c*******e 发帖数: 5818 | 1 我能不能直接用PCR product为entry DNA做LR cloning,我的target vector has R4--
ccdB--R3,我想用PCR product has L4--PCR--L3,不知这样可以不。这样可以跳过BP
cloning。多谢 |
s**********n 发帖数: 29 | |
c*******e 发帖数: 5818 | 3 谢了,那我就去试试!
【在 s**********n 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 可以
|
l******a 发帖数: 3339 | 4 没问题
【在 c*******e 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 我能不能直接用PCR product为entry DNA做LR cloning,我的target vector has R4-- : ccdB--R3,我想用PCR product has L4--PCR--L3,不知这样可以不。这样可以跳过BP : cloning。多谢
|
c*******e 发帖数: 5818 | 5 又看了一下,这att L R 序列太长了,直接连在pcr引物上太困难了,有什么好办法吗?
【在 l******a 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 没问题
|
c*******e 发帖数: 5818 | 6 有什么好的建议吗?多谢!
吗?
【在 c*******e 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 又看了一下,这att L R 序列太长了,直接连在pcr引物上太困难了,有什么好办法吗?
|
l******a 发帖数: 3339 | 7 我是把他从vector上pcr下来的。可以用长primer,但是这个不好p,因为primer会
dimerize,但不是不行。
吗?
【在 c*******e 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 又看了一下,这att L R 序列太长了,直接连在pcr引物上太困难了,有什么好办法吗?
|
c*******e 发帖数: 5818 | 8 没太明白,我的entry DNA is PCR product,因为没有att LR,所以想再引物上加。你
这听起来象你的entry DNA已经有flank的att LR site,这样是不是就可以直接用
vector去做了。
【在 l******a 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 我是把他从vector上pcr下来的。可以用长primer,但是这个不好p,因为primer会 : dimerize,但不是不行。 : : 吗?
|