x*****o
发帖数: 441 | 1 很多buffer里面都有EDTA, 它的作用是什么?如果不加会怎么样? |
s******y
发帖数: 28562 | 2 反应溶液里的EDTA一般都是用来chelate 无关的二价以上的金属离子。
如果不加的话有可能会出现非特异反应。
对于保存溶液而言，因为大部分二价以上的金属离子是一种催化剂，本身（或者和蛋白
酶结合之后）会导致蛋白水解。所以要用EDTA来chelate
【在 x*****o 的大作中提到】
: 很多buffer里面都有EDTA, 它的作用是什么?如果不加会怎么样?
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j****n
发帖数: 3370 | 3 Will also kill DNase activity
★ 发自iPhone App: ChineseWeb 8.6
【在 s******y 的大作中提到】
: 反应溶液里的EDTA一般都是用来chelate 无关的二价以上的金属离子。
: 如果不加的话有可能会出现非特异反应。
: 对于保存溶液而言，因为大部分二价以上的金属离子是一种催化剂，本身（或者和蛋白
: 酶结合之后）会导致蛋白水解。所以要用EDTA来chelate
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i***l
发帖数: 1656 | 4 虽然上面有回答了。
但是，这些问题都是自己能Google出来的 |
p****t
发帖数: 18 | 5 虽然能google出来，但是同样的答案出现在哪里可信度其实是不一样的。在这里出现的
答案以后会成为后来的人google结果的一部分，又何乐而不为呢
【在 i***l 的大作中提到】
: 虽然上面有回答了。
: 但是，这些问题都是自己能Google出来的
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g*****n
发帖数: 250 | 6 上一半说对了。EDTA是用来chelate二价金属离子的.
下一半不对. EDTA不会导致蛋白水解. 加EDTA是一种防范措施。DNA酶需要镁离子。一
旦DNA溶液被DNA酶污染，EDTA可以抑制酶活性。
【在 s******y 的大作中提到】
: 反应溶液里的EDTA一般都是用来chelate 无关的二价以上的金属离子。
: 如果不加的话有可能会出现非特异反应。
: 对于保存溶液而言，因为大部分二价以上的金属离子是一种催化剂，本身（或者和蛋白
: 酶结合之后）会导致蛋白水解。所以要用EDTA来chelate
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s******y
发帖数: 28562 | 7 是不是我说的太confusing了所以你没有看懂？我的意思是二价以上的金属离子会导致
蛋白spontaneous水解。而EDTA 是用来防止这个情况发生的。并不是说EDTA 导致水解
（正好相反）。
【在 g*****n 的大作中提到】
: 上一半说对了。EDTA是用来chelate二价金属离子的.
: 下一半不对. EDTA不会导致蛋白水解. 加EDTA是一种防范措施。DNA酶需要镁离子。一
: 旦DNA溶液被DNA酶污染，EDTA可以抑制酶活性。
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s******y
发帖数: 28562 | 8 另外，对于DNA而言，即使不存在DNA酶，在有足够的二价金属离子的情况下，也是可以
导致水解的。
一般认为DNA酶的作用是把镁离子放在一个最有利的位置从而加快这个水解过程。如果
用一个比方的话，如果说DNA酶是枪，那么镁离子就是子弹。
其实从一个化学的角度来说，大部分酶的作用无非就是把氨基酸侧链上的基团（COOH,
SH, OH,NH3, etc.)或者蛋白结合上的小分子（离子或者有机小分子)放到合适的地方让
他们进行水解或者合成（水解倒过来）反应而已。
比方说什么serine-protease, 无非就是用serine的侧链上的-OH来搞搞氢键什么的来促
进水解而已。 |
s******y
发帖数: 28562 | 9 对。
【在 j****n 的大作中提到】
: Will also kill DNase activity
:
: ★ 发自iPhone App: ChineseWeb 8.6
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g*****n
发帖数: 250 | 10 "我的意思是二价以上的金属离子会导致蛋白spontaneous水解。" 这个倒是很新鲜。
【在 s******y 的大作中提到】
: 是不是我说的太confusing了所以你没有看懂？我的意思是二价以上的金属离子会导致
: 蛋白spontaneous水解。而EDTA 是用来防止这个情况发生的。并不是说EDTA 导致水解
: （正好相反）。
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x*****o
发帖数: 441 | 11 呵呵,受教了,多谢上面各位的回答.
还有一个问题就是这个EDTA如果用1mM的浓度,之后再加MgCl2的时候是不是浓度就少了
1mM? 比如加到10mM的MgCl2, 但是实际浓度只有9mM?
一般大家用EDTA都用什么浓度的? |
s******y
发帖数: 28562 | 12
可以粗略的认为大概就是这样子。当然如果要准确的话需要算一个比较麻烦的二元方程。
【在 x*****o 的大作中提到】
: 呵呵,受教了,多谢上面各位的回答.
: 还有一个问题就是这个EDTA如果用1mM的浓度,之后再加MgCl2的时候是不是浓度就少了
: 1mM? 比如加到10mM的MgCl2, 但是实际浓度只有9mM?
: 一般大家用EDTA都用什么浓度的?
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x*****o
发帖数: 441 | 13 I see. 多谢!
程。
【在 s******y 的大作中提到】
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: 可以粗略的认为大概就是这样子。当然如果要准确的话需要算一个比较麻烦的二元方程。
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