a*****3 发帖数: 565 | 1 想请教纯化蛋白的专家几个问题
1,用Ni-NTA亲和层析柱纯化蛋白,收集到的样品是带有完整的6xhis序列的蛋白
还是洗的时候被洗脱了。
2,有没有人碰到过纯化蛋白没有活性的情况?听说还是很有可能的。
3,如果有可能失活,哪类蛋白比较容易过柱后失去活性呢?
先谢谢了 |
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发帖数: 1 | 3 【 以下文字转载自 Military 讨论区 】
发信人: gc01 (gc01), 信区: Military
标 题: USCIS扩大递解类别 包括申请食品卷买龙虾ZT
发信站: BBS 未名空间站 (Fri Jul 6 19:32:33 2018, 美东)
USCIS扩大递解类别 包含申请移民福利被拒 非法留美
编译黄秀媛/综合5日电 2018年07月06日 06:14
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配合国土安全部的移民执法优先目标,公民及移民服务局 (USCIS)5日发布新准则,更
新核发I-862出庭通知 (Notice to Appear,NTA)的政策,扩大可发出NTA的案件类别,
包括有诈欺和刑事活动证据,或当事人申请移民福利被拒,并非法留在美国。
NTA是发给移民的文件,指示他们在规定日期到移民法庭报到;发出NTA也表示对移民展
开驱逐程序。
USCIS局长西斯纳(Francis Cissna)说:“USCIS官员已有太长的时间,明明发现诈欺或
犯罪活动情事,可是协助确保联邦移民法获得忠实执行的能力却受到限制。
更新的政策向USCIS官员提供他们需要的明确准则,以... 阅读全帖 |
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g**1 发帖数: 10330 | 4 合法移民滥用福利驱逐出境 川普新政策明起实施
编译黄秀媛/综合29日电 2018年09月30日 06:12
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川普政府10月1日开始施行新准则,扩大移民可能受传唤向移民法官报到,以展开驱逐
程序的理由,包括合法移民如违反有关“接受公共福利”的联邦或州政府计画,可能被
递解出境。
“迈阿密前锋报”报导,联邦公民及移民服务局(USCIS)7月间宣布新的驱逐理由清单,
让移民官对核发出庭通知 (Notice to Appear,NTA) 拥有更大的裁量权。
NTA是用于指示非美国公民向移民法庭报到,长久以来代表展开驱逐程序。
从10月1日开始,USCIS将能对范围更广泛的案例发出NTA,包括涉及诈欺、刑事活动,
或是申请移民福利被拒,因此失去留在美国的合法地位的外国人。
USCIS的政策备忘录说,新政策是配合川普总统的行政命令,以加强公共安全,并把驱
逐美国境内的外国人列为优先事项。
USCIS局长西斯纳说,USCIS人员长久以来在发现诈欺或刑事活动后,能够协助确保美国
移民法获得忠实执行的能力一直受到限制。
他说,新程序赋予移民官更多裁量权,并提供“他们需要和应... 阅读全帖 |
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f***n 发帖数: 4682 | 5 希腊版
Από τότε που έπεσε στην αγάπη με
τον, μετά όλη την ημέρα στην καρδι
940; μου υποφέρει από ένα είδος β
ασανιστηρίων, εφ 'όσον κάποιος κο
ντά του, το σώμα είναι ένα απερί
;γραπτο συναίσθημα. !
Στη συνέχεια, κάποιος ήρθε από
απόσταση, Έτρεξα στην απελευθέρωση
χέρι, ξάδελφος είδε επίσης κ
άποιος, αμέσω&... 阅读全帖 |
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b*****d 发帖数: 61690 | 6 中新社华盛顿12月7日电 (记者 张蔚然)美国国土安全部部长约翰逊当地时间7日在华盛
顿表示,为了更充分地将美国面临的恐怖威胁及时告知公众,该部门将很快启用新的恐
怖威胁警戒系统,取代自2011年以来使用的两级式“国家恐怖警戒系统”。
约翰逊说,美国当前面临的恐怖主义威胁已进入“新的阶段”,除了阻止恐怖分子
从国外策划恐怖袭击,还需阻止由恐怖分子极端思想煽动导致的恐怖袭击,后一类恐怖
主义行为的实施者也许并不在美方情报雷达监视范围内,更可能在短时间内迅速作案。
他表示,基于上述新形势,美方决定启用一种更为敏感的恐怖警戒系统,取代自
2011年以来使用的两级式国家恐怖警戒系统(NTAS)。NTAS将威胁分为“升级威胁”和“
迫近威胁”两个级别,从过往经验看,NTAS只有在美国面临“具体、可信”的恐怖威胁
时才可以启用,启用标准“过高”,以至于现实中“从未启用过”,该设定已落后于实
际需要。
NTAS上线之前,美国曾于2002至2011年使用“五色警戒系统”,以绿、蓝、黄、橙
、红5种颜色代表不同的恐怖警戒级别,但被外界诟病“提供的信息过于含糊,容易引
起不必要的心理恐慌”。
约翰逊解释,... 阅读全帖 |
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发帖数: 1 | 7 1、当1993年12月17日,美国空军的第一架B-2A“幽灵”轰炸机开始服役时,该机独特
的蝙蝠状机翼和隐身能力给人们留下了深刻印象。如今这种轰炸机已经在怀特曼空军基
地的第509轰炸联队和同基地的密苏里空中国民警卫队第131轰炸联队服役,并经历实战
考验。
2、B-2轰炸机的成功之处在于能够不间断(通过空中加油)飞行抵达世界任何地方,而
不会被敌人探测到,同时该机的投弹精度圆半径误差小于2米。
3、29年前的1988年11月22日,第一架B-2A在加利福尼亚州帕姆代尔的空军第42工厂飞
机库进行了公开展示,该机在1989年7月17日首飞。
4、怀特曼空军基地作为B-2A的唯一作战基地,于1993年12月17日接收了第一架飞机。
“幽灵”轰炸机参加了“盟军”行动在科索沃上空作战,还参加了在伊拉克、阿富汗和
利比亚的作战。
5、B-2的整体设计是实现“低可探测”(LO)外形的第一步,该机沿用了杰克·诺斯罗
普始创的飞翼设计,B-2A翼展与XB-35和YB-49完全相同,都是52.43米。第一架XB-35早
在1946年6月25日就从加州霍索恩的诺斯罗普工厂首飞,降落在爱德华兹空军基地。
... 阅读全帖 |
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c****x 发帖数: 6601 | 8 http://www.mitbbs.com/article_t/Missouri/31322865.html
发信人: pangpangchou (一心女神梦,万古感甄赋), 信区: Missouri
标 题: 看美新版说USCIS新政策
发信站: BBS 未名空间站 (Fri Jul 13 23:53:50 2018, 美东)
整天有人说,蓝皮抽私。其实呢,就算绿卡白送,还是有国女,比如accounting,就是
喜欢被啪啪。
就算被遣送回国,能发财成功的男人一样成功。我一个美国大学裤子大的朋友。当年回
国被check,一搞就是一年多。结果不得已,申请Boston university,拿个新offer才
回来。老婆是安徽合肥的大美女。电视台主持,传媒专业的。
哪晓得,当年实在穷。老婆在美国被生活所迫。。。最后回来,夫妻痛哭一场,缘尽,
离婚。一样东西都没心思卖。拿个硕士学位。
结果上次海归。人家是每年bonus 120万人民币。因为上市公司,新增股票都要公布的
。绝对是真的。新老婆家里资产几千万。开Tesla model x 去上班。
另一个哥们,他沪人。据说是淮海路的老克拉。擦... 阅读全帖 |
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d********f 发帖数: 43471 | 9 左x的世界正常人无法理解,移民局就是个事业单位,存在的目的就是一年中又快又好
地发出去100万绿卡,左x坚定的认为移民局里都是变态,写错一个逗号就发nta,
实际操作中发nta的工作量差不多是发绿卡的10倍,所以有这种倾向都是性生活不正
常的左x |
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j********2 发帖数: 10 | 10 Job Description1: Business Travel and Leisure Tour Operators
Will be responsible for business travel and leisure tour operations, event
planning and implementation, Office admin and etc.
1. Itinerary design, quotation and travel conduct
2. Supplier management and relationship maintenance,
3. Hotel/transportation/dining reservation and dispatch,
4. Interpretation (EN-CH),
Qualifications:
1. Being eligible to work in the United States;
2. Bilingual: Native Mandarin Chinese speake... 阅读全帖 |
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j********2 发帖数: 10 | 11 Job Description1: Business Travel and Leisure Tour Operators
Will be responsible for business travel and leisure tour operations, event
planning and implementation, Office admin and etc.
1. Itinerary design, quotation and travel conduct
2. Supplier management and relationship maintenance,
3. Hotel/transportation/dining reservation and dispatch,
4. Interpretation (EN-CH),
Qualifications:
1. Being eligible to work in the United States;
2. Bilingual: Native Mandarin Chinese speake... 阅读全帖 |
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T*******0 发帖数: 157 | 12 MSFT 收购价应该在$5.12(19B); 不要忽略DELL可能收购MMI; RIMM还不到时候.
导读:央视财经频道《对手》栏目即将播出《诺基亚会倒下吗?》,本期节目中,六位
专家就“诺基亚是不是被苹果打败的?”、“诺基亚会不会退出中国市场?”、“诺基
亚会不会倒下?”进行了激辩。
以下为节目实录:
红方嘉宾:
刘持金 泛太平洋管理研究中心董事长
(曾担任诺基亚中国公司高级副总裁、爱立信中国公司高级副总裁、创办爱立信中
国学院并任首任院长)
刘小鹰 长远集团主席
(诺基亚在中国最早的代理商之一。先后取得飞利浦和阿尔卡特等国际著名电信品
牌的代理权,对诺基亚的经营战略和市场操作手段熟悉)
项立刚 中国通信业知名观察家、飞象网CEO
(中国通信业知名观察家 《通信世界》周刊创始人,曾任《通信世界》杂志社社长
兼总编。)
蓝方嘉宾:
王煜全 开放联盟创始人
(对诺基亚及多家IT企业有多年的跟踪研究)
申音 NTA创新传播机构创始人
何 刚 《财经》杂志执行主编
主持人:观众朋友大家好,欢迎来到《对手》的辩论现场,我是王凯。刚刚大家看
到小片了,最近在网络上有很多朋友在怀旧,有的人可能是在... 阅读全帖 |
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d********f 发帖数: 43471 | 13 你哪一句准确过?我老给你指出过无数遍,没有合法身份485悲剧基本一定吃nta你明白
为什么?因为有了ice和移民局同属dhs之后,移民局作为联邦执法安全机构,根据ina
他们
有义务把没有合法身份的移民报告给ice,ice必须发出nta。
作为移民一定要搞清楚什么叫unlawful status和unlawful presence. 485 pending期间
没有合法身份就是unlawful status, 485一悲剧就是unlawful presence的起点。移
民局没有发现你的unlawful status之前,你就不是unlawful presence. 简单吧 |
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发帖数: 1 | 14 不是新政策吗?还没实施你怎么有数据比较?关公vs秦琼
而且,你怎么做结论的?数据!为什么不是人数多造成倒退,和nta没关系?你怎么排
除其他因素。不能你想说啥,就是啥
: 你这个阶段不是应该欢欣鼓舞么,eb1年年不到4月就用完,说明通过率节
节高,
eb2,
: eb3 不停倒退也说明发卡越来越快阿,如果像某些精神病说的一样,nta
满天飞
,难道
: 不是应该大家马上都current了么,这不用考过gre,能考过sat就能理解阿
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发帖数: 1 | 15 你自己都无法排除这因素-spill over,凭什么说nta?先把自己的逻辑搞清楚,nta按
你说法和批卡量,没关系。既然如此,你激动什么。为什么要扯上EB1排期问题。你无
法证明这两件事情相关,对不?那你在干什么?左右手互搏?
谁是神逻辑
: 吃spillover和我的论点有p关系?以前不用排,现在要排为什么不是老中
多批了
,而是
: 全给烙印eb1c吃了,这么神奇的逻辑你们可以拿去告奥本阿
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c**i 发帖数: 6973 | 16 You and many others are wrong. I am surprised your attorney did not tell
this.
US Customs and Border Protection (CBP) has its own attorneys who oversee its
(CBP's) own removal (which in plain English is deportation) proceedings. U.
S. Immigration and Customs Enforcement (ICE) has own attorneys and removal
proceedings. Removal proceedings initiated by both agencies go before an
immigration judge, an administrative judge within Department of Homeland
Security. They (removal proceedings) from each ... 阅读全帖 |
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h******y 发帖数: 2528 | 17 NTA (notice to appear)一般都是以personally serve的,但是也有不少是寄得。由于
没有收到nta后来引起纷争的案子 见得不少。lz有A#吧,打电话到法院,查询一下可以
有hearing schedule 祝好运 |
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k****s 发帖数: 1209 | 18 加长版的往生咒。出自《無量壽如來觀行供養儀軌》
http://www.cbeta.org/result/normal/T19/0930_001.htm
Namo ratna-trayāya. Namaḥ ārya Amitābhāya Tathāgatāya Arhate
Samyak-saṃbuddhāya. Tadyathā, oṃ, amṛte, amṛtod-
bhave, amṛta-saṃbhave, amṛta-garbhe, amṛta-siddhe,
amṛta-teje, amṛta vi-krānte, amṛta vi-krānta gā
minī, amṛta gagana kīrti-kare, amṛta dundubhi-svare sarv
ārtha sādhane, sarva karma kleśa kṣayaṃ-k... 阅读全帖 |
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t******g 发帖数: 17520 | 19 中華佛學學報第19期 (p179-207): (民國95年),臺北:中華佛學研究所,http://www.chibs.edu.tw
Chung-Hwa Buddhist Journal, No. 19, (2006)
Taipei: The Chung-Hwa Institute of Buddhist Studies
ISSN: 1017-7132
當佛教遇見耆那教
──初期佛教聖典中的宗教競爭與詮釋效應
呂凱文
南華大學宗教學研究所副教授
p. 179
提要
與佛教同屬於新興宗教思潮的沙門陣營的耆那教,不僅是佛教初興當時的主要競爭對手
之一,同樣也為佛教傳統建構中的宗教制度發展等帶來刺激與滋養。雖然彼此教義有差
異,但是由於雙方實際興起與發展的時代重疊,宗教術語亦甚為接近,在宗教文化共構
處甚多的情形下,學界戲稱兩者為「姊妹教」。礙於彼此宗教競爭,佛教看待耆那教的
態度與耆那教理解自身宗教傳統的心態不同,從而「佛教聖典中的耆那教」與「耆那教
聖典中的耆那教」之間的兩種形象存有差異。若是如此,初期佛教聖典所見的宗教競爭
暨隨之引發的詮釋效應等諸問題,值得注意。
本文擬就前述問題進行論... 阅读全帖 |
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s******y 发帖数: 28562 | 20 Why do you want to use anti-6His? Why not use NTA-Ni resin or NTA-Cobalt
resin? |
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s******y 发帖数: 28562 | 21
Because radioactive detection is very sensitive.
If you use cell-free in vitro translation kit, you will stick a lot of
ribosomes on the NTA-resin, and the unfinished peptides will show up as
smear on the gel.
What you need to do, is to use high speed centrifugation (at least 144,000
xg) on a 20% sucrose cushion to separate the ribosome fraction (go to bottom
) from the complete proteins (remain on the supernatant).
Then, you can use the NTA resin on the supernatant. |
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b******n 发帖数: 4225 | 22 取决于你的目的啦
Talon基于cobalt跟his tag结合,
优点是不太容易被lysate里面的巯基乙醇,DTT等还原
跟E.coli内源的含his的蛋白(如SlyD)结合力弱,纯化效果好
缺点嘛,就是有时候跟目的蛋白都不能结合
Ni-NTA的缺点差不多跟Talon反过来吧
NI-NTA 和 Talon mental beads 相比, 纯化的效果那个好些?
谢谢! |
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c********b 发帖数: 363 | 23 每个步骤都是别人都知道的,我只是组装了一下. 最大不同是别人是先Urea变性,提出来
再复性.我是利用Triton X-100可以洗脱SDS的特点利用SDS变性,然后Triton X100洗脱
复性,然后过柱. 肯定不会对所有蛋白适用,但是起码我遇到的都work (包括一个>100
Kd的酶).
我是用的sonication water bath, 也可以用probe sonication再加SDS,都OK,但是注意
dilution的比例和体积.
Good luck. 用的高兴分我几个包子.
Key, keep a fraction from every step for analyses and trouble shooting
- Culture the E. coli overnight
- Induce it at a proper concentration of IPTG, room temperature for ~
4hrs
- Pellet the E. coli at 6000 rpm at 4 degree
- R... 阅读全帖 |
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s********n 发帖数: 2939 | 24 LS基本上已经回答你了。
我的经验(5个不同蛋白,都是N-terminal 6xHis tag)是通过Co-NTA spin columns一
步就得到>90%的蛋白(当然还要做buffer exchange),其中一些蛋白Ni-NTA也行。你
可以试试,但不能保证在你的蛋白上也一定work。 |
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s*****a 发帖数: 59 | 25 His-tag protein was overexpressed in HEK293 cells.先用IP 纯化,接着做His-
purification变性条件来第二轮纯化(此顺序是实验需要,不要问为什么)。目前结果
是第一轮IP很好,但是His-purification后蛋白都在unbound fraction. 我用的是
Qiagen Ni-NTA Magnetic Agarose bead,据说适合纯化含量比较少的比如mammalian
cell的蛋白。IP后的蛋白都经过 buffer exchange,也没发现有与Ni resin
uncompatible的成分。请帮忙trouble shooting。会不会因为蛋白浓度太低导致与Ni
resin结合不好?His-purification有没有target protein concentration threshold?
是否需要改用binding capacity更大的Qiagen Ni-NTA agarose (不是magnetic bead)? |
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s******y 发帖数: 28562 | 26 Mammalian cell 里面很多蛋白本身就有 4xHis, 会被Ni-NTA resin 一起
纯化拉下来。所以你的蛋白不能在如此多的背景蛋白中被看到。
如果你真的要用这个方法纯化蛋白的话,我的建议是:
1。用大量Hela 细胞,悬浮培养。
2。用high glucose medium.
3. 在你的蛋白上再加一个tag, 进行双重纯化。如果实在不能再加一个tag的话,也必
须至少在NTA-NI resin之后进一步用ion-exchange column + size exclusion column
进行再纯化。
COOMASSIE |
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c***s 发帖数: 70028 | 27 挺、贬、骑墙与不了解,都是态度。
韩寒,1982年生于上海金山区;郭敬明,1983年生于四川自贡。
两个年轻人都已年过而立,而从他们崭露头角就一直伴随的争论从未断绝,仿佛他们是一代人的两个极端,或者这个时代中两种不同价值观的典型。讽刺的是,他们以文章初涉江湖,但是文学几乎从未成为他们价值的坐标。
不论他们自己是否愿意,他们一直被互相比较、批评,成为彼此的参照。关于他们的话题,永远会蜂拥而至,通过网络、媒体去占领人们的视线。各行各业的人都谈论过他们,无论偏爱哪一方、支持或贬低谁,或者压根就不想关心。
也许,两个年轻人都被赋予了并不相称的重要性。但是,我们相信谈论他们不仅仅是时髦。
本刊邀请了各个领域的130多位公众人物,说一说他们眼中的郭敬明与韩寒。这些谈论并不按照知名度、影响力排序,只是根据版式需要,秉笔直录。你可以试图从中看出观念和立场,也可以就当个玩儿。
平面传媒界
唐建光(新历史合作社总编辑):没有看过郭敬明的任何东西。异代不同时。
朱学东(《中国周刊》总编辑):郭从一个小地方努力奋斗,而成为一个成功的明星出版商,他是一个幸运儿,也是一个努力者。虽然我并不喜欢这种成功,但无疑,这... 阅读全帖 |
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b*****d 发帖数: 61690 | 28 诺基亚亏损积重难返:大中国区销售额骤降70%
http://www.sina.com.cn 2012年04月20日 02:20 新浪科技微博
新浪科技讯 4月20日凌晨消息,昨日晚间,诺基亚发布了2012财年第一季度财报,
数据显示,一季度净营收为73.54亿欧元,同比下滑29%,净亏损9.29亿欧元,这是诺基
亚自2011年以来连续四季度财报出现亏损。从财报分析来看,诺基亚的智能手机战略转
型并没有效果,智能手机的亏损更加严重。中国市场销售额骤降70%。这些都让人感到
,诺基亚积重难返,危机重重。
诺基亚连续四个季度出现亏损
刚发布的诺基亚2012财年第一季度财报显示,一季度净营收为73.54亿欧元,同比
下滑29%。净亏损9.29亿欧元,而上年同期净利润3.44亿欧元。
2011年的第一季度财报让诺基亚感到了销售额和利润全部下降的危机,从2011年财
年的第二季度开始,诺基亚出现了历史性的亏损。2011年第二财季净亏损3.68亿欧元,
第三财季诺基亚净亏损为6800万欧元,第四财季净亏损14亿美元,2012年的第一财季净
亏损9.29亿欧元。如此看来,自2011年以来,诺基亚已... 阅读全帖 |
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k****r 发帖数: 9629 | 29 http://blog.sina.com.cn/s/blog_84f308de0101apze.html
克钦独立组织中央副主席,克钦中央军事委员会主席恩版腊将军给中共中央总书记,中
央军委主席习近平的贺电:
习近平主席:
为中国共产党第十八次全国代表大会取得圆满成功,您就任中共中央总书记、中央军事
委员会主席表示祝贺!
我们相信:在以您为总书记的中共中央领导下,包括景颇族同胞在内的中国人民在平等
和谐的环境中,生活水平会进一步提高,早日实现全面建成小康社会的战略目标。
克钦和中国是山水相依的一家人,愿上帝祝福您和全中国人民!
2012年11月15日
KIO Ningbaw Malai, Ginjo Hpyenlam Commission Ningbaw Kaba Lat Du Daju-jum Nb
an La kaw nna, Miwa Kunmyunit Pati Ginjo Committee Ningbaw Kaba, Pati Ginjo
Hpyenlam Commission Ningbaw Kaba Shi Jinpin hpe shana jaw dat ai Gab... 阅读全帖 |
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w****w 发帖数: 14828 | 30 如果魁北克獨立,就不屬於加拿大,NTA是僅限於美加墨。魁北克要重新申請加入。合
法合情合理,有什麼問題。 |
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l**m 发帖数: 88 | 31 出租车司机会是什么反应?
我们的人民警察会不会管?
我们的政府法院到时候会站在哪边?
Jail for German exec who punched cabbie
A German national who tried to cut a taxi queue by claiming he should get
priority for paying $40,000 in taxes to Singapore, and then punched the
cabbie, was yesterday jailed for 10 days.
District Judge Lim Tse Haw repeatedly called Michael Fritsch's conduct
during last year's May 17 incident "deplorable" from start to finish, adding
a four-week sentence was the minimum.
But given the guilty plea and remorse shown... 阅读全帖 |
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l**m 发帖数: 88 | 32 看新加坡的类似事件是什么结局:
Jail for German exec who punched cabbie
A German national who tried to cut a taxi queue by claiming he should get
priority for paying $40,000 in taxes to Singapore, and then punched the
cabbie, was yesterday jailed for 10 days.
District Judge Lim Tse Haw repeatedly called Michael Fritsch's conduct
during last year's May 17 incident "deplorable" from start to finish, adding
a four-week sentence was the minimum.
But given the guilty plea and remorse shown by the 38-year-old, who is... 阅读全帖 |
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w***n 发帖数: 193 | 36 【 以下文字转载自 Immigration 讨论区 】
发信人: wamen (细节控), 信区: Immigration
标 题: 预测下床大嘴这次喷的H1b政策
发信站: BBS 未名空间站 (Fri Jan 11 20:06:26 2019, 美东)
川大嘴不知道现在已经There is a certain path to citizenship which is called
EB!
床铺这是忽悠傻子呢。这货100%不懂啥叫EB。我预测就是把右棍党的那个打分方案再来
一遍 所有人重新打粉排队去吧
加上age out,取消国别一起打分,每年EB类数目不变,就等着三哥吃去90%的EB名额吧
。其他国家一起排期10年去吧,大嘴可没说你这path要等多久。权且说了也是放屁,它
嘴里有过一句靠谱的实话吗?而且它一会说America first. Hire American。转身又来
喷外国人抢工作的H1b给公民,真是把别人都当作和它自己一样精分啊。
川大嘴和右棍共和党,有历史记录以来有过任何对合法职业移民有利的政策吗?它们没
选票改移民法,有民主党在哪抵抗,它们就用改UsSCIS po... 阅读全帖 |
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b*********3 发帖数: 1709 | 37 VISIT US AT WWW.NOTHIEFSALLOWED.ORG FOR SAFE SPACE (LOL) MODERATED CHAT ROOM
..........Mainstream Media isn't showing you the protests by the same groups
here in the USA that are out in the streets daily in countries like Canada,
China, Egypt, France, Germany, Greece, Iraq, Israel, Japan, Mexico,
Palestine, Russia, Spain, Syria, Turkey, and the Ukraine, as well as other
parts of the world...........Why is the question?.......... What is it they
are afraid you find out? Probably because they are ... 阅读全帖 |
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发帖数: 1 | 38 如果老川真心给合法移民开绿灯,我打自己脸。
但我一点都开心不起来,uscis 7月5号发的声明要给申请福利(包括绿卡)失败的人发
NTA,就算你让我早交485,我还真不敢去用combo卡,要是485被拒怎么办,还不都是老
川弄出来操蛋的事。
最后说一下二排是老川的功劳还是奥黑的?就像川粉不承认10年签证是奥黑的功劳,这
事你们自己判断。 |
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h***e 发帖数: 2823 | 39 你他娘的户口都没办下来,见天指导别人如何投票?!
比我闲的蛋疼啊
: 如果老川真心给合法移民开绿灯,我打自己脸。
: 但我一点都开心不起来,uscis 7月5号发的声明要给申请福利(包括绿卡)失败的
人发
: NTA,就算你让我早交485,我还真不敢去用combo卡,要是485被拒怎么办,还不
都是老
: 川弄出来操蛋的事。
: 最后说一下二排是老川的功劳还是奥黑的?就像川粉不承认10年签证是奥黑的功
劳,这
: 事你们自己判断。
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s********e 发帖数: 1503 | 40 不造假,485远比140容易过,懂吗回报率?
:如果老川真心给合法移民开绿灯,我打自己脸。
:但我一点都开心不起来,uscis 7月5号发的声明要给申请福利(包括绿卡)失败的人发
:NTA,就算你让我早交485,我还真不敢去用combo卡,要是485被拒怎么办,还不都是
老川弄出来操蛋的事。
:最后说一下二排是老川的功劳还是奥黑的?就像川粉不承认10年签证是奥黑的功劳,
这事你们自己判断。 |
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发帖数: 1 | 42 彻底的biased view!
他妈的这完全就是断章取义。移民局的memo说的是,如果NTA了,又没有合法身份的情
况下,才有可能进入deportation hearing. 他妈的,大多数人都是有合法F, H, L身份
的。这种情况下怎么可能被遣返呢?
举个具体的例子:
学生A 现在持有F1身份(甚至有可能是opt),申请EB1A。不幸被拒。可这和他的F1身
份没任何关系,只要再次递交申请即可。如果这种情况下还担心被遣返,请去医院看精
神科。你的i-20呢?莫非是没有i-20?那他妈叫黑户!请自行投案自首。
哥们B, 现在持有身份H1B, 申请140,或485(无论是几类)。不幸被拒,可是这H身份
还在啊,该工作工作,不受影响。再次提交140/485即可。
这傻逼夸大其词的唯一可能性是:
傻逼C, h1b 第五年半了,已经交了485,拿到EAD. 首先,好死不死地启用了EAD. 其次
,H1b快到期了,其实提前大半年就可以续了,非他妈的不续,临到期1个月,想起来要
续一个3年的H1b,赶紧申请,结果还他妈的扣扣索索不肯多花1000多刀快速处理,导致
1个月内没处理下来。这不,只能按A... 阅读全帖 |
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d********f 发帖数: 43471 | 47 他居然认为485一旦被拒就一定会吃nta,变成非法。这种任何申请过eb的同志不可能连
这个都不明白 |
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j********2 发帖数: 10 | 48 We are a National Tour Association (NTA) member doing event planning and
MICE/leisure travels. We have a vacancy of tour operator/event planner in
our office within blocks to McCormick Place, Chicago.
Job responsibilities:
- Event planning and implementation;
- Travel operations such as itinerary design, hotel/transportation/
restaurant reservation, tour guides/drivers/interpreters dispatch, paperwork
preparation, office support, vehicle management, etc.;
- Supplier management and relationship m... 阅读全帖 |
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j********2 发帖数: 10 | 49 Job Description2: Project Managers
Will be able to create, design and manage Chinese professional training
programs and Student Summer Programs, and to coordinate with travel and tour
operators and office admin. Currently projects include Environmental and
Safety Control Program (ESCP), Ethic Training and Corruption Prevention
Program (ETCPP), and Student Art of Science Summer Camp (SASSC)
Qualifications:
1. Being eligible to work in the US
2. Have strong project development skills with cr... 阅读全帖 |
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T**********e 发帖数: 23 | 50 招聘简章
单位简介:
Oriental Tour & Travel/纳美旅游集团是在美国有正式注册的合法国际旅游公司,总
部位于美国纽约,并先后于法拉盛、曼哈顿等处设立了分公司,实行品牌统一化管理,
经过现代化的经营管理模式和全方位的共同努力,目前已经形成了为全球华人服务的现
代化旅游咨询机构。经过严格的审核与全方位的资质评估,纳美旅游已经成为了IATA(
国际航空运输协会),ARC(航空公司授权开票商),NTA(国际旅游协会),ASTA(美
国旅游协会)以及CLIA(国际正式游轮组织)的会员,同时为客户提供五百万美元的旅
游保险。纳美旅游与多家国际航空公司有着良好的合作关系和密切的业务往来,现已成
为美国知名度最高的国际旅行社之一。
一经录用,我们将提供优良待遇(基本工资 业绩 各种补贴 社保)
公司为每位员工提供广阔的发展平台,我们欢迎你的加入!
现招聘以下岗位:
1、 会计人员
2、 人数:1名
3、 性别:不限
4、 工作地点:New York NY
任职要求:
1、 本科及以上会计学专业、财务管理专业;
2、 熟悉相关财务、会计及税务法律知识及会计核算流程;
3、 能熟练掌... 阅读全帖 |
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