w***z 发帖数: 1158 | 1 箭头所指峰在处理前后C 与T的差别是否有意义? 还是测续信号问题? 感谢。
红峰为T,蓝峰为C. |
s******s 发帖数: 13035 | 2 你这个啥呀,methylation?
【在 w***z 的大作中提到】 : 箭头所指峰在处理前后C 与T的差别是否有意义? 还是测续信号问题? 感谢。 : 红峰为T,蓝峰为C.
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w***z 发帖数: 1158 | 3 提取处理前后样品的DNA,PCR扩增相应片断后作的测序分析。没做过methylation方面
的研究。
【在 s******s 的大作中提到】 : 你这个啥呀,methylation?
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s******s 发帖数: 13035 | 4 就是有区别啊。你想问啥来着
【在 w***z 的大作中提到】 : 提取处理前后样品的DNA,PCR扩增相应片断后作的测序分析。没做过methylation方面 : 的研究。
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w***z 发帖数: 1158 | 5 处理后methylation发生了改变?
【在 s******s 的大作中提到】 : 就是有区别啊。你想问啥来着
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l******g 发帖数: 1623 | 6 是mix.如果怕死测试问题,你可以TA克隆你的PCR产物,从单个菌落里面提plasmid,分
别测序,测几百个的话,还能大致知道突变的比例
【在 w***z 的大作中提到】 : 箭头所指峰在处理前后C 与T的差别是否有意义? 还是测续信号问题? 感谢。 : 红峰为T,蓝峰为C.
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w***z 发帖数: 1158 | |
u*********1 发帖数: 2518 | 8 从我个人的经验来说,
我觉得肯定是很明显的差别
当然不爽的是有点noise,不是那么clean。当然我不知道你是在做啥
【在 w***z 的大作中提到】 : 箭头所指峰在处理前后C 与T的差别是否有意义? 还是测续信号问题? 感谢。 : 红峰为T,蓝峰为C.
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w***z 发帖数: 1158 | 9 小鼠体内某组织诱发癌变。 不同个体,不同批次PCR,甚至克隆化后,DNA测序得类似
结果,都有同样的noise。
其实我想观察的是另一个位点,结果没变化。这个有变化的在它上游一点。
【在 u*********1 的大作中提到】 : 从我个人的经验来说, : 我觉得肯定是很明显的差别 : 当然不爽的是有点noise,不是那么clean。当然我不知道你是在做啥
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u*********1 发帖数: 2518 | 10 我个人是觉得你这里的变化是significant的
当然了,一般我都是forward和reverse两个方向都测;多测几次如果都是这种变化,就
应该可信吧
【在 w***z 的大作中提到】 : 小鼠体内某组织诱发癌变。 不同个体,不同批次PCR,甚至克隆化后,DNA测序得类似 : 结果,都有同样的noise。 : 其实我想观察的是另一个位点,结果没变化。这个有变化的在它上游一点。
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b****r 发帖数: 17995 | 11 真要发表,恐怕sanger是不行的,这个定量太不靠谱
Pyro可能是比较经典的办法 |
l**********1 发帖数: 5204 | 12 Sure LZ try Pyro then submit MS to N biotech
Btw, if has clinical data (i mean human data not rat/mice) as same SNP proof
after one treatment,might can try Lancet Oncology or similar clinical
medicine journal.
【在 b****r 的大作中提到】 : 真要发表,恐怕sanger是不行的,这个定量太不靠谱 : Pyro可能是比较经典的办法
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w***z 发帖数: 1158 | 13 谢谢楼上两位的回复。目前这只是个偶然发现,还不知道有啥意义,离发表似乎还很远
。呵呵。 |