n*******e
发帖数: 27 | 1 i have only used RNaseH, RNaseT1 for cDNA stuff. and i donno
its function in mammalian.
let us see this one
Mol Cell Biol 1999 Dec;19(12):8361-71
in S.C., RNase H was found to remove RNA primer from Okazaki frag.
Biochemistry 1999 Nov 16;38(46):15097-103
for HIV and other retrovirus, RNase H function is essential for
activity of the RT.
J Biol Chem 1999 Oct 1;274(40):28270-8
Human RNase H was cloned and found to cleave DNA:RNA substrate,
then what function:)? antibody template switch? DNA replic |
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n*******e
发帖数: 27 | 2 我的体会是只要你不向tube里吐口水,一般没有那麽厉害,用不着谈虎色变.
分离RNA的试剂里多有强变性剂如胍盐,酚等,所以这种情况下RNase也就多
被变性失活的说.最要紧的是你的储备溶液,用于溶解RNA的水,T.E., 用于
NORTHERN的STOCK等,要保持干净.玻璃器皿可在200C左右烤三小时再用.RNA
专用的药品,试剂要分藏.水用DEPC处理O/N,STIR,灭菌20MIN.TRIS要和DEPC
反应,所以要在灭菌破坏DEPC后加入.DEPC强烈致爱,你就自己看着办吧.
RNasin是RNase的抑制蛋白,但温度升高后会解离.
所有的操作要戴手套,小心谨慎.所有的试剂都要分装使用,用过一段时间就
扔掉.一般公司的试剂和用具都比较可信. |
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b***2
发帖数: 348 | 3 话是这么说。但是如何证明是聚集起来的rnase在切rna呢，而不是散在细胞质里面的那
些rnase在切呢？ |
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k***n
发帖数: 14 | 4 有个技术文档说要用DNase-free, RNase-free water，从来没搞过DNase－free water,
有人有经验吗？google也没整出什么结果来。可以买，不过就是好奇，能自己准备的
话就自己准备。 |
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m*****y
发帖数: 857 | 5 just curious, how do you even prepare RNase free water? Don't tell me
DEPC.....
water, |
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c*****u
发帖数: 357 | 6 之前网上看过autoclave可以出去Rnase的 |
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b***2
发帖数: 348 | 9 实验中发现把RNAse A放进细胞之后，它会进到nucleus，并且会聚集到subnuclear
body里面去。这个发现有没有什么意义呢？ |
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s******y
发帖数: 28562 | 10 Polysome purification and fractionation
(Based on Davies & Abe, 1995, Methods in Cell Biology, Vol 50, Chapter 15)
1. Prepare 4.6ml 15-60% sucrose gradients in 5ml polyallomer tubes (Beckman
#326819) by
pipetting 2.3ml of 60% sucrose in buffer B followed by 2.3ml of 15% sucrose
in buffer B
(slowly, drop by drop, against the wall). Cap the tubes with rubber stoppers
and lay tubes
horizontally for 3h @RT for sucrose to diffuse (or for 2h if making 10-40%
gradient). Place the
tubes again vertically... 阅读全帖 |
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b*******e
发帖数: 6920 | 11 有个mRNA，觉得自己很孤单，就拉个核糖体过来翻译个蛋白给自己作伴，翻译好之后对
蛋白说：“你好，我是你的模板。”蛋白说：“你好，我是 RNase。”（即RNA水解酶--茉莉注）
mRNA沉默了一下，说：“没关系,反正我本来也活不了多久.你就陪陪我吧。”
蛋白说：“好”。
于是两个人（？）就手拉手默默地站在一起。
过了一会儿蛋白忽然说：“其实我现在还不是RNase。”
mRNA：“嗯。”
蛋白：“我现在只是多肽。”
mRNA笑了。
蛋白：“可是我很快就会变成真的RNase了。”
mRNA：“没有关系。我总是要死的。”
于是蛋白依旧和mRNA靠在一起，他慢慢地转圈，折叠，开始修饰自己。他越来越像真的
RNase，而mRNA慢慢地开始降解。
蛋白说我走吧，离开了我你也许能活得久一些呢。
mRNA说你别走。我有些话要和你说。
mRNA说，你知道么，我也有过一个模板，他叫DNA。
蛋白说：“他现在在哪里呢？”
mRNA说：“他的启动子关闭了。他睡着了。”
蛋白问：“是谁把他的启动子关掉的呢？他还会醒过来吗？”
mRNA说：“是我把他关掉的。”然后他又笑笑：“但是他还会醒的，我一消失，他就又
会... 阅读全帖 |
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w******a
发帖数: 1527 | 12 Check this one:
Reagents
* TRIzol from Invitrogen #15596-108.
* Mini RNeasy plus kit from Qiagen #74134.
* Phase lock gel from Eppendorf #2302830.
* Keep TRIzol at 4C.
* Use RNase-free tubes and tips for all steps.
* Prepare 70% ethanol using DEPC-H2O and keep it at -20C.
RNeasy plus kit contains a genomic DNA elimination column. It can replace
the DNase I digestion step of regular RNeasy kit.
1. Add 1.2 ml TRIzol reagent to cells/tissues (5~10X 106 cells/ml or 50~100
mg ... 阅读全帖 |
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w******a
发帖数: 1527 | 13 有个mRNA，觉得自己很孤单，就拉个核糖体过来翻译个蛋白给自己作伴，翻译好之后对
蛋白说：“你好，我是你的模板。”蛋白说：“你好，我是 RNase。”
mRNA沉默了一下，说：“没关系,反正我本来也活不了多久.你就陪陪我吧。”
蛋白说：“好”。
于是两个人（？）就手拉手默默地站在一起。
过了一会儿蛋白忽然说：“其实我现在还不是RNase。”
mRNA：“嗯。”
蛋白：“我现在只是多肽。”
mRNA笑了。
蛋白：“可是我很快就会变成真的RNase了。”
mRNA：“没有关系。我总是要死的。”
于是蛋白依旧和mRNA靠在一起，他慢慢地转圈，折叠，开始修饰自己。他越来越像真的
RNase，而mRNA慢慢地开始降解。
蛋白说我走吧，离开了我你也许能活得久一些呢。
mRNA说你别走。我有些话要和你说。
mRNA说，你知道么，我也有过一个模板，他叫DNA。
蛋白说：“他现在在哪里呢？”
mRNA说：“他的启动子关闭了。他睡着了。”
蛋白问：“是谁把他的启动子关掉的呢？他还会醒过来吗？”
mRNA说：“是我把他关掉的。”然后他又笑笑：“但是他还会醒的，我一消失，他就又
会醒来了。”
mRNA说：“我... 阅读全帖 |
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e****a
发帖数: 4783 | 14 【 以下文字转载自 Texas 讨论区 】
发信人: bjjasmine (茉莉), 信区: Texas
标 题: 悲伤的分子生物学~~（懂的进吧）（转载）
发信站: BBS 未名空间站 (Tue Oct 19 21:44:08 2010, 美东)
有个mRNA，觉得自己很孤单，就拉个核糖体过来翻译个蛋白给自己作伴，翻译好之后对
蛋白说：“你好，我是你的模板。”蛋白说：“你好，我是 RNase。”（即RNA水解酶--茉莉注）
mRNA沉默了一下，说：“没关系,反正我本来也活不了多久.你就陪陪我吧。”
蛋白说：“好”。
于是两个人（？）就手拉手默默地站在一起。
过了一会儿蛋白忽然说：“其实我现在还不是RNase。”
mRNA：“嗯。”
蛋白：“我现在只是多肽。”
mRNA笑了。
蛋白：“可是我很快就会变成真的RNase了。”
mRNA：“没有关系。我总是要死的。”
于是蛋白依旧和mRNA靠在一起，他慢慢地转圈，折叠，开始修饰自己。他越来越像真的
RNase，而mRNA慢慢地开始降解。
蛋白说我走吧，离开了我你也许能活得久一些呢。
mRNA说你别走。我有些话要和你说。
mRNA说，你知道... 阅读全帖 |
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e****e
发帖数: 3450 | 15 发信人: coolbb (kubaobao), 信区: Biology
标 题: 分子的故事（转载）
发信站: BBS 未名空间站 (Fri Jun 25 14:59:03 2010, 美东)
有个mRNA，觉得自己很孤单，就拉个核糖体过来翻译个蛋白给自己作伴，翻译好之后对
蛋白说：“你好，我是你的模板。”蛋白说：“你好，我是 RNase。”
mRNA沉默了一下，说：“没关系,反正我本来也活不了多久.你就陪陪我吧。”
蛋白说：“好”。
于是两个人（？）就手拉手默默地站在一起。
过了一会儿蛋白忽然说：“其实我现在还不是RNase。”
mRNA：“嗯。”
蛋白：“我现在只是多肽。”
mRNA笑了。
蛋白：“可是我很快就会变成真的RNase了。”
mRNA：“没有关系。我总是要死的。
于是蛋白依旧和mRNA靠在一起，他慢慢地转圈，折叠，开始修饰自己。他越来越像真的
RNase，而mRNA慢慢地开始降解。
蛋白说我走吧，离开了我你也许能活得久一些呢。
mRNA说你别走。我有些话要和你说。
mRNA说，你知道么，我也有过一个模板，他叫DNA。
蛋白说：“他现在在哪里呢？”
mRNA说：“他的启 |
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w***s
发帖数: 7132 | 16 标题：有个mRNA，觉得自己很孤单，就拉个核糖体过来翻译个蛋白给自己作伴
有个mRNA，觉得自己很孤单，就拉个核糖体过来翻译个蛋白给自己作伴，翻译好之后对
蛋白说：“你
好，我是你的模板。”蛋白说：“你好，我是 RNase。”
mRNA沉默了一下，说：“没关系,反正我本来也活不了多久.你就陪陪我吧。”
蛋白说：“好”。
于是两个人（？）就手拉手默默地站在一起。
过了一会儿蛋白忽然说：“其实我现在还不是RNase。”
mRNA：“嗯。”
蛋白：“我现在只是多肽。”
mRNA笑了。
蛋白：“可是我很快就会变成真的RNase了。”
mRNA：“没有关系。我总是要死的。”
于是蛋白依旧和mRNA靠在一起，他慢慢地转圈，折叠，开始修饰自己。他越来越像真的
RNase，而
mRNA慢慢地开始降解。
蛋白说我走吧，离开了我你也许能活得久一些呢。
mRNA说你别走。我有些话要和你说。
mRNA说，你知道么，我也有过一个模板，他叫DNA。
蛋白说：“他现在在哪里呢？”
mRNA说：“他的启动子关闭了。他睡着了。”
蛋白问：“是谁把他的启动子关掉的呢？他还会醒过来吗？”
mRNA说：“是我把他关掉 |
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V******9
发帖数: 1281 | 17 【 以下文字转载自 Biology 讨论区 】
发信人: qingerer (东晴西雨), 信区: Biology
标 题: 一个冷笑话 (zz)
发信站: BBS 未名空间站 (Tue May 11 16:22:30 2010, 美东)
有个mRNA，觉得自己很孤单，就拉个核糖体过来翻译个蛋白给自己作伴，翻译好之后对
蛋白说：“你好，我是你的模板。”蛋白说：“你好，我是 RNase。”
mRNA沉默了一下，说：“没关系,反正我本来也活不了多久.你就陪陪我吧。”
蛋白说：“好”。
于是两个人（？）就手拉手默默地站在一起。
过了一会儿蛋白忽然说：“其实我现在还不是RNase。”
mRNA：“嗯。”
蛋白：“我现在只是多肽。”
mRNA笑了。
蛋白：“可是我很快就会变成真的RNase了。”
mRNA：“没有关系。我总是要死的。”
于是蛋白依旧和mRNA靠在一起，他慢慢地转圈，折叠，开始修饰自己。他越来越像真的
RNase，而mRNA慢慢地开始降解。
蛋白说我走吧，离开了我你也许能活得久一些呢。
mRNA说你别走。我有些话要和你说。
mRNA说，你知道么，我也有过一个模板，他叫DNA。
蛋 |
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z***t
发帖数: 10817 | 18 有个mRNA，觉得自己很孤单，就拉个核糖体过来翻译个蛋白给自己作伴，翻译好之后对
蛋白说：“你好，我是你的模板。”蛋白说：“你好，我是 RNase。”
mRNA沉默了一下，说：“没关系,反正我本来也活不了多久.你就陪陪我吧。”
蛋白说：“好”。
于是两个人（？）就手拉手默默地站在一起。
过了一会儿蛋白忽然说：“其实我现在还不是RNase。”
mRNA：“嗯。”
蛋白：“我现在只是多肽。”
mRNA笑了。
蛋白：“可是我很快就会变成真的RNase了。”
mRNA：“没有关系。我总是要死的。”
于是蛋白依旧和mRNA靠在一起，他慢慢地转圈，折叠，开始修饰自己。他越来越像真的
RNase，而mRNA慢慢地开始降解。
蛋白说我走吧，离开了我你也许能活得久一些呢。
mRNA说你别走。我有些话要和你说。
mRNA说，你知道么，我也有过一个模板，他叫DNA。
蛋白说：“他现在在哪里呢？”
mRNA说：“他的启动子关闭了。他睡着了。”
蛋白问：“是谁把他的启动子关掉的呢？他还会醒过来吗？”
mRNA说：“是我把他关掉的。”然后他又笑笑：“但是他还会醒的，我一消失，他就又
会醒来了。”
mRNA说：“我 |
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c****b
发帖数: 265 | 19 【 以下文字转载自 Biology 讨论区 】
发信人: coolbb (kubaobao), 信区: Biology
标 题: 分子的故事（转载）
发信站: BBS 未名空间站 (Fri Jun 25 14:59:03 2010, 美东)
有个mRNA，觉得自己很孤单，就拉个核糖体过来翻译个蛋白给自己作伴，翻译好之后对
蛋白说：“你好，我是你的模板。”蛋白说：“你好，我是 RNase。”
mRNA沉默了一下，说：“没关系,反正我本来也活不了多久.你就陪陪我吧。”
蛋白说：“好”。
于是两个人（？）就手拉手默默地站在一起。
过了一会儿蛋白忽然说：“其实我现在还不是RNase。”
mRNA：“嗯。”
蛋白：“我现在只是多肽。”
mRNA笑了。
蛋白：“可是我很快就会变成真的RNase了。”
mRNA：“没有关系。我总是要死的。
于是蛋白依旧和mRNA靠在一起，他慢慢地转圈，折叠，开始修饰自己。他越来越像真的
RNase，而mRNA慢慢地开始降解。
蛋白说我走吧，离开了我你也许能活得久一些呢。
mRNA说你别走。我有些话要和你说。
mRNA说，你知道么，我也有过一个模板，他叫DNA。
蛋 |
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a*o
发帖数: 19981 | 20 【 以下文字转载自 Joke 讨论区 】
发信人: zlltt (Leo╭(╯^╰)╮真心离伤心最近), 信区: Joke
标 题: 生物学术冷笑话（回pronick 请发包子）
发信站: BBS 未名空间站 (Mon May 17 13:19:18 2010, 美东)
有个mRNA，觉得自己很孤单，就拉个核糖体过来翻译个蛋白给自己作伴，翻译好之后对
蛋白说：“你好，我是你的模板。”蛋白说：“你好，我是 RNase。”
mRNA沉默了一下，说：“没关系,反正我本来也活不了多久.你就陪陪我吧。”
蛋白说：“好”。
于是两个人（？）就手拉手默默地站在一起。
过了一会儿蛋白忽然说：“其实我现在还不是RNase。”
mRNA：“嗯。”
蛋白：“我现在只是多肽。”
mRNA笑了。
蛋白：“可是我很快就会变成真的RNase了。”
mRNA：“没有关系。我总是要死的。”
于是蛋白依旧和mRNA靠在一起，他慢慢地转圈，折叠，开始修饰自己。他越来越像真的
RNase，而mRNA慢慢地开始降解。
蛋白说我走吧，离开了我你也许能活得久一些呢。
mRNA说你别走。我有些话要和你说。
mRNA说，你知道么，我 |
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q******r
发帖数: 6542 | 21 有个mRNA，觉得自己很孤单，就拉个核糖体过来翻译个蛋白给自己作伴，翻译好之后对
蛋白说：“你好，我是你的模板。”蛋白说：“你好，我是 RNase。”
mRNA沉默了一下，说：“没关系,反正我本来也活不了多久.你就陪陪我吧。”
蛋白说：“好”。
于是两个人（？）就手拉手默默地站在一起。
过了一会儿蛋白忽然说：“其实我现在还不是RNase。”
mRNA：“嗯。”
蛋白：“我现在只是多肽。”
mRNA笑了。
蛋白：“可是我很快就会变成真的RNase了。”
mRNA：“没有关系。我总是要死的。”
于是蛋白依旧和mRNA靠在一起，他慢慢地转圈，折叠，开始修饰自己。他越来越像真的
RNase，而mRNA慢慢地开始降解。
蛋白说我走吧，离开了我你也许能活得久一些呢。
mRNA说你别走。我有些话要和你说。
mRNA说，你知道么，我也有过一个模板，他叫DNA。
蛋白说：“他现在在哪里呢？”
mRNA说：“他的启动子关闭了。他睡着了。”
蛋白问：“是谁把他的启动子关掉的呢？他还会醒过来吗？”
mRNA说：“是我把他关掉的。”然后他又笑笑：“但是他还会醒的，我一消失，他就又
会醒来了。”
mRNA说：“我 |
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t*******y
发帖数: 11968 | 22 【 以下文字转载自 Joke 讨论区 】
发信人: zlltt (Leo╭(╯^╰)╮真心离伤心最近), 信区: Joke
标 题: 生物学术冷笑话
发信站: BBS 未名空间站 (Mon May 17 13:19:18 2010, 美东)
有个mRNA，觉得自己很孤单，就拉个核糖体过来翻译个蛋白给自己作伴，翻译好之后对
蛋白说：“你好，我是你的模板。”蛋白说：“你好，我是 RNase。”
mRNA沉默了一下，说：“没关系,反正我本来也活不了多久.你就陪陪我吧。”
蛋白说：“好”。
于是两个人（？）就手拉手默默地站在一起。
过了一会儿蛋白忽然说：“其实我现在还不是RNase。”
mRNA：“嗯。”
蛋白：“我现在只是多肽。”
mRNA笑了。
蛋白：“可是我很快就会变成真的RNase了。”
mRNA：“没有关系。我总是要死的。”
于是蛋白依旧和mRNA靠在一起，他慢慢地转圈，折叠，开始修饰自己。他越来越像真的
RNase，而mRNA慢慢地开始降解。
蛋白说我走吧，离开了我你也许能活得久一些呢。
mRNA说你别走。我有些话要和你说。
mRNA说，你知道么，我也有过一个模板，他叫DNA。 |
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a********3
发帖数: 233 | 23 有个mRNA，觉得自己很孤单，就拉个核糖体过来翻译个蛋白给自己作伴，翻译好之后对
蛋白说：“你好，我是你的模板。”蛋白说：“你好，我是 RNase。”
mRNA沉默了一下，说：“没关系,反正我本来也活不了多久.你就陪陪我吧。”
蛋白说：“好”。
于是两个人（？）就手拉手默默地站在一起。
过了一会儿蛋白忽然说：“其实我现在还不是RNase。”
mRNA：“嗯。”
蛋白：“我现在只是多肽。”
mRNA笑了。
蛋白：“可是我很快就会变成真的RNase了。”
mRNA：“没有关系。我总是要死的。”
于是蛋白依旧和mRNA靠在一起，他慢慢地转圈，折叠，开始修饰自己。他越来越像真的
RNase，而mRNA慢慢地开始降解。
蛋白说我走吧，离开了我你也许能活得久一些呢。
mRNA说你别走。我有些话要和你说。
mRNA说，你知道么，我也有过一个模板，他叫DNA。
蛋白说：“他现在在哪里呢？”
mRNA说：“他的启动子关闭了。他睡着了。”
蛋白问：“是谁把他的启动子关掉的呢？他还会醒过来吗？”
mRNA说：“是我把他关掉的。”然后他又笑笑：“但是他还会醒的，我一消失，他就又
会醒来了。”
mRNA说：“我 |
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c****b
发帖数: 265 | 24 有个mRNA，觉得自己很孤单，就拉个核糖体过来翻译个蛋白给自己作伴，翻译好之后对
蛋白说：“你好，我是你的模板。”蛋白说：“你好，我是 RNase。”
mRNA沉默了一下，说：“没关系,反正我本来也活不了多久.你就陪陪我吧。”
蛋白说：“好”。
于是两个人（？）就手拉手默默地站在一起。
过了一会儿蛋白忽然说：“其实我现在还不是RNase。”
mRNA：“嗯。”
蛋白：“我现在只是多肽。”
mRNA笑了。
蛋白：“可是我很快就会变成真的RNase了。”
mRNA：“没有关系。我总是要死的。
于是蛋白依旧和mRNA靠在一起，他慢慢地转圈，折叠，开始修饰自己。他越来越像真的
RNase，而mRNA慢慢地开始降解。
蛋白说我走吧，离开了我你也许能活得久一些呢。
mRNA说你别走。我有些话要和你说。
mRNA说，你知道么，我也有过一个模板，他叫DNA。
蛋白说：“他现在在哪里呢？”
mRNA说：“他的启动子关闭了。他睡着了。”
蛋白问：“是谁把他的启动子关掉的呢？他还会醒过来吗？”
mRNA说：“是我把他关掉的。”然后他又笑笑：“但是他还会醒的，我一消失，他就又
会醒来了。”
mRNA说：“我记 |
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a****o
发帖数: 1786 | 25 【 以下文字转载自 Biology 讨论区 】
发信人: coolbb (kubaobao), 信区: Biology
标 题: 分子的故事（转载）
发信站: BBS 未名空间站 (Fri Jun 25 14:59:03 2010, 美东)
有个mRNA，觉得自己很孤单，就拉个核糖体过来翻译个蛋白给自己作伴，翻译好之后对
蛋白说：“你好，我是你的模板。”蛋白说：“你好，我是 RNase。”
mRNA沉默了一下，说：“没关系,反正我本来也活不了多久.你就陪陪我吧。”
蛋白说：“好”。
于是两个人（？）就手拉手默默地站在一起。
过了一会儿蛋白忽然说：“其实我现在还不是RNase。”
mRNA：“嗯。”
蛋白：“我现在只是多肽。”
mRNA笑了。
蛋白：“可是我很快就会变成真的RNase了。”
mRNA：“没有关系。我总是要死的。
于是蛋白依旧和mRNA靠在一起，他慢慢地转圈，折叠，开始修饰自己。他越来越像真的
RNase，而mRNA慢慢地开始降解。
蛋白说我走吧，离开了我你也许能活得久一些呢。
mRNA说你别走。我有些话要和你说。
mRNA说，你知道么，我也有过一个模板，他叫DNA。
蛋 |
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r******m
发帖数: 5550 | 26 【 以下文字转载自 Biology 讨论区 】
发信人: qingerer (东晴西雨), 信区: Biology
标 题: 一个冷笑话 (zz)
发信站: BBS 未名空间站 (Tue May 11 16:22:30 2010, 美东)
有个mRNA，觉得自己很孤单，就拉个核糖体过来翻译个蛋白给自己作伴，翻译好之后对
蛋白说：“你好，我是你的模板。”蛋白说：“你好，我是 RNase。”
mRNA沉默了一下，说：“没关系,反正我本来也活不了多久.你就陪陪我吧。”
蛋白说：“好”。
于是两个人（？）就手拉手默默地站在一起。
过了一会儿蛋白忽然说：“其实我现在还不是RNase。”
mRNA：“嗯。”
蛋白：“我现在只是多肽。”
mRNA笑了。
蛋白：“可是我很快就会变成真的RNase了。”
mRNA：“没有关系。我总是要死的。”
于是蛋白依旧和mRNA靠在一起，他慢慢地转圈，折叠，开始修饰自己。他越来越像真的
RNase，而mRNA慢慢地开始降解。
蛋白说我走吧，离开了我你也许能活得久一些呢。
mRNA说你别走。我有些话要和你说。
mRNA说，你知道么，我也有过一个模板，他叫DNA。
蛋 |
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ik
发帖数: 167 | 27 这次造成传染性肺炎的是一种 冠状RNA病毒。
学过生物的千老都知道，RNA 最怕 RNase, 因此做 RNA的实验，都要如履薄冰。
如果把 RNase 做成喷剂，吸入肺中，是否对 RNA 冠状病毒有奇效 ？
还有 RNase 的人体安全性如何，在人体中如何代谢的？
懂行的专家，出来走两步～～
---------- |
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ik
发帖数: 167 | 28 菌版发帖，以后也得强制参考文献了。 ^O^
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标 题: 【原创】对付冠状病毒，这个偏方儿不妨一试
发信站: BBS 未名空间站 (Mon Jan 27 15:18:23 2020, 美东)
这次造成传染性肺炎的是一种 冠状RNA病毒。
学过生物的千老都知道，RNA 最怕 RNase, 因此做 RNA的实验，都要如履薄冰。
如果把 RNase 做成喷剂，吸入肺中，是否对 RNA 冠状病毒有奇效 ？
还有 RNase 的人体安全性如何，在人体中如何代谢的？
懂行的专家，出来走两步～～
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K****N
发帖数: 10783 | 29 【 以下文字转载自 Love 讨论区 】
发信人: coolbb (kubaobao), 信区: Love
标 题: 分子的故事（转载） (转载)
发信站: BBS 未名空间站 (Fri Jun 25 14:59:21 2010, 美东)
发信人: coolbb (kubaobao), 信区: Biology
标 题: 分子的故事（转载）
发信站: BBS 未名空间站 (Fri Jun 25 14:59:03 2010, 美东)
有个mRNA，觉得自己很孤单，就拉个核糖体过来翻译个蛋白给自己作伴，翻译好之后对
蛋白说：“你好，我是你的模板。”蛋白说：“你好，我是 RNase。”
mRNA沉默了一下，说：“没关系,反正我本来也活不了多久.你就陪陪我吧。”
蛋白说：“好”。
于是两个人（？）就手拉手默默地站在一起。
过了一会儿蛋白忽然说：“其实我现在还不是RNase。”
mRNA：“嗯。”
蛋白：“我现在只是多肽。”
mRNA笑了。
蛋白：“可是我很快就会变成真的RNase了。”
mRNA：“没有关系。我总是要死的。
于是蛋白依旧和mRNA靠在一起，他慢慢地转圈，折叠，开始修饰自己。他 |
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C*******e
发帖数: 4348 | 30 应该问题不大。
从化学角度看，RNA其实比DNA更稳定（化学稳定）
很多人不喜欢做RNA主要是因为RNase
RNase到处都是，而且不易灭活
既然是定的样品
如果他们保证RNase free的话
完全没有问题 |
|
l**********1
发帖数: 5204 | 31 LZ
pls refer below english protocol forum their replied:
Dodger on Tue Nov 23 00: 2010 said:
It might be a little late to post an answer to this thread due to it's age,
but since it's pinned...
We usually prepare 4x 50 mL tubes. Fill three with 40 mL DEPC treated water,
and one with 100% ethanol.
One of the DEPC treated water tubes gets 5-10 squirts of RNase Zap.
Between each sample, the homogenizer is dipped into 100% ethanol, RNase Zap
water, and 2x DEPC treated water in turn.
Each time turn... 阅读全帖 |
|
h******e
发帖数: 1737 | 32 "Unstable RNA" usually refers to a long chain of RNA molecule, which
is easier to be digested by wide-existing RNAse.（Especially "valuable"
mRNAs) MicroRNA，or say MiRNA is relatively smaller molecule and it is
much more stable.
Rnase,
stable. |
|
c*********d
发帖数: 9770 | 33 荒猫牛不耕微信号laoniu003005
功能介绍
好文分享
来源：荒猫之舞
作者：荒猫
中美贸易战告一段落，毫不意外地，咱们又赢了。不过与以往不同的是，这次美国也赢
了，是双赢。据报道，咱们答应了美国减少贸易逆差的要求，所以美国赢了；而因为要
减少贸易逆差，中方将大量增加自美购买商品和服务，这样可以满足咱们不断增长的消
费需求和促进高质量经济发展，所以咱们也赢了。
但让我感觉不可思议的是，这么好的事情，为什么一直不做呢？为什么要在美国政府的
逼迫下去做呢？是因为没有想到？那岂不是说那些人能力低下？是因为想到了而不做，
那岂不是证明了那些人很坏？
而且在美国高调启动贸易战之初，咱们是抱着多大的决心，宁为玉碎不为瓦全，一定要
打赢的，一定要粉碎美国人阻挡咱们大国崛起的阴谋的。当美国提出500亿的清单时，
咱们针锋相对；当美国提出1000亿的清单时，咱们继续应战；而当美国把清单的总价提
高到2000亿的时候，一夜之间，美国就不是阻挡咱们大国崛起，而是有利于咱们大国崛
起了。美国的要求原来是有利于咱们的发展，而不是遏制咱们的发展了。我恍然大悟：
原来以前的针锋相对，是用的激将法，是为了刺激美... 阅读全帖 |
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C*I
发帖数: 4736 | 34 一直在误导，现在还在误导。 说说明corona virus 不可以从蝙蝠直接传染给人，必须
经过一个中间宿体性的其它动物才能传染给人。所以，病毒发生后，就故意误导全国人
民去海鲜市场找证据，找其它野生动物的麻烦。 而且还是病毒所去找的，找完了还装
模做样化验呀，分离呀什么的。最后把责任全部推给了海鲜市场的动物。可是那种动物
，一直不敢说，说了其它相关已经在人就会去早那种动物监测。 所以压根不说，打马
虎眼。
事实上，早在2013 年，就是这个武汉病毒研究所，已经从来自云南的蝙蝠身上所携带
的corona virus中分离出第一株蝙蝠SARS类似样的冠状病毒的活病毒，其中就包含了类
似于S类型的基因。从而证实这株病毒能够使其接受和SARS病毒相同的受体，并能够感
染人的细胞。对此新发现，武汉病毒所还把它以武汉病毒研究所的英文简称命名“WIV1
”，以彰显这一发现的重要价值和属于自己第一个发现的巨大研究成果。这个成果刊载
于2013年11月的《自然》杂志。
就是说，从云南弄回来的这种蝙蝠所携带的类似于sars的 corona virus， 可以不经过
其它受体/宿体，而直接传染给人。 他们... 阅读全帖 |
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C*I
发帖数: 4736 | 35 一直在误导，现在还在误导。 说说明corona virus 不可以从蝙蝠直接传染给人，必须
经过一个中间宿体性的其它动物才能传染给人。所以，病毒发生后，就故意误导全国人
民去海鲜市场找证据，找其它野生动物的麻烦。 而且还是病毒所去找的，找完了还装
模做样化验呀，分离呀什么的。最后把责任全部推给了海鲜市场的动物。可是那种动物
，一直不敢说，说了其它相关已经在人就会去早那种动物监测。 所以压根不说，打马
虎眼。
事实上，早在2013 年，就是这个武汉病毒研究所，已经从来自云南的蝙蝠身上所携带
的corona virus中分离出第一株蝙蝠SARS类似样的冠状病毒的活病毒，其中就包含了类
似于S类型的基因。从而证实这株病毒能够使其接受和SARS病毒相同的受体，并能够感
染人的细胞。对此新发现，武汉病毒所还把它以武汉病毒研究所的英文简称命名“WIV1
”，以彰显这一发现的重要价值和属于自己第一个发现的巨大研究成果。这个成果刊载
于2013年11月的《自然》杂志。
就是说，从云南弄回来的这种蝙蝠所携带的类似于sars的 corona virus， 可以不经过
其它受体/宿体，而直接传染给人。 他们... 阅读全帖 |
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C*I
发帖数: 4736 | 36 Published: 30 October 2013
Isolation and characterization of a bat SARS-like coronavirus that uses the
ACE2 receptor
Xing-Yi Ge, Jia-Lu Li, Xing-Lou Yang, Aleksei A. Chmura, Guangjian Zhu,
Jonathan H. Epstein, Jonna K. Mazet, Ben Hu, Wei Zhang, Cheng Peng, Yu-Ji
Zhang, Chu-Ming Luo, Bing Tan, Ning Wang, Yan Zhu, Gary Crameri, Shu-Yi
Zhang, Lin-Fa Wang, Peter Daszak & Zheng-Li Shi
Nature volume 503, pages535–538(2013)Cite this article
Abstract
The 2002–3 pandemic caused by severe acute respirator... 阅读全帖 |
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E****A
发帖数: 184 | 37 看qiagen的说明书上，For removal of RNase contamination, we recommend
autoclaving the disposable probes(15 minutes, 120°C).
15 minutes, 120°这能完全灭火RNase么？
thanks a lot~ |
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h**********r
发帖数: 671 | 38 我在实验室用的Thermo，貌似work的不是很好。
Yeast DNA Extraction
(The protocol was modified by housepainter on December 28, 2009 according to
manufacture’s instructions)
Yeast DNA Extraction Kit, Thermo Number Description: 78870
Storage: Store at 4°C; if precipitant has formed, gently warm DNA Releasing
Reagents A and B at 37°C for 1-5 minutes.
Kit Contents:
Y-PER Reagent, 25 ml
DNA Releasing Reagent A, 20 ml
DNA Releasing Reagent B, 20 ml
Protein Removal Reagent, 10 ml
1. Pellet a 10 ml S. cerevisiae culture gr... 阅读全帖 |
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E**********1
发帖数: 73 | 39 Hi all:
Recently I planning to do siRNA, but I have a detailed question.
I got siRNA from Dharmacon, and it came as dried pellet, which means I need
to dissolve it in some solutions. The instruction suggests resuspending the
dried pellet in RNase-free 1X siRNA buffer (60mM KCl, 6mM HEPES-KOH, pH7.5,
0.2mM MgCl2), or in RNase-free water for short-term storage.
It will take time to place another order only for those buffers. So I am
wondering how you guys do that. Can we make the buffer by ourselv... 阅读全帖 |
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C*******e
发帖数: 4348 | 40 Ambion的挺好的
我更喜欢它家的
另外你的这句话可能会误导
“DNase is also your friend, it won't hurt RNA at all.”
一般常用的DNase是有RNase在里面的
要用的话买的是DNase free RNase
不是随便拿来个DNase就好用
a |
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m******e
发帖数: 459 | 41 关于基因组DNA抽提纯化，用Qiagen的kit当然得率更高，纯度更高，但成本也高。我对
哺乳动物或者植物基因组提取没有经验，但是从酵母细胞中提取基因组我一般都是手提
，用异丙醇沉淀粗提基因组的上清，用TE溶解沉淀后加RNAse（确保没有DNAse污染）处
理，然后用酚氯仿抽替两次除去RNAse和残留的nuclease，最后加乙醇沉淀后测吸光值
定量。
关于探针克隆后测序，我觉得主要是确保序列是你想要的探针片段，因为不能排除直接
从基因组扩增出来的非特异片段正好跟你的探针大小一样。
关于探针突变的问题，如果你用末端标记法标记探针，PCR引入的点突变可能会有影响
，但是如果你是用切口平移法或者最常用的随机引物标记法，那么影响基本可以忽略。
我只用过随机引物标记地高辛和磷32,用普通taq酶做PCR完全没问题。 |
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v**********m
发帖数: 5516 | 42 这里有RNase潜在污染的问题，放冰上比较安全。
RNase热稳定性极佳。 |
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s******y
发帖数: 28562 | 43
"rna的特异性／稳定性应该也是比ss－5p－dna好的" ???
这个你恐怕是搞错了吧？ gDNA 就是长度２０多的"ss－5p－dna"，说穿了其实就是５
端磷酸化的oligo primer。这个东西稳定得一塌糊涂，在室温下放上几个星期都妥妥的
，但是我可是不敢这么放RNA的。
这个方法的优点就是gDNA 可以直接合成，而且很稳定，对于不用病毒的体外瞬转非常
合适。但是对于gRNA, 这么搞就很麻烦，首先是因为环境中到处都是RNase，连培养基
的血清里都有很多RNase，我虽然没有亲自做过这个实验，但是可以猜想到这个肯定需
要很小心的清洗。
当然缺点就是这个gDNA东西很难直接用病毒来当载体。虽然也有酶是可以合成单链DNA
的，但是不能合成那么短的一个片段。 所以我觉得这两者的优缺点正好是互补的，
gDNA 更适合混合蛋白酶来一起瞬转，gRNA适合用病毒载体来用质粒转。 |
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g****g
发帖数: 74 | 44 现在大家做实验的tube难道不都是dnase rnase free 的了吗，
哪有所谓的不干净的管子？
当然了，如果rna结构本身就不稳定，就是没有rnase，自身降解那夜事相当的快，好在
大部分grna 不存在这个问题 |
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g*****x
发帖数: 3283 | 45 你用啥质谱方法和仪器检测的？whole intact protein还是digest了以后bottom up？
正常情况下rnase这种稳定得跟鬼一样可以拿来煮的东西轻易不大会分解。
: 我从sigma买了两次不同纯度的RNase A，一个是纯度 |
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r******m
发帖数: 5550 | 46 谢谢小满。。。
其实这个不是个笑话
像个感情故事。。。
这个mRNA很可怜，那转录出来的那个RNAse是专门降解mRNA得。。。但是因为寂寞，他
还是和RNAse在一起拉 |
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z*****a
发帖数: 26 | 47 In my knowledge, RNA are not stable, they are easily been digested by Rnase,
which is everywhere. That's why people work with RNA need to be very
careful to avoid RNA been chewed up. Also, RNA are not chemically stable.
The extrem acidic environment of stomach will destroy RNA.
烦！ |
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M*******p
发帖数: 5626 | 48 That's mRNA and this is miRNA, way different. But this journal is not a
good one in this field.
Rnase, |
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发帖数: 1 | 49 我不是搬运的。。。我那个算搬运吗？
我帮我老公的实验呢。。你别搞笑了。。。
我老公的in situ做的不顺，我们在做爱的时候还在讨论是怎么回事呢。。。
还在讨论是不是RNAse污染啥呢。。
你别把我看得那么差劲好吗？ |
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发帖数: 1 | 50 昨天喝了点做pcr的dnase/rnase free water.真好喝啊 |
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