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Biology版 - 请教一下小片段dna连接的问题
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话题: 片段话题: dna话题: 连接话题: pcr话题: 70bp
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R***t
发帖数: 100
1
有两个短的DNA片段,一个70bp,一个140bp,片段的两端都有黏性酶切位点,我想把它
们连接起来。
请问是否可以直接连接呢?还是需要做overlap extension PCR?
谢谢各位的解答。
s******s
发帖数: 13035
2
你为啥认为不能直接连呢?

【在 R***t 的大作中提到】
: 有两个短的DNA片段,一个70bp,一个140bp,片段的两端都有黏性酶切位点,我想把它
: 们连接起来。
: 请问是否可以直接连接呢?还是需要做overlap extension PCR?
: 谢谢各位的解答。

R***t
发帖数: 100
3
没做出来。。。试了好几次。跑胶都是smear。
问朋友,都说这样这样连接的效率低。。。但是我也不知道为什么。
l********e
发帖数: 415
4
做PCR效率高很多

【在 R***t 的大作中提到】
: 有两个短的DNA片段,一个70bp,一个140bp,片段的两端都有黏性酶切位点,我想把它
: 们连接起来。
: 请问是否可以直接连接呢?还是需要做overlap extension PCR?
: 谢谢各位的解答。

k****l
发帖数: 279
5
直接合成210bp双链DNA可能也就三四百块钱
不值得折腾

【在 R***t 的大作中提到】
: 有两个短的DNA片段,一个70bp,一个140bp,片段的两端都有黏性酶切位点,我想把它
: 们连接起来。
: 请问是否可以直接连接呢?还是需要做overlap extension PCR?
: 谢谢各位的解答。

Y*******n
发帖数: 15
6
三段连接(A+B+Vector) 没问题, 直接上
s******s
发帖数: 13035
7
gblock也就$89, 四天内交货

【在 k****l 的大作中提到】
: 直接合成210bp双链DNA可能也就三四百块钱
: 不值得折腾

R***t
发帖数: 100
8
谢谢各位大神!
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