D*a
发帖数: 6830 | 1 我打算做冷冻胚胎切片。以前是sucrose/gelatine包埋，现在是冷冻剂包埋，用的是
FSC22 leica，哪种好呢？另外如果我直接包埋有什么需要注意的事项吗？没做过。
以前用的是sucrose之后 sucrose/gelatine包埋。好处就是冷冻之前完全透明，可以切
割，到时候冷冻之后不用一个劲的摇手柄找tissue。坏处呢就是我没做过我现在这种，
不知道37度一天对YFP荧光有没有影响。
sucrose之后直接OCT包埋有什么优点呢？现在实验室用的是冷冻剂包埋（FSC22 leica
），对我的好处就是protocol半现成（paper上扒下来的），可以直接跟以前的图对比
。话说OCT是什么的缩写？FSC22是不是一种OCT，还是OCT有特指？
多谢指教！ |
H****N
发帖数: 997 | 2 OCT stands for optimum cutting temperature, is Tissue-Tek's brand name. We
use it to embed GFP-expressing tissue all the time and the signals are
maintained well. We never treat the tissues at 37 C though. |
D*a
发帖数: 6830 | 3 我以前用的是TomatoRed在brain里 那个红通通啊 换了YFP 换了organ 换了年龄 我也
不敢瞎搞啊
【在 H****N 的大作中提到】
: OCT stands for optimum cutting temperature, is Tissue-Tek's brand name. We
: use it to embed GFP-expressing tissue all the time and the signals are
: maintained well. We never treat the tissues at 37 C though.
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D*a
发帖数: 6830 | 4 请问从sucrose里面捞出来就可以用包埋剂冷冻吗，我看有的地方说要泡一泡sucrose/
包埋剂
【在 H****N 的大作中提到】
: OCT stands for optimum cutting temperature, is Tissue-Tek's brand name. We
: use it to embed GFP-expressing tissue all the time and the signals are
: maintained well. We never treat the tissues at 37 C though.
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n***w
发帖数: 2405 | 5 可以直接包埋的，不一定要泡一泡。
【在 D*a 的大作中提到】
: 请问从sucrose里面捞出来就可以用包埋剂冷冻吗，我看有的地方说要泡一泡sucrose/
: 包埋剂
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z****u
发帖数: 1007 | 6 可以固定后直接OCT包埋。不过sucrose， OCT浸泡后再包埋形态会更好。sample不会是
透明的，PFA固定后都是有些褐色的，很容易就知道切到哪里了。
37度一天对荧光没有任何影响。别说一天了。。我的需要脱钙的sample经常室温EDTA脱
钙个把星期都没问题。 TdTomato非常稳定。 YFP我不太喜欢，也不是很熟悉其稳定性
。 |
D*a
发帖数: 6830 | 7 谢谢！
【在 n***w 的大作中提到】
: 可以直接包埋的，不一定要泡一泡。
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D*a
发帖数: 6830 | 8 谢谢！就是说用sucrose跟OCT混起来泡一下更好，泡多长时间呢？
【在 z****u 的大作中提到】
: 可以固定后直接OCT包埋。不过sucrose， OCT浸泡后再包埋形态会更好。sample不会是
: 透明的，PFA固定后都是有些褐色的，很容易就知道切到哪里了。
: 37度一天对荧光没有任何影响。别说一天了。。我的需要脱钙的sample经常室温EDTA脱
: 钙个把星期都没问题。 TdTomato非常稳定。 YFP我不太喜欢，也不是很熟悉其稳定性
: 。
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H****N
发帖数: 997 | 9 1 hr
【在 D*a 的大作中提到】
: 谢谢！就是说用sucrose跟OCT混起来泡一下更好，泡多长时间呢？
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D*a
发帖数: 6830 | 10 多谢！
【在 H****N 的大作中提到】
: 1 hr
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