r******k
发帖数: 446 | 1 小弟最近做cell fractionation。 用的pierce的kit。 结果用alpha tublin做
cytosolic marker， p-a84做nuclear marker。 竟然观察到tublin在nucleus也有少量
表达，这是为啥呢？难道真有cytosol的污染？ 还是应该换一个cytosolic marker呢？
跪谢！ |
x********e
发帖数: 35261 | 2 tubulin可能是细胞核骨架的一部分，这个问题好像现在还没搞清楚，可以换个细胞质
marker
【在 r******k 的大作中提到】
: 小弟最近做cell fractionation。 用的pierce的kit。 结果用alpha tublin做
: cytosolic marker， p-a84做nuclear marker。 竟然观察到tublin在nucleus也有少量
: 表达，这是为啥呢？难道真有cytosol的污染？ 还是应该换一个cytosolic marker呢？
: 跪谢！
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r******k
发帖数: 446 | 3 谢谢！
但是看到文章上做完cell fractionation发觉他们nucleus里面一点都不能检测到
tublin。 。。。
【在 x********e 的大作中提到】
: tubulin可能是细胞核骨架的一部分，这个问题好像现在还没搞清楚，可以换个细胞质
: marker
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s********r
发帖数: 312 | 4 做的干净基本上是检测不到的，一般推荐拿掉cyto的supernatant后，pellet用预冷PBS
vortex/Spin down洗3-5遍，然后再加nucleus lysis buffer |
g*********5
发帖数: 2533 | 5 which one is better? I found HSP90 still in the nuclear...
【在 x********e 的大作中提到】
: tubulin可能是细胞核骨架的一部分，这个问题好像现在还没搞清楚，可以换个细胞质
: marker
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