请教冰冻切片组织中如何避免裂痕的问题 - Biology版 - 未名存档

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Biology版 - 请教冰冻切片组织中如何避免裂痕的问题

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h*********g 发帖数: 18	1 我在切胚胎脑组织，很小。我是先4%PFA固定overnight，然后PBS wash 3 times, then put in 30%sucrose overnight。Then put the tissue in OCT. Then quick freeze by putting the cryomold in isopentane with dry ice.Cryosection at -20 degree , cut 10um.切过后发现组织中总有裂痕，空洞，有时象是被撕开一样。请问怎么避免这类问题？谢谢。
D*a 发帖数: 6830	2 你确定你切的没问题么，感觉这么小不应该出这种情况啊，刀片角度不对或者过快过慢也有可能这样
c**********r 发帖数: 2372	3 温度降低一点试试
z*******6 发帖数: 679	4 包的时候确定没有泡泡吧？... 这个会导致有洞...
H****N 发帖数: 997	5 切厚点，14-16 um

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