j****x
发帖数: 1704 | 1 之前没留意过，近期突然发现，Clontech家的所有Lentiviral vector系统，包括其经
典的Tet-on/off/one lentivector，尽管宣传是最安全的第四代载体系统，但其中的
HIV-1 5'/3' LTR居然都是wildtype的而并非是被几乎所有其他商用载体所一致采用的
truncated/∆U3 LTR，作为self-inactivating (SIN) vector。这是件很奇怪的
事情，有哪位对Lentiviral vector比较熟悉的能讲讲吗？谢谢 |
j******i
发帖数: 939 | 2 现在其实只有三代，包括用来基因治疗的都是三代。如果没有U3 deletion的话，就是
二代。二代的特征是一共三个包装质粒，三代是四个质粒。
【在 j****x 的大作中提到】
: 之前没留意过，近期突然发现，Clontech家的所有Lentiviral vector系统，包括其经
: 典的Tet-on/off/one lentivector，尽管宣传是最安全的第四代载体系统，但其中的
: HIV-1 5'/3' LTR居然都是wildtype的而并非是被几乎所有其他商用载体所一致采用的
: truncated/∆U3 LTR，作为self-inactivating (SIN) vector。这是件很奇怪的
: 事情，有哪位对Lentiviral vector比较熟悉的能讲讲吗？谢谢
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V******t
发帖数: 444 | 3 只用两个包装的呢？
pMD2.G psPAX2
或者
pCMV-dR8.2 dvpr＋pCMV VSVG
【在 j******i 的大作中提到】
: 现在其实只有三代，包括用来基因治疗的都是三代。如果没有U3 deletion的话，就是
: 二代。二代的特征是一共三个包装质粒，三代是四个质粒。
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j******i
发帖数: 939 | 4 那就是一代了。基本上是个HIV了，只是把膜蛋白和其他成分分开，一般做HIV的才用。
【在 V******t 的大作中提到】
: 只用两个包装的呢？
: pMD2.G psPAX2
: 或者
: pCMV-dR8.2 dvpr＋pCMV VSVG
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r***e
发帖数: 2539 | 5 两个质粒的是2代，3个是3代。
他说的4个的是所谓的4代，应该是有个tet-on控制。
一般都是用3个。
【在 V******t 的大作中提到】
: 只用两个包装的呢？
: pMD2.G psPAX2
: 或者
: pCMV-dR8.2 dvpr＋pCMV VSVG
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B******o
发帖数: 496 | 6 为啥要用clontech的？ sbi的选择多很多啊，除非你一定要inducible
【在 j****x 的大作中提到】
: 之前没留意过，近期突然发现，Clontech家的所有Lentiviral vector系统，包括其经
: 典的Tet-on/off/one lentivector，尽管宣传是最安全的第四代载体系统，但其中的
: HIV-1 5'/3' LTR居然都是wildtype的而并非是被几乎所有其他商用载体所一致采用的
: truncated/∆U3 LTR，作为self-inactivating (SIN) vector。这是件很奇怪的
: 事情，有哪位对Lentiviral vector比较熟悉的能讲讲吗？谢谢
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j******i
发帖数: 939 | 7 那请问一代的是什么？一个质粒😓？至少得把膜蛋白和其他病毒结构分开吧（
一代两个质粒）！否则就是HIV, 不是vector了。tet-on根本就不够分带的标准，就是
换了一个启动子而已，最多算商家的镢头。
【在 r***e 的大作中提到】
: 两个质粒的是2代，3个是3代。
: 他说的4个的是所谓的4代，应该是有个tet-on控制。
: 一般都是用3个。
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l***y
发帖数: 638 | 8 我也想说来着，addgene大把随便挑
【在 B******o 的大作中提到】
: 为啥要用clontech的？ sbi的选择多很多啊，除非你一定要inducible
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B******o
发帖数: 496 | 9 对的，addgene上也有一大堆，各种组合应有尽有。
packaging质粒，addgene上pax2那个效率不高，sbi或者sigma的都很不错
【在 l***y 的大作中提到】
: 我也想说来着，addgene大把随便挑
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l***y
发帖数: 638 | 10 一代有点用不到的hiv序列吧，二代都给去了
【在 j******i 的大作中提到】
: 那请问一代的是什么？一个质粒😓？至少得把膜蛋白和其他病毒结构分开吧（
: 一代两个质粒）！否则就是HIV, 不是vector了。tet-on根本就不够分带的标准，就是
: 换了一个启动子而已，最多算商家的镢头。
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r***e
发帖数: 2539 | 11 对，4代就是噱头。刚才google了下，还是5个质粒。
lenti最早是我们实验室开发的，现在也是用3个质粒的系统。
【在 j******i 的大作中提到】
: 那请问一代的是什么？一个质粒😓？至少得把膜蛋白和其他病毒结构分开吧（
: 一代两个质粒）！否则就是HIV, 不是vector了。tet-on根本就不够分带的标准，就是
: 换了一个启动子而已，最多算商家的镢头。
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r***e
发帖数: 2539 | 12 https://www.addgene.org/lentiviral/packaging/
http://www.clontech.com/US/Products/Viral_Transduction/Lentivir
Lentiviral_Packaging_Overview
【在 j******i 的大作中提到】
: 那请问一代的是什么？一个质粒😓？至少得把膜蛋白和其他病毒结构分开吧（
: 一代两个质粒）！否则就是HIV, 不是vector了。tet-on根本就不够分带的标准，就是
: 换了一个启动子而已，最多算商家的镢头。
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j******i
发帖数: 939 | 13 这位老大，去掉的只是一些无关紧要的附属蛋白比如VPR, NEF.
【在 l***y 的大作中提到】
: 一代有点用不到的hiv序列吧，二代都给去了
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j****x
发帖数: 1704 | 14 Clontech是五质粒系统，号称的四代，至于他家为什么不用U3 deletion SIN系统，实
在是搞不懂。
http://www.clontech.com/US/Products/Viral_Transduction/Lentivir
【在 j******i 的大作中提到】
: 现在其实只有三代，包括用来基因治疗的都是三代。如果没有U3 deletion的话，就是
: 二代。二代的特征是一共三个包装质粒，三代是四个质粒。
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j****x
发帖数: 1704 | 15 不用肯定是有原因的了，呵呵，没办法的事情
【在 l***y 的大作中提到】
: 我也想说来着，addgene大把随便挑
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