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Biology版 - 请教个测序结果问题
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话题: 测序话题: pyro话题: pcr话题: clinical
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w***z
发帖数: 1158
1
箭头所指峰在处理前后C 与T的差别是否有意义? 还是测续信号问题? 感谢。
红峰为T,蓝峰为C.
s******s
发帖数: 13035
2
你这个啥呀,methylation?

【在 w***z 的大作中提到】
: 箭头所指峰在处理前后C 与T的差别是否有意义? 还是测续信号问题? 感谢。
: 红峰为T,蓝峰为C.

w***z
发帖数: 1158
3
提取处理前后样品的DNA,PCR扩增相应片断后作的测序分析。没做过methylation方面
的研究。

【在 s******s 的大作中提到】
: 你这个啥呀,methylation?
s******s
发帖数: 13035
4
就是有区别啊。你想问啥来着

【在 w***z 的大作中提到】
: 提取处理前后样品的DNA,PCR扩增相应片断后作的测序分析。没做过methylation方面
: 的研究。

w***z
发帖数: 1158
5
处理后methylation发生了改变?

【在 s******s 的大作中提到】
: 就是有区别啊。你想问啥来着
l******g
发帖数: 1623
6
是mix.如果怕死测试问题,你可以TA克隆你的PCR产物,从单个菌落里面提plasmid,分
别测序,测几百个的话,还能大致知道突变的比例

【在 w***z 的大作中提到】
: 箭头所指峰在处理前后C 与T的差别是否有意义? 还是测续信号问题? 感谢。
: 红峰为T,蓝峰为C.

w***z
发帖数: 1158
7
感谢楼上两位的回复.
u*********1
发帖数: 2518
8
从我个人的经验来说,
我觉得肯定是很明显的差别
当然不爽的是有点noise,不是那么clean。当然我不知道你是在做啥

【在 w***z 的大作中提到】
: 箭头所指峰在处理前后C 与T的差别是否有意义? 还是测续信号问题? 感谢。
: 红峰为T,蓝峰为C.

w***z
发帖数: 1158
9
小鼠体内某组织诱发癌变。 不同个体,不同批次PCR,甚至克隆化后,DNA测序得类似
结果,都有同样的noise。
其实我想观察的是另一个位点,结果没变化。这个有变化的在它上游一点。

【在 u*********1 的大作中提到】
: 从我个人的经验来说,
: 我觉得肯定是很明显的差别
: 当然不爽的是有点noise,不是那么clean。当然我不知道你是在做啥

u*********1
发帖数: 2518
10
我个人是觉得你这里的变化是significant的
当然了,一般我都是forward和reverse两个方向都测;多测几次如果都是这种变化,就
应该可信吧

【在 w***z 的大作中提到】
: 小鼠体内某组织诱发癌变。 不同个体,不同批次PCR,甚至克隆化后,DNA测序得类似
: 结果,都有同样的noise。
: 其实我想观察的是另一个位点,结果没变化。这个有变化的在它上游一点。

b****r
发帖数: 17995
11
真要发表,恐怕sanger是不行的,这个定量太不靠谱
Pyro可能是比较经典的办法
l**********1
发帖数: 5204
12
Sure LZ try Pyro then submit MS to N biotech
Btw, if has clinical data (i mean human data not rat/mice) as same SNP proof
after one treatment,might can try Lancet Oncology or similar clinical
medicine journal.

【在 b****r 的大作中提到】
: 真要发表,恐怕sanger是不行的,这个定量太不靠谱
: Pyro可能是比较经典的办法

w***z
发帖数: 1158
13
谢谢楼上两位的回复。目前这只是个偶然发现,还不知道有啥意义,离发表似乎还很远
。呵呵。
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