l**********1
发帖数: 5204 | 1 Re LZ
pls refer one PhD dissertation
by Gernot Guderian (2010) of Basel University
title:
"Control of Centriole Numbers by Plk4 Autophosphorylation and βTrCP-
mediated Degradation"
link:
//edoc.unibas.ch/1233/
or
PDF link:
//edoc.unibas.ch/1233/1/Thesis_Gernot_Guderian.pdf
its pp25
2.5.2
The SCF^βTrCP Complex
To achieve high substrate specificity, cells express many different E2
enzymes (about 30)
and even more E3 ligases (more than 300).
The latter are categorized into four major
classes accor... 阅读全帖 |
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A******y
发帖数: 2041 | 2 What's the best assay to test a enzyme's ability to ubiquitinate. I'm
studying a well know enzyme with two catalytic sites and I found a meeting
abstract saying one of the domain has nothing to do with its normal function
but it is a E3 ligase. The full paper is not published, so I don't know
how solid the data is. I have the recombinant enzyme plus mutants for each
catalytic site. The interesting part is the enzyme itself have been
published to bind several known E3 ligase, I wounder the ab... 阅读全帖 |
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n*****e
发帖数: 40 | 3 DTT是还原剂。一般的DNA ligase都喜欢还原性的环境。DNA ligation的buffer里面一
般都添加DTT是为了ligase的稳定性。
DNA |
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T**********t
发帖数: 1604 | 4 DTT是还原二硫键用的，一般用来保护蛋白不形成oligomer。在这里估计是用来保护T4
DNA ligase的。 |
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W*H
发帖数: 3 | 5 I am doing a cloning that involves inserting three large pieces into a
vector. I remembered that in biology Board someone recommended a kind of
ligase that works well for large pieces ligation. However I could not find
it by searching the biology board. Please help me. Your help is greatly
appreciated. |
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S*****s
发帖数: 287 | 6 我正在做一个 5 kb 和 8.2 kb 片段的 ligation，效率蛮高，就是用 NEB T4 ligase
16 度反应过夜，然后用电转化。你做的片段多大？ |
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D******9
发帖数: 2665 | 7 很多E3 ligase底物有motif, 像最近在大肠癌中常突变基因FBW7，底物都有
phosphorylated substrate motif, termed the Cdc4 phosphodegron (CPD）。
但它本身受不受磷酸化调控我不是很清楚。 |
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i*****g
发帖数: 11893 | 8 根据我的记忆，好像是caltech Ramond D 的seminar，2008（2007年）年吧
Ub E3 ligase的数量很多很多，那时已经知道有500个之多了，可以媲美phospho
kinase 800个之多那个数量，两者均为繁复调控的手段
E1 大概12个, E2 50-80个
所以，这么多E3，可以想象是很复杂的故事 |
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s****a
发帖数: 436 | 9 【 以下文字转载自 Biology 讨论区 】
发信人: sevana (dreamer), 信区: Biology
标 题: 请教问题：DTT在T4 ligase， ATP中的作用是什么？
发信站: BBS 未名空间站 (Sat Apr 17 21:16:26 2010, 美东)
最近做DNA ligation. 请问大家，DTT在T4 ligation 中的作用是什么？查了资料，DNA
ligation中主要起作用的是ATP 和 Mg2+. DTT是不是起到保护ATP，防止其被氧化的
？请问有专门的文献介绍DTT的作用么？Thanks. |
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C*******e
发帖数: 4348 | 10 RNA ligase
RNA ligase可以催化RNA-RNA，RNA-DNA的ligation
而且其催化效率比DNA ligase高多了
可以说DNA ligase真是一个很烂的酶啊 |
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A********e
发帖数: 354 | 11 【 以下文字转载自 Biology 讨论区 】
发信人: albertsmwk (.)(.), 信区: Biology
标 题: 第一批“青年千人计划”生物类@publication列表@
发信站: BBS 未名空间站 (Thu Aug 18 15:04:16 2011, 美东)
花了一个小时，深深的鄙视一下自己的无聊行径！！
125 蔡亮 男 1980年11月 复旦大学 生命
科学 2007年12月毕业于[美国]北卡大学 [美国]加州大学旧金山分校 博士后
Cai L, Mostov K. Polarity is destiny. Cell. 2009 Nov 13;139(4):660-2. PubMed
PMID: 19914162; PubMed Central PMCID: PMC2900917.
Cai L, Makhov AM, Schafer DA, Bear JE. Coronin 1B antagonizes cortactin and
remodels Arp2/3-containing actin branche... 阅读全帖 |
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p*******g
发帖数: 2976 | 12 【 以下文字转载自 Biology 讨论区 】
发信人: albertsmwk (.)(.), 信区: Biology
标 题: 第一批“青年千人计划”生物类@publication列表@
发信站: BBS 未名空间站 (Thu Aug 18 15:04:16 2011, 美东)
花了一个小时，深深的鄙视一下自己的无聊行径！！
125 蔡亮 男 1980年11月 复旦大学 生命
科学 2007年12月毕业于[美国]北卡大学 [美国]加州大学旧金山分校 博士后
Cai L, Mostov K. Polarity is destiny. Cell. 2009 Nov 13;139(4):660-2. PubMed
PMID: 19914162; PubMed Central PMCID: PMC2900917.
Cai L, Makhov AM, Schafer DA, Bear JE. Coronin 1B antagonizes cortactin and
remodels Arp2/3-containing actin branche... 阅读全帖 |
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O***n
发帖数: 13127 | 13 【 以下文字转载自 Biology 讨论区 】
发信人: albertsmwk (.)(.), 信区: Biology
标 题: 第一批“青年千人计划”生物类@publication列表@
发信站: BBS 未名空间站 (Thu Aug 18 15:04:16 2011, 美东)
花了一个小时，深深的鄙视一下自己的无聊行径！！
125 蔡亮 男 1980年11月 复旦大学 生命
科学 2007年12月毕业于[美国]北卡大学 [美国]加州大学旧金山分校 博士后
Cai L, Mostov K. Polarity is destiny. Cell. 2009 Nov 13;139(4):660-2. PubMed
PMID: 19914162; PubMed Central PMCID: PMC2900917.
Cai L, Makhov AM, Schafer DA, Bear JE. Coronin 1B antagonizes cortactin and
remodels Arp2/3-containing actin branche... 阅读全帖 |
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b******r
发帖数: 111 | 14 Anyone has experience of inserting 9kb in a 8.4kb vector? 2 months was gone
,but I get nothing. Would
you like to take a look a this protocol and give me some suggestion ?
Thanks a lot
Purpose: Insert 9kb mouse sequence into vector pPNT6.
Vector pPNT6: Its map is at http://www.addgene.org/pgvec1?
f=c&identifier=11072&atqx=pnt6&cmd=findpl . I have inserted 0.9kb DNA in
this vector at XhoI/EcorI
double sites. I should have no problem in cloning short fragment.
Insert DNA is 9kb.I have cloned t... 阅读全帖 |
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l**********n
发帖数: 240 | 15 Josef Martin Penninger
Most significant scientific contributions:
Our basic approach is to genetically manipulate and change genes in mice and
to
determine the effects of these mutations in development of the whole
organism and in
diseases. From these mutations we are trying to establish basic principles
of
development and basic mechanisms of disease pathogenesis. My laboratory
focuses on
heart diseases, autoimmune diseases and cancers, and bone diseases. On all
the listed
contributions below I ... 阅读全帖 |
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w******e
发帖数: 1187 | 16 多谢！加个问题哈：我看了几篇paper都选择T4 DNA ligase instead of RNA ligase,
不知道用RNA ligase有没有什么concern？ |
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C*******e
发帖数: 4348 | 17 没用过RACE kit
但是做过RACE
你要3'不？
基因多长？
我用的RLM-RACE，就是RNA ligase mediated RACE
你搜文献应该能搜到
具体就是利用RNA ligase可以连ssRNA+ssDNA
合成DNA oligomer，上面有一段adaptor sequence（跟你的目的基因/目的基因组没有
同源性就行），5’端和3’端都要-OH吧，然后RNA ligase会催化把这段DNA连到mRNA上
，再做1st strand cDNA synthesis
然后用gene specific reverse primer和adaptor forward primer (可以是你前面用的
adaptor，也可以重新设计引物，往里面来一点，做巢式PCR）来扩你要的基因
这样子好像应该比$740便宜很多 |
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a********k
发帖数: 2273 | 18 花了一个小时，深深的鄙视一下自己的无聊行径！！
125 蔡亮 男 1980年11月 复旦大学 生命
科学 2007年12月毕业于[美国]北卡大学 [美国]加州大学旧金山分校 博士后
Cai L, Mostov K. Polarity is destiny. Cell. 2009 Nov 13;139(4):660-2. PubMed
PMID: 19914162; PubMed Central PMCID: PMC2900917.
Cai L, Makhov AM, Schafer DA, Bear JE. Coronin 1B antagonizes cortactin and
remodels Arp2/3-containing actin branches in lamellipodia. Cell. 2008 Sep
5;134(5):828-42. PubMed PMID: 18775315; PubMed Central PMCID: PMC2570342.
Cai L, Makhov AM, Bear JE. F-actin... 阅读全帖 |
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w***r
发帖数: 709 | 19 Lin HK, Bergmann S, Pandolfi PP (2004) Cytoplasmic PML function in TGF-beta
signaling. Nature. 431, 205- 211. News and Vews by Le Roy C. and Wrana J. L
(2004) Nature. 431, 142. Commented by Kotz J (assistant editor of Nature
Chemical Biology) (2004). Selected as a Featured Article (Sep 2004) in
Nature Signaling Gateway from Nature publishing group.
Lin HK*, Wang G, Chen Z, Teruya-Feldstein J, Liu Y, Chan CH, Yang WL,
Erdjument-Bromage H, Nimer S, Tempst P, Pandolfi PP* (2009) Phosphorylation-
de... 阅读全帖 |
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j******i
发帖数: 939 | 20 你用的是什么ligase啊。T4 ligase应该是16度或者室温啊。另外，如果是粘末端可以
试一试T7 ligase. 鉴定克隆的时候，用cloning PCR更方便，便宜。 |
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p*******g
发帖数: 2976 | 21 【 以下文字转载自 Biology 讨论区 】
发信人: albertsmwk (.)(.), 信区: Biology
标 题: 第一批“青年千人计划”生物类@publication列表@
发信站: BBS 未名空间站 (Thu Aug 18 15:04:16 2011, 美东)
花了一个小时，深深的鄙视一下自己的无聊行径！！
125 蔡亮 男 1980年11月 复旦大学 生命
科学 2007年12月毕业于[美国]北卡大学 [美国]加州大学旧金山分校 博士后
Cai L, Mostov K. Polarity is destiny. Cell. 2009 Nov 13;139(4):660-2. PubMed
PMID: 19914162; PubMed Central PMCID: PMC2900917.
Cai L, Makhov AM, Schafer DA, Bear JE. Coronin 1B antagonizes cortactin and
remodels Arp2/3-containing actin branche... 阅读全帖 |
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j*******4
发帖数: 5 | 22
/* */谢谢！！！
不好意思，我忘了把简历贴上。谢谢大家的帮忙！！！
Fei Jiang
PROFILE
Master of Public Health candidate concentrating in Biostatistics.
Experienced in study design, data collection, database management, the
methods and techniques of statistical analysis such as linear regression,
logistic regression, survival data analysis and correlated data analysis.
Over 5 years’ experience utilizing statistical analysis software SAS and
SPSS. Efficient in both a team environment and working independently.
Exceptional wri... 阅读全帖 |
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b******n
发帖数: 4225 | 23 NEB的好处是ligase可以在限制性内切酶的buffer中工作
对于一些tricky的克隆非常好用
比如说防止平末端单酶切自连可以加对应酶已减少背景自连
Promega的酶挺稳定的
咱们实验室03年的酶还能work
主要不爽的是T4 DNA ligase的buffer跟RE的buffer不兼容
另外Promega有30种酶经过测试1ul可以在五分钟内酶切完全1ug质粒DNA
这种高效性还是比较靠谱的
NEB的RE没有这方面的数据，心里没底 |
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s**e
发帖数: 1523 | 24 我们一般用NEB的RE和ligase。尤其要赞ligase，室温半小时搞定。想起以前我用Roche
的，前辛万苦地调16C，然后overnight。。。就很郁闷。 |
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a***e
发帖数: 1010 | 25 you need a bridge DNA.
check NEB
Taq DNA Ligase catalyzes the formation of a phosphodiester bond between
juxtaposed 5′ phosphate and 3′ hydroxyl termini of two adjacent
oligonucleotides which are hybridized to a complementary target DNA. The
ligation will occur only if the oligonucleotides are perfectly paired to the
complementary target DNA and have no gaps between them; therefore, a single
-base substitution can be detected. Taq DNA Ligase is active at elevated
temperatures (45°C-65°C) (1,2). |
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x*****e
发帖数: 309 | 26 贴个我的做法吧，成功率很高，供参考。
1、引物退火溶液Annealing buffer: NaCl 100 mM, Hepes 50 mM, pH 7.4
(1ml: NaCl 2M 50ul, HEPES 1M 50ul, 加水至1 ml，pH试纸调pH)
2、引物浓度约=28.3ug/OD, 加入94ul Annealing Buffer 至终浓度 0.3 mg/ml
3、加入上下游引物各10 ul，Annealing Buffer 30 ul，90度4分钟，70度10分钟，然
后放到500 ml装有70度热水的烧杯中，室温冷却后连接或-20度保存。
4、连接质粒，加入2ul退火后的产物，1 ul T4 DNA ligase buffer, 1ul pSR/BglII+
HindIII 线性质粒, 5 ul 水，1 ul T4 Ligase. 连接（16度过夜或室温30－120分钟）。
5、加入1 ul Bgl II 至连接产物中，37度消化30分钟，转化感受态细胞。
6、挑取转换子，提质粒，酶切鉴定，注意阴性克隆切出条带大概1kb（227，248和
281bp条带差异不明显，故对 |
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p******i
发帖数: 1092 | 27 计划做一个protein的tetramer，然后用tetramer做binding.
思路是：
1) express protein from 293T supernatant，purify by HIS column
2）in vitro biotinylation by BirA biotin ligase (site-specific)
3) add streptavidin-PE to make TETRAMER
请问大家觉得我这个思路可以吗？
哪位做过TETRAMER的，还请不吝赐教啊～～～多谢了～～～
另外，能请各位看看下面的内容给提点意见吗？因为克隆测过序没问题，但是现在还没
看到secretion的表达 = =
在protein的N端加上：
kozak-preprotrypsin signal peptide（for secretion，貌似这样产量会高一些，而
且可能提纯好做一些）, AviTag peptide (AviTag 是BirA ligase的识别site，可以用
来做site specific的biotinylation)
preprotrypsin ... 阅读全帖 |
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w*****n
发帖数: 107 | 28 the traditional T4 RNA ligase has very low ligation efficiency. While T4 DNA
ligase is very robust. |
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f******s
发帖数: 288 | 29 你这是个试验问题还是理论问题呀？ 我猜lz可能想要设计rna polymerase ＋ ligase
这样的酶出来。
不过偶觉得，从进化的角度讲，dna replication 的时候更需要这样dual function的
酶，因为可用的地方多，连个okazaki fragments的要那么多人轮番跑场，实在太浪费
，呵呵。 有个感觉，以前狂读paper的时候，好像见过有ligase function 的一个dna
polymerase 在repair的时候干活儿。但是这也有可能是我的幻觉，非常不确定，非常
不确定。。。 |
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y******8
发帖数: 1764 | 30 才开张的新所吧。在北大，所是和学院平行的单位，据我所知，北大给新的所都会给一个5年一个亿的启
动支持。
夫妻店开的好才是好，学校也不用担心培养的人才什么时候为了家庭原因就飞走了。另
外，这个所的人才引进不错啊。这一位在千青中也是翘楚。
132 汪阳明 男 1979年12月 北京大学 生命
科学 2006年02月毕业于[美国]伊利诺伊大学厄巴纳－尚佩恩分校 [美国]加州大
学旧金山分校 博士后
1: Wang Y, Blelloch R. Cell cycle regulation by microRNAs in stem cells.
Results
Probl Cell Differ. 2011;53:459-72. PubMed PMID: 21630156.
2: Wang Y, Blelloch R. Cell cycle regulation by MicroRNAs in embryonic stem
cells. Cancer Res. 2009 May 15;69(10):4093-6. Epub 2009 May 12.... 阅读全帖 |
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m*******r
发帖数: 202 | 31 Cell Cycle. 2005 Mar;4(3):453-5. Epub 2005 Mar 7.
Cell cycle markers for live cell analyses.
Easwaran HP, Leonhardt H, Cardoso MC.
SourceMax Delbrück Center for Molecular Medicine, Berlin, Germany.
Abstract
Many cellular processes are regulated by cell cycle dependent changes in
protein dynamics and localization. Studying these changes in vivo requires
methods to distinguish the different cell cycle stages. Here we demonstrate
the use of DNA Ligase I fused to DsRed1 as an in situ marker to ident... 阅读全帖 |
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s*********u
发帖数: 2535 | 33 1. 1500bp片断应该问题不大，算中等长度的ligation，应该是可行的。
2. 五个应该够了，偶一般用的3到4个。
3. 这应该说明不是ligase的问题，很可能是insert和vector的问题。另外，注意
ligase buffer，用新的，这个容易降解。
4. good control。应该是ligation的问题。
5. 为什么要用CIP。质粒是用单一酶切的吗？如果是用的单一酶切的，可能必须使用
CIP防止自连。我们一般用两种不同酶切，这样可不用CIP处理。保证两个酶切完全的情
况下自身连接机率很小。以前用过一次CIP，效果很不好，也是不长克隆菌，有可能的
话建议避免使用。有研究表明CIP如果过度处理会部分甚至完全切掉sticky end。
另外，需要考虑一下，你这个克隆，是否对e.coli有toxic作用而使其不长或生长极缓
慢。
祝成功。
bless all! |
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b*******H
发帖数: 830 | 34 另外一个建议：
NEB的QUICK LIGASE效果奇佳，室温10分钟搞定，本人已用它搞定了上千个CONSTRUCT了
，无一失手。很不明白那么多人还在继续用老的LIGASE。我们的政策是，每天九点上班
来做PCR，下午五点下班前搞定转化，第二天就要拿板子来看结果。 |
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H*******i
发帖数: 196 | 35 各种方法都有优缺点，合理使用才是关键
如果要构建大量同系列克隆，酶切连接自然有优势（至少不用成天买primer），而且在
最后成环一步，酶切连接也是最robust的方法之一（有时二级结构对Gibson/Slic有点
影响，尤其是一律50°C的反应，基于PCR和recombination的问题就更多了。） Scar
只要用overlapping PCR解决就是了。
当然完全构建一个全新的，一次性的需要大量不同片段的东西，自然Gibson assembly
类方法有优势（做特别大的片段也有优势）
Gibson得话 T5 exonuclease https://www.neb.com/products/m0363-t5-exonuclease
Taq ligase https://www.neb.com/products/m0208-taq-dna-ligase
加上polymerase
就两三刀吧。
Slic一样片段，只用T4 DNApolymerase，两片段效率大概低两个数量级。
另外LZ你需不需要额外纯化是根据你片段性质来得，你7kb的是啥？ insert得话必须
纯化，无论什么... 阅读全帖 |
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j******i
发帖数: 939 | 36 6kb插到8kb是很难的，这不是个别现象。可以尝试高溶度的t4 ligase（biolab), t7
ligase, Gibbson Assembly. |
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w***7
发帖数: 1637 | 37 宋的文章够了，experience不够让人信服。
宋的博士学位在中科院拿的，在us做了3-4 年postdoc。宋在us 待的时间太短，对美国
博士培养体制和科研体制先进之处了解得可能不够。一同面试院长的有几个candidate
文章比宋好。武大可能是看到宋在中科院当个官，搞个管理就把it请过来了。武大应该
找一个在美国拿个PhD，然后在us 做postdoc后海归的当院长。
宋自己的科研做得很好，但对宋领导一个院做出像样的改革，大幅提高整个院科研水平
不太看好。
http://www.bio.whu.edu.cn/News_reads.asp?cid=174&id=2574
学习经历：
1993－1997 南京大学生物科学与技术系，学士
1997－2002 中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所，博士
主要工作经历与任职情况：
2002－2005 美国德克萨斯大学西南医学中心，博士后
2005－2014 中科院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所，研究组长，研
究员，博士生导师，“百人计划”择优支持，“百人计划”终期评估优秀。分子生物学
国家重点实验室... 阅读全帖 |
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w***7
发帖数: 1637 | 38 宋的文章够了，experience不够让人信服。
宋的博士学位在中科院拿的，在us做了3-4 年postdoc。宋在us 待的时间太短，对美国
博士培养体制和科研体制先进之处了解得可能不够。一同面试院长的有几个candidate
文章比宋好。武大可能是看到宋在中科院当个官，搞个管理就把it请过来了。武大应该
找一个在美国拿个PhD，然后在us 做postdoc后海归的当院长。
宋自己的科研做得很好，但对宋领导一个院做出像样的改革，大幅提高整个院科研水平
不太看好。
http://www.bio.whu.edu.cn/News_reads.asp?cid=174&id=2574
学习经历：
1993－1997 南京大学生物科学与技术系，学士
1997－2002 中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所，博士
主要工作经历与任职情况：
2002－2005 美国德克萨斯大学西南医学中心，博士后
2005－2014 中科院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所，研究组长，研
究员，博士生导师，“百人计划”择优支持，“百人计划”终期评估优秀。分子生物学
国家重点实验室... 阅读全帖 |
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e****s
发帖数: 1125 | 39 这个Fragment-based的例子举得非常好，当然似乎更多的是应用在NMR结构中。
不知道为什么很多人看不上晶体结构。很多结构工作是非常有挑战的项目。结构的诺贝
尔也拿了不少。记得前几天有人说谢小亮的工作牛，因为难，施一公的工作不行，因为
不难。 这个实在是无知无畏。
做结构的根本是生化，而且是很有意思设计。
比如我就一直很纳闷，当初Koblika 怎么想到把T4 ligase整合到GPCR里面的？听了他
的报告就知道起码一个原因他是要增加蛋白的亲水的性质，而T4 ligase小且非常容易
结晶。同样他用Nano body去稳定GPCR的构想也不是凭空乱试的。
懂行的会知道，很多难结构一方面依靠现在衍射技术的发展，另一方面依靠天才的工程
设计。
晶体怎么会没有用？药物设计我不懂，一个指标说明问题，现在很多大药厂在新建和扩
张结构的组。
晶体对于寻找新的靶点也作用很大。比如很多PAM, NAM的东西。
还有一点，不要老盯着应用。科学不是工程！科学就是回答问题，重要的基础问题回答
了，很多应用问题才有希望。 完全按照应用去引导科学，只会丢了西瓜检了芝麻。
target |
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f***y
发帖数: 4447 | 40 国家应该花大钱引进这类人才。
哈工大报讯（闫明星/文）1月9日，我校生命学院黄志伟教授研究组在《自然》（《
Nature》）在线发表了题目为《艾滋病病毒Vif“劫持"人CBF-β和CUL5 E3 连接酶复合
物的分子机制》（Structural basis for hijacking CBF-β and CUL5 E3 ligase
complex by HIV-1 Vif）的研究论文。该项研究第一次揭示了艾滋病病毒研究领域一直
关注的艾滋病病毒毒力因子（Vif）的结构，破解了这一领域30余年的谜团；阐明了Vif
如何“劫持”人CBF-β以及CUL5 E3 连接酶复合物的分子机制；为理性设计靶向该复合
物的全新艾滋病药物提供了结构基础。该项艾滋病研究领域里程碑意义的研究成果对人
类最终攻克艾滋病具有非常重要的科学意义和临床应用价值，也标志着我校在艾滋病结
构生物学研究领域走在世界最前沿。
该文章被选为精选文章在同期《自然》杂志《新闻与视点》栏目中撰文重点推荐。
该文章发表实现了我校在《自然》（影响因子：38.60）杂志上发表研究论文零
的突破。黄志伟教授为本研究... 阅读全帖 |
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发帖数: 1 | 41 Email on ngAgo sent to the ISTT mailing list：
Dear colleagues,
the publication by Gao et al in May in Nature Biotechnology http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/27136078 triggered an enormous expectation. This Chinese team led by Chunyu Huan reported that the Argonaute (Ago) protein from a rare haloarchaea, Natronobacterium gregoryi, (NgAgo) would efficiently work for gene editing purposes in human cells. Ago had been described as an DNA-guided endonucleases two years before, through a Dutch-Span... 阅读全帖 |
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S*******l
发帖数: 4637 | 42 哈哈哈，新冠病毒序列是公开的，全世界病毒学家都在仔细研究。目前人类分子生物学
技术制作病毒是会留下痕迹的，内切酶，ligase都有切点拼接序列要求，看眼全序列就
知道有没有人工痕迹。
就一帮外行弱智在瞎猜。还有更弱的被随便忽悠。 |
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S*******l
发帖数: 4637 | 43 找到了，是可以bind to ubiquitin ligase，最后结果是降低干扰素合成。
真狡猾。
J Virol. 2017 Mar 29;91(8). pii: e02143-16. doi: 10.1128/JVI.02143-16. Print
2017 Apr 15.
The Severe Acute Respiratory Syndrome Coronavirus Nucleocapsid Inhibits Type
I Interferon Production by Interfering with TRIM25-Mediated RIG-I
Ubiquitination. |
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N******o
发帖数: 3053 | 44 我在NIH时候研究室有钱基本上不Share东西。但是小研究室不是每个人都有一份，比如
这个人，也许他们Lab就她一个人经常做连结所以就她有T4 Ligase，别人偶尔用一下就
会去她盒子拿。我说了，如果别人拿了用了没有与她讲，搞得她自己没有的用了，是很
恼火，大可email大家讲一下下次注意，没有必要贴出来。
我前一段时间用老鼠，大家都用我的，我也无所谓，我有时候也数一数还剩多少，后来
他们用了也没有与我讲，我自己做实验时候不够了。我就发了email说，老鼠虽然是我
订的，但是是研究室的钱，每个人都有权利使用，但是下次用了与我讲一下，我可以心
里有数什么时候要订。
同一个研究室的没有必要这么Mean。这个小日本就是瞧不起别人才会这样做。日本人就
这德行。我们研究室那个日本老剩女也是这么Mean，但是我是东大的，我可以理气直撞
的鄙视她，她也没有办法对我。但是如果我不是东大的，她就会是另一种德行。日本人
的观念：弱者被强者欺负是天经地义的。 |
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m****s
发帖数: 18160 | 45 【 以下文字转载自 Biology 讨论区 】
发信人: Suave911 (911), 信区: Biology
标 题: Post-doc Position Available in Cancer/Signal Transduction
发信站: BBS 未名空间站 (Fri Jun 21 10:21:47 2013, 美东)
Post-doc Position Available in Cancer/Signal Transduction
Molecular Cell Biology, Leiden University Medical Center, The Netherlands
A Post-Doctoral position is available in a dynamic, international and
interdisciplinary research team to study the molecular basis of subverted
TGF-β signal transduction in cancer.
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m****s
发帖数: 18160 | 46 【 以下文字转载自 Biology 讨论区 】
发信人: Suave911 (911), 信区: Biology
标 题: Post-doc Position in Vascular Biology/Signal Transduction
发信站: BBS 未名空间站 (Fri Jun 21 10:22:51 2013, 美东)
Post-doc Position in Vascular Biology/Signal Transduction
Molecular Cell Biology, Leiden University Medical Center, The Netherlands
A Post-Doctoral position is available in a dynamic, international and
interdisciplinary research team to study the molecular basis of subverted
TGF- signal transduction in cardiovascular biolog... 阅读全帖 |
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c********8
发帖数: 1 | 47 A postdoctoral position is available immediately for a highly motivated
individual to study the roles of ubiquitin ligases in regulating cell
adhesion, migration and cancer invasion (Nature 424: 219-223; Nature Cell
Biology 11: 624-630), at Markey Cancer Center, University of Kentucky. We
are seeking candidates with a strong background in molecular biology (on the
DNA, RNA, and protein levels), or cell biology. Imaging experience would
be an advantage.
To apply:
Applicants should send a copy o |
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m****s
发帖数: 18160 | 48 【 以下文字转载自 Biology 讨论区 】
发信人: Suave911 (911), 信区: Biology
标 题: Post-doc Position Available in Cancer/Signal Transduction
发信站: BBS 未名空间站 (Fri Jun 21 10:21:47 2013, 美东)
Post-doc Position Available in Cancer/Signal Transduction
Molecular Cell Biology, Leiden University Medical Center, The Netherlands
A Post-Doctoral position is available in a dynamic, international and
interdisciplinary research team to study the molecular basis of subverted
TGF-β signal transduction in cancer.
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m****s
发帖数: 18160 | 49 【 以下文字转载自 Biology 讨论区 】
发信人: Suave911 (911), 信区: Biology
标 题: Post-doc Position in Vascular Biology/Signal Transduction
发信站: BBS 未名空间站 (Fri Jun 21 10:22:51 2013, 美东)
Post-doc Position in Vascular Biology/Signal Transduction
Molecular Cell Biology, Leiden University Medical Center, The Netherlands
A Post-Doctoral position is available in a dynamic, international and
interdisciplinary research team to study the molecular basis of subverted
TGF- signal transduction in cardiovascular biolog... 阅读全帖 |
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c********g
发帖数: 2075 | 50 给老板审过包括CNS在内的杂志一百多篇，自己受邀给5点多的杂志审过5篇，审稿经验
绝对丰富，有信心让我审稿的请联系email: b***[email protected] 或者站短。 多谢了啊啊
啊啊啊啊。
关键词：
cell signaling, especially TGF-beta and Wnt pathways;
Post-translational modifications;
Kinases, phosphatases, ubiquitin ligases and DUBs;
Proteasome functions and regulations;
Cell cycle control, oncogenes and tumor suppressors;
In vitro and in vivo tumor models;
Cancer metastasis.
neuroscience
neural regeneration |
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