As
discussed below, it was also unclear if
cccDNA copy number amplification
occurred following infection, a step that
appears characteristic of high-titre HBV
replication in vivo, but has been difficult
to reproduce in cell culture.
References
No.11
Yan H, Zhong G, Xu G, He W, Jing Z, Gao Z, Huang Y, Qi Y, Peng B, Wang H,
Fu
L, Song M, Chen P, Gao W, Ren B, Sun Y, Cai T, Feng X, Sui J, Li W. (2012).
Sodium taurocholate cotransporting polypeptide is a functional receptor
for human hepatitis B and D virus.
eLife ;1: e00049
That is one key ask to 李文辉 HBV NTCP 受体 discovery saga.
Attached snap shot is
Yan H et al.,(2012) elife paper
its Fig. 6 D
from
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/23150796
To be nor not to be, there should be other necessary Southern Blotting PP...
Rebuttal Chinese version:
科学网上关于“乙肝病毒受体NTCP”的三篇博文
已有 2312 次阅读 2012-11-19 09:35
cited from
http://blog.sciencenet.cn/blog-279293-633906.html
评论 3
8. 文章中用Southern blotting检测到了cccDNA的形成。cccDNA是HBV转录的膜板，被
认为是HBV持续感染的关键因素。从结果来看cccDNA的形成时间与HBV蛋白、RNA和DNA相
比比较早，尤其量很高。其实对于HBV来说哪怕是CMV启动的HBV（比如pCMV-HBV）
cccDNA的量都是很低的，更不要说是自身启动子启动的了。在NTCP介导的HBV复制水平
整体很低的情况下，具有高水平的cccDNA形成，让人怀疑作者检测到的cccDNA是否是真
的cccDNA，
所以作者必须证明他们所指示的条带是真的是cccDNA，必须用EcoRI酶切（cccDNA能被
EcoRI线性化）和加热煮沸cccDNA（沸腾后不会被解成单链）来确证，同时必须要有阳
性对照。当然对于鸭乙肝病毒（DHBV）来说cccDNA比较高，所以研究cccDNA的人比较喜
欢用DHBV来研究
So before the end of 2014
if still Li lab can't show that key SB PP
although Li WH lab had so many 2013 publications*, that
Human HBV receptor might will be withdraw from NIBS milestone discovery
series.
asterisk mark:
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/23596296
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/23678176
【 在 IDjia (独行虾) 的大作中提到: 】
: 不是说ASM都是垃圾级的吗？ | i*********0
发帖数: 915 | 12 tree shrew不是灵长类，只是在进化上和灵长类相比较其他，更为接近灵长类。
昆动在搞tree shrew的模型。 |
|
