l**********t
发帖数: 138 | 1 RNA标本来源于体外培养的人骨髓基质细胞，发现有人用荧光定量PCR做出这样的结果，
靶基因在32左右，GAPDH在30-32之间，这实验结果还可靠不？ |
d********0
发帖数: 534 | 2 晕，GAPDH应该比belta-actin还稳定吧，怎么可能这么少，我们老板说过，大于30的
gene要么是不表达，要么是有问题，因为就是一点样品都不加，也可能跑出30，大于30
就与机器误差很难鉴别了 |
l**********t
发帖数: 138 | 3 如何把GAPDH的Ct值做到30以上，有可能吗？ |
d****i
发帖数: 2346 | 4
是30一下吧？浓度提高点试试看。
【在 l**********t 的大作中提到】
: 如何把GAPDH的Ct值做到30以上，有可能吗？
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l**********t
发帖数: 138 | 5 我的意思是，我不知道那家伙是怎么把Ct做到30以上的
【在 d****i 的大作中提到】
:
: 是30一下吧？浓度提高点试试看。
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d****7
发帖数: 109 | 6 有可能是引物不咋样，重新设计个引物，或者干脆花钱买现成的好引物
【在 l**********t 的大作中提到】
: 我的意思是，我不知道那家伙是怎么把Ct做到30以上的
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l********e
发帖数: 415 | 7 Dissociation curve 有看到产物么 ...
【在 l**********t 的大作中提到】
: RNA标本来源于体外培养的人骨髓基质细胞，发现有人用荧光定量PCR做出这样的结果，
: 靶基因在32左右，GAPDH在30-32之间，这实验结果还可靠不？
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l**********t
发帖数: 138 | 8 我不怀疑引物，google scholar搜索有2330篇文献用这对引物
我自己做过Ct值一般在15-17左右，我就是不知道那伙计怎么做出30多的
【在 d****7 的大作中提到】
: 有可能是引物不咋样，重新设计个引物，或者干脆花钱买现成的好引物
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s******s
发帖数: 13035 | 9 他的扩增效率是多少？
【在 l**********t 的大作中提到】
: 我不怀疑引物，google scholar搜索有2330篇文献用这对引物
: 我自己做过Ct值一般在15-17左右，我就是不知道那伙计怎么做出30多的
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l**********t
发帖数: 138 | 10 我也不知道，主要是重复不出他得出的趋势
【在 s******s 的大作中提到】
: 他的扩增效率是多少？
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d****i
发帖数: 2346 | 11
是不是人家把浓度算错了。。。。
【在 l**********t 的大作中提到】
: 我不怀疑引物，google scholar搜索有2330篇文献用这对引物
: 我自己做过Ct值一般在15-17左右，我就是不知道那伙计怎么做出30多的
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n********e
发帖数: 1630 | 12 标准曲线呢？ 30以上的CT应该就是noise吧 没有template的sample也是32-35 |
l**********t
发帖数: 138 | 13 大家一般检测到GAPDH的Ct值是多少呢？
★ 发自iPhone App: ChineseWeb 8.2.2
【在 n********e 的大作中提到】
: 标准曲线呢？ 30以上的CT应该就是noise吧 没有template的sample也是32-35
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h*******o
发帖数: 4884 | 14 这种应该是cDNA里面有抑制pcr的东西了吧
你有其他基因做出来低于20或者25的吗？ |
p*****a
发帖数: 3634 | 15 什么可靠不可靠，都是骗人玩的，差不多了就出图发文章，有什么可多想的。
不过，这个GAPDH的 Ct都在30以上，是不是cdna浓度太太低了？ |
s******s
发帖数: 13035 | 16 这玩意把原始数据拿出来看看就知道了，估计是效率问题
【在 l**********t 的大作中提到】
: 我也不知道，主要是重复不出他得出的趋势
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