w********a
发帖数: 324 | 1 正在构建CRISPR/Cas9的vector做genome Editing。可是怎么都不work。
现在想先试一下Cas9 protein的 in vitro activity （targeting on 我们的 target
system），不知道各位知不知道市场上有没有commercially available的Cas9 protein
可以订购？
谢谢！ |
b***2
发帖数: 348 | 2 你自己愿意纯化蛋白的话，addgene上有质粒，自己表达.ID: 39312 |
w********a
发帖数: 324 | 3 多谢！
我们request了这个质粒，准备自己纯化。但是我们没有蛋白纯化的基础，所以，如果
有现成的话，就想直接花钱买了。
你试过吗？用他们的这个质粒以及他们的protocol，纯化的效果如何？
【在 b***2 的大作中提到】
: 你自己愿意纯化蛋白的话，addgene上有质粒，自己表达.ID: 39312
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s********n
发帖数: 2939 | |
b***2
发帖数: 348 | 5 我同实验室的做过。你如果不是要求很纯的话，问题不大，方法也简单。如果你要求高
纯度的话，没有基础估计有点困难。 |
g********6
发帖数: 86 | |
w********a
发帖数: 324 | 7 已买。多谢！
【在 g********6 的大作中提到】
: NEB有卖
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m*****z
发帖数: 1451 | 8 这是史上最容易上手的genome editing技术了吧，不work的话也不用troubleshoot这种
in vitro cutting activity吧，只要序列没错怎样都能cut的啊
target
protein
【在 w********a 的大作中提到】
: 正在构建CRISPR/Cas9的vector做genome Editing。可是怎么都不work。
: 现在想先试一下Cas9 protein的 in vitro activity （targeting on 我们的 target
: system），不知道各位知不知道市场上有没有commercially available的Cas9 protein
: 可以订购？
: 谢谢！
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