l**********t 发帖数: 138 | 1 RNA标本来源于体外培养的人骨髓基质细胞,发现有人用荧光定量PCR做出这样的结果,
靶基因在32左右,GAPDH在30-32之间,这实验结果还可靠不? |
d********0 发帖数: 534 | 2 晕,GAPDH应该比belta-actin还稳定吧,怎么可能这么少,我们老板说过,大于30的
gene要么是不表达,要么是有问题,因为就是一点样品都不加,也可能跑出30,大于30
就与机器误差很难鉴别了 |
l**********t 发帖数: 138 | 3 如何把GAPDH的Ct值做到30以上,有可能吗? |
d****i 发帖数: 2346 | 4
是30一下吧?浓度提高点试试看。
【在 l**********t 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 如何把GAPDH的Ct值做到30以上,有可能吗?
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l**********t 发帖数: 138 | 5 我的意思是,我不知道那家伙是怎么把Ct做到30以上的
【在 d****i 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : : 是30一下吧?浓度提高点试试看。
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d****7 发帖数: 109 | 6 有可能是引物不咋样,重新设计个引物,或者干脆花钱买现成的好引物
【在 l**********t 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 我的意思是,我不知道那家伙是怎么把Ct做到30以上的
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l********e 发帖数: 415 | 7 Dissociation curve 有看到产物么 ...
【在 l**********t 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : RNA标本来源于体外培养的人骨髓基质细胞,发现有人用荧光定量PCR做出这样的结果, : 靶基因在32左右,GAPDH在30-32之间,这实验结果还可靠不?
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l**********t 发帖数: 138 | 8 我不怀疑引物,google scholar搜索有2330篇文献用这对引物
我自己做过Ct值一般在15-17左右,我就是不知道那伙计怎么做出30多的
【在 d****7 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 有可能是引物不咋样,重新设计个引物,或者干脆花钱买现成的好引物
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s******s 发帖数: 13035 | 9 他的扩增效率是多少?
【在 l**********t 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 我不怀疑引物,google scholar搜索有2330篇文献用这对引物 : 我自己做过Ct值一般在15-17左右,我就是不知道那伙计怎么做出30多的
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l**********t 发帖数: 138 | 10 我也不知道,主要是重复不出他得出的趋势
【在 s******s 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 他的扩增效率是多少?
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d****i 发帖数: 2346 | 11
是不是人家把浓度算错了。。。。
【在 l**********t 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 我不怀疑引物,google scholar搜索有2330篇文献用这对引物 : 我自己做过Ct值一般在15-17左右,我就是不知道那伙计怎么做出30多的
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n********e 发帖数: 1630 | 12 标准曲线呢? 30以上的CT应该就是noise吧 没有template的sample也是32-35 |
l**********t 发帖数: 138 | 13 大家一般检测到GAPDH的Ct值是多少呢?
★ 发自iPhone App: ChineseWeb 8.2.2
【在 n********e 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 标准曲线呢? 30以上的CT应该就是noise吧 没有template的sample也是32-35
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h*******o 发帖数: 4884 | 14 这种应该是cDNA里面有抑制pcr的东西了吧
你有其他基因做出来低于20或者25的吗? |
p*****a 发帖数: 3634 | 15 什么可靠不可靠,都是骗人玩的,差不多了就出图发文章,有什么可多想的。
不过,这个GAPDH的 Ct都在30以上,是不是cdna浓度太太低了? |
s******s 发帖数: 13035 | 16 这玩意把原始数据拿出来看看就知道了,估计是效率问题
【在 l**********t 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 我也不知道,主要是重复不出他得出的趋势
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