g*********5 发帖数: 2533 | 1 最近作split GFP, 发现荧光很低,同样的GFP质粒转染到293细胞里有很强的荧光信号
并且很夸张的cell pellet是绿色的。
记得有人说过split GFP 成熟很慢。
LUCIFERASE 好些。有高手给点建议吗? |
j*****n 发帖数: 135 | 2 换venus,比GFP成熟快,荧光强。split luciferase主要是有一步酶反应所以read-out
高。 |
g*********5 发帖数: 2533 | 3 I used the Venus in fact. and still weak signal. so luciferase could have
strong signal?
out
【在 j*****n 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 换venus,比GFP成熟快,荧光强。split luciferase主要是有一步酶反应所以read-out : 高。
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l***y 发帖数: 638 | 4 promoter的问题吧,有的在某些cell line里不太好用,换个promoter试试
【在 g*********5 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : I used the Venus in fact. and still weak signal. so luciferase could have : strong signal? : : out
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j*****n 发帖数: 135 | 5 Split luciferase may give better read-out, but can't tell location of the
interaction. Check Hu C.D.'s paper on BiFC and use the best pair for your
experiment. |
g*********5 发帖数: 2533 | 6 谢谢大家。我不需要知道相互作用的位置,只是想建立一个体系,作药物筛选。 |