f*****f
发帖数: 195 | 1 差不多半年前问过类似的问题，有没有本身高度泛素化的蛋白例子。
以我自己做得蛋白M为例：见附图，不用共转Ub就被高度泛素化。稳定表达的293细胞系
也类似。
（注：已大致证实主要是K48 Ubquitination，MG132 会增加表达量。）
谁知道有没有类似的高度泛素化蛋白的例子？谢谢 |
f*****f
发帖数: 195 | 2 忘附件了。
【在 f*****f 的大作中提到】
: 差不多半年前问过类似的问题，有没有本身高度泛素化的蛋白例子。
: 以我自己做得蛋白M为例：见附图，不用共转Ub就被高度泛素化。稳定表达的293细胞系
: 也类似。
: （注：已大致证实主要是K48 Ubquitination，MG132 会增加表达量。）
: 谁知道有没有类似的高度泛素化蛋白的例子？谢谢
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b******n
发帖数: 4225 | 3 就凭这张图怎么证明是泛素化？
anti-GFP？
【在 f*****f 的大作中提到】
: 忘附件了。
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t**********8
发帖数: 223 | |
S*********s
发帖数: 304 | 5 从图上来看
1. over-expression
2. GFP-tag
both of them will cause aggregation/unfold etc
need clean and convincing data to generate hypothesis
highly ubiquitinated protein是不稳定的（如Nrf2），basal level很低,能够快速响
应各种stimulus
【在 f*****f 的大作中提到】
: 差不多半年前问过类似的问题，有没有本身高度泛素化的蛋白例子。
: 以我自己做得蛋白M为例：见附图，不用共转Ub就被高度泛素化。稳定表达的293细胞系
: 也类似。
: （注：已大致证实主要是K48 Ubquitination，MG132 会增加表达量。）
: 谁知道有没有类似的高度泛素化蛋白的例子？谢谢
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e****s
发帖数: 1125 | 6 过表达蛋白发生高度的泛素化是很正常的。
很多E3 ligase自身泛素化，他们的底物也会有这一现象。
我做的蛋白起码有3个有类似现象。 |
f*****f
发帖数: 195 | 7 有其它data证明泛素化，还包括用其它tag，特异Ub抗体，HisUb 纯化等等。
【在 S*********s 的大作中提到】
: 从图上来看
: 1. over-expression
: 2. GFP-tag
: both of them will cause aggregation/unfold etc
: need clean and convincing data to generate hypothesis
: highly ubiquitinated protein是不稳定的（如Nrf2），basal level很低,能够快速响
: 应各种stimulus
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s******y
发帖数: 28562 | 8 如果内源蛋白也有高度泛素化的话那会很有意思。如果仅仅是转进去的蛋白有这种现象
的话就比较难说了。
至于说高度泛素化的蛋白，histone protein 和一些结构蛋白是可以出现的。因为它们
会被固定在相关的细胞结构上所以不会很快被降解。但是那些蛋白一般只会出现少于４
个ubiquitin的修饰。很少听说会出现多泛素化的。
【在 f*****f 的大作中提到】
: 差不多半年前问过类似的问题，有没有本身高度泛素化的蛋白例子。
: 以我自己做得蛋白M为例：见附图，不用共转Ub就被高度泛素化。稳定表达的293细胞系
: 也类似。
: （注：已大致证实主要是K48 Ubquitination，MG132 会增加表达量。）
: 谁知道有没有类似的高度泛素化蛋白的例子？谢谢
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