s*******1 发帖数: 188 | 1 addgene上买了zhang feng实验室的lentiCRISPR V2质粒,然后老板从文献上找了两个
sgRNA,克隆进去,做病毒,转染细胞,这些都是常规实验,没有任何问题。
然后老板让我测序看看是否对目的基因的编码序列产生影响。
由于是新手,看的文献也不多,请问大侠们,怎么能够测序分析出sRNA对目的基因的编
码序列的改变呢?
谢谢 |
j****n 发帖数: 3370 | 2 不是太明白?不就是看看有没deletion?
【在 s*******1 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : addgene上买了zhang feng实验室的lentiCRISPR V2质粒,然后老板从文献上找了两个 : sgRNA,克隆进去,做病毒,转染细胞,这些都是常规实验,没有任何问题。 : 然后老板让我测序看看是否对目的基因的编码序列产生影响。 : 由于是新手,看的文献也不多,请问大侠们,怎么能够测序分析出sRNA对目的基因的编 : 码序列的改变呢? : 谢谢
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d****u 发帖数: 1553 | 3 第一种方法是你在你目的基因的target位置上下游个几百个bp的地方设计个引物拉PCR
,然后测序这个PCR产物就可以知道你的突变率了。
第二种方法是如果你挑单克隆了的话,直接把上述PCR产物做T载体然后测序 |
s*******1 发帖数: 188 | 4 thank you
PCR
【在 d****u 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 第一种方法是你在你目的基因的target位置上下游个几百个bp的地方设计个引物拉PCR : ,然后测序这个PCR产物就可以知道你的突变率了。 : 第二种方法是如果你挑单克隆了的话,直接把上述PCR产物做T载体然后测序
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