问一个关于CRISPR的幼稚问题 - Biology版 - 未名存档

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Biology版 - 问一个关于CRISPR的幼稚问题

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相关话题的讨论汇总
话题: crispr话题: sgrna话题: 要切话题: 幼稚话题: 问题

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k****l 发帖数: 279	1 做construct，要切的地方没有合适的内切酶想用NEB的 Cas9 做体外的 CRISPR来切质粒，需要sgRNA，网页上建议做 in vitro transcription 不知化学合成 sgRNA oligo 是否可行，会有folding 方面的问题吗？谢谢大家！
s***k 发帖数: 29	2 为何一定要切？用Primer 和DNA polymerase来linearize plasmid？外行抛砖引玉的回复
k****l 发帖数: 279	3 你说的很好，只是我的plasmid 15k，PCR可能会比较困难【在 s***k 的大作中提到】 : 为何一定要切？用Primer 和DNA polymerase来linearize plasmid？外行抛砖引玉的回 : 复
s*****i 发帖数: 315	4 左右各多切一段，再gibson assembly把它们连回去 ★ 发自iPhone App: ChineseWeb 8.7 【在 k****l 的大作中提到】 : 你说的很好， : 只是我的plasmid 15k，PCR可能会比较困难

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