B***v
发帖数: 113 | 1 很影响试验心情，是不是trypsin时间太长，还是trypsin浓度太高（0.25%）？
我摸索了一下还是经常成团。
哪位同学有经验？ |
s*****y
发帖数: 32 | 2 我一般是trypsin把细胞消化好，就马上用血清中和。这样细胞就不会成团。 |
r******k
发帖数: 446 | 3 吹打的时候用培养基
【在 B***v 的大作中提到】
: 很影响试验心情，是不是trypsin时间太长，还是trypsin浓度太高（0.25%）？
: 我摸索了一下还是经常成团。
: 哪位同学有经验？
|
D*a
发帖数: 6830 | |
T*****e
发帖数: 247 | |
a******r
发帖数: 786 | |
m*********D
发帖数: 1727 | 7 我的感觉是你over-treated.细胞成团往往是DNA出来的缘故。我看了我们的trypsin/
EDTA,我们用的是0。05%，比你的低五倍。
我一般的程序是：PBS洗一次后，T75加1-1。5 mltrypsin，用手转动flask,让trypsin
cover所有的细胞表面，然后把trypsin suck away。把flask放iincubator 3-5分钟就
可以了。不晃动，在microscope下改看到的都市单细胞。如果下不来，往往是PBS没洗
好，可以多洗一次。
肝细胞会例外。它们本来就抱团。这个只能靠needle来处理。 |
c**********r
发帖数: 891 | |
