f*****n
发帖数: 12752 | 1 cho细胞里表达抗体会糖基化，请问有什么技术可以分离同一抗体的糖基化程度不同的
组分呢？最好之后能再分析各组分比例。如果糖基化程度不高，像sds-page及size
exclusion 层析之类的可能分不开吧？
多谢各位指点！！！ |
|
d*****r
发帖数: 2583 | 2 ☆─────────────────────────────────────☆
Wanshington (Joudon) 于 (Tue Jan 13 11:40:12 2009) 提到:
最近对酵母表达的蛋白进行去糖基化实验，我想知道蛋白溶液中的咪唑对NEB公司的
Endo f 去糖基化酶是否有影响？
谢谢！
☆─────────────────────────────────────☆
kevinwan (kevin) 于 (Tue Jan 13 11:50:56 2009) 提到:
Endo Hf ba.
Imidazole won't interfere, of course you can always change the buffer before
enzymatic digestion.
☆─────────────────────────────────────☆
Wanshington (Joudon) 于 (Tue Jan 13 12:53:05 2009) 提到:
Thank kevin !
还有一件事情，就是change buff |
|
s******s
发帖数: 13035 | 3 做了再说。
btw， phos比较容易，glyco的东西很烦的。是多加了还是减少了，多位点
糖基化，都很复杂。想鉴定的看运气了 |
|
l***d
发帖数: 1828 | 4 1999年9月1日至4日，香山科学会议召开了主题为“糖缀合物与人类健康”的第122次学
术讨论会。惠永正教授、张树政院士、美国Alan D. E1bein教授和日本Tomoya Ogawa教
授受邀担任本次会议执行主席。糖生物学是90年代初迅速发展起来的一门新的学科，它
的兴起带动和促进了“糖工程学”的进步。近年来，糖缀合物的研究成果表明，糖缀合
物在生命过程中有着重要作用，人类疾病病因的阐明以及相关药物的开发也都与糖缀合
物的研究密切相关。科技界正在把更多注意力投向糖缀合物的研究。
一、O一G1cNAc糖基化
l984年，美国约翰霍普斯大学的Gerald Hart教授等首先发现了0一G1cNAc糖基化形成蛋
白质。近年，0一G1cNAc 糖基化的研究已成为糖生物学的一个主要发展领域。Hart教授
首先报告了有关O—G1cNAc糖基化研究的最新进展，包括：①0一G1cNAc糖基转移酶 (
0GT)基因已被定位于人染色体Xql3；胚胎干细胞的生存，需要至少1个OGT等位基因；
OGT酶亚基间有多种聚合形式，从而形成的OGT多种同工酶对OGT酶活性有调节作用；②
去除O—G1cNAc糖基的 |
|
t*********5
发帖数: 2 | 5 生化与细胞所在DNA去甲基化机制研究中获得重要进展：发现一种新的修饰碱基
2011-08-08 10:02:00 | 来源： | 【大 中 小】【打印】【关闭】
在高等生物的基因组DNA中除含有腺嘌呤(A)、鸟嘌呤(G)、胞嘧啶(C)和胸腺嘧啶(T)四
种常见的碱基形式外，还含有胞嘧啶的修饰形式：5-甲基胞嘧啶（5mC），被称为第5种
碱基。而且它可以进一步被氧化为5-羟甲基胞嘧啶（5hmC），也被称为第6碱基。这些
修饰形式在表观调控中都具有重要的作用，但它们如何被可逆转变为胞嘧啶(C)还不清
楚。中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所的工作证明，DNA中
的5mC和5hmC都可以被Tet家族的双加氧酶进一步氧化为第7种碱基：5-羧基胞嘧啶（
5caC）；此外，胸腺嘧啶DNA糖基化酶（TDG）可以特异性地识别这一新的碱基修饰形式
，并将其从基因组中切除。2011年8月4日，《Science》杂志在线发表了这项关于DNA去
甲基化机制的研究发现。这项研究由徐国良、李林、丁建平实验室及中科院药物所等单
位合作完成，副研究员贺宇飞、博士后李滨忠等承担了主要工作。
动植物生长... 阅读全帖 |
|
b******n
发帖数: 4225 | 6 现在有些proteomics的工作，抽提蛋白做SDS-PAGE（不是双向电泳）
然后割胶做LC-MS方面的工作
如果有糖蛋白，怎么能识别出来？因为糖基化修饰有时候很未知的，你不知道有几个糖基
我理解MS就是得到一个肽段的分子量，然后跟已知肽段分子量比较
如果目的肽段有可能糖基化，是不是很有可能无法鉴别出来？ |
|
m*********3
发帖数: 1425 | 7 在做Mab的glycosylation,有几个问题请教:
1.大家都知道Mab在Fc有个N-glycan,可我看文献，其实大约10-15%的Fab上也有N-
glycan,想请教一下大家对于这种有两个glycosylation的Mab怎么分析它的糖基化，现
在流行的用LC-MS,CE分析都是把糖酶切下来，然后label,但对于有两个糖基化的这个方
法似乎不算最好，对于有Fab N-glycan的大家一般怎么做？
2. 我看到有人用IdeS切Fab和Fc,比起Papain,哪个方法好一些呢？
3.另外对于Fc-fusion protein,还有O-glycan(比如Enbrel)，大家一般做glycopeptide
还chemically release呢？
4.还用过ETD确定glycosylation site,但ETD的效率很低，大家还有什么其它方法确定
glycosylation site吗？尤其是O-glycan, 谢谢。 |
|
s******s
发帖数: 13035 | 8 糖链估计可以预先处理掉。不过没有那段也没关系，不太可能整个蛋白都糖基化了
糖基 |
|
n**m
发帖数: 7872 | 9 你是很听话的那种patient，呵呵。我是比较喜欢challenge医生的 :P
HbA1c是一种被糖基化的血红蛋白，跟血液中平均血糖浓度有关，是比血糖更客观的糖
尿病测量方
法。正常人的cut off是6.5%
今天看了几篇paper，提出建议第一个trimester测HbA1c。这会儿测glucose tolerance
还测
不出什么，但是HbA1c已经能看出区别来了，就是说平均血糖已经有了区别。这么做的
原因是24-28
周的时候再确诊gestational diabetes有点晚了，即使后期血糖控制很好，还是有可能
宝宝比较
大，前面长的。而HbA1c可以早发现糖妈。
我觉得你后面血糖一直控制得比较低，所以HbA1c也比较低。
within |
|
c****4
发帖数: 13 | 10 我现在需要测一个抗体糖基化上的寡糖oligosaccharide的结构。
看了一下大致有这么几种方法：色谱，质谱（ESI，MADLI等等)和酶水解成单糖结合色
谱。
我知道一般是用色谱结合质谱，现在想问问哪种方法最简单快速。
另外这个ESI-MS/MS据说可以用多次过的方式直接解出结构，不知道数据分析起来容易
吗？
请做过类似试验的大能们指点一下！
谢谢！ |
|
c****4
发帖数: 13 | 11 我现在需要测一个抗体糖基化上的寡糖oligosaccharide的结构。
看了一下大致有这么几种方法：色谱，质谱（ESI，MADLI等等)和酶水解成单糖结合色
谱。
我知道一般是用色谱结合质谱，现在想问问哪种方法最简单快速。
另外这个ESI-MS/MS据说可以用多次过的方式直接解出结构，不知道数据分析起来容易
吗？
请做过类似试验的大能们指点一下！
谢谢！ |
|
s*******e
发帖数: 1010 | 12 N-linked glycoproteins 指的不是N末端糖基化 |
|
b*******3
发帖数: 99 | 13 不知道做不出来的原因到底是什么.
1不应该95度DENATURE
2应该去糖基化
3其他 |
|
g*********d
发帖数: 233 | 14 夏荣辉，李江
上海交通大学医学院，上海（200011）
E-mail：e******[email protected]
摘 要：基因的表观遗传学修饰正越来越受到人们的重视，它包括DNA甲基化和组蛋白修
饰，组蛋白修
饰又包括组蛋白乙酰化和组蛋白甲基化。基因的表观遗传学改变在基因转录调节方面有
重要作用。最
近研究较多的是多种组蛋白修饰方式和DNA甲基化在基因转录调节方面的共同作用，本
文详述组蛋白
修饰和DNA甲基化的发生机制，并且总结了组蛋白乙酰化和组蛋白甲基化与DNA甲基化之
间的相互作
用，提示不同位点的组蛋白甲基化与DNA甲基化共同作用于基因转录，并且发挥不同的
作用，具体体
现在组蛋白乙酰化、组蛋白H3K9、H3K27和H4K20甲基化与DNA甲基化协同作用，使基因
发生转录抑
制，而组蛋白H3K4甲基化与基因转录激活有关。
关键词：组蛋白修饰；DNA甲基化；关系
1. 引 言
目前，在研究肿瘤发生发展的过程中，基因的表观遗传学修饰所起的作用日益得到人们
的重视。组蛋
白修饰和DNA甲基化是两种最重要的表观遗传学修饰方式。研究表明，人类几乎所有类
型的肿瘤都存
在组蛋白及DNA甲基化的异常... 阅读全帖 |
|
发帖数: 1 | 15 牛津大学著名生物技术专家、世界顶尖生物学研究所所长Raymond Dwek教授认为新冠疫
苗研发极难成功。
Raymond Dwek 教授是著名生物技术专家，现任世界顶尖生物学研究机构:牛津大学糖生
物学研究所所长。他于2013年荣获大英帝国勋章。在此次高端研讨会上，他分享了自己
几十年的研究经验，认为新冠病毒的“高度糖基化现象”是疫苗研发难度剧增的原因。
1、新冠病毒有着庞大的结构，是高度糖基化的球形颗粒，至少有66个糖基化位点，这
么多位点想“逮准”是很难的。
2、当年，艾滋病病毒（HIV）也是“高度糖基化”的，至今35年过去了，抗HIV疫苗依
然没有取得成功，现在抗艾主要还是依靠药物。
3、疫苗其实是唤起免疫应答来狙击病毒，高度糖基化决定了这种病毒很容易变异。本
来“逮准”就难，逮到了又会再变，这当然就难上加难了。
4、HIV的糖基化位点是流感病毒的3-6倍，所以到现在还搞不出疫苗来。而新冠病毒呢
？又是HIV病毒的至少2倍以上，搞疫苗谈何容易呀。
5、相比之下，药物可能才是抑制病毒更可行的办法，这是此次抗新冠病毒中有希望取
得突破的解决办法。 |
|
W****I
发帖数: 5 | 16 以下是不负责任的言论---->
按照我朋友去世老板的理论(他原本还计画想靠这个拿若奖的)，讲浅白点，T2D是糖基
跟去糖基化酵素失调引起的。基本上，体内的糖基化平衡会跟血糖循环互相调控，糖基
化可大范围调控血糖循环中磷酸化程度。而相比之下，去糖基化酵素比糖基酵素更受调
控，并且除了ENERGY IMBALANCE外还有很多因素可调控，所以严格来说是去糖基化酵素
失调导致T2D。而AD已有被号称T3D的趋势，也有可能是所以严格来说是去糖基化酵素失
调导致。但是这理论至今还在T2D是单因素或多因素引起辩论中，所以T2D的成因还未定
论。但可以讨论的是，T2D是老化的现象之一，所以现阶段，T2D(或AD也是)也有可能是
一个只能延缓而无法有效真正终身回复的现象。可是你不去延缓这现象，你就有可能老
化的快而死的快，这就是个人的选择了。 <--------我一定是太闲了，请不要理我。 |
|
W****I
发帖数: 5 | 17 以下是不负责任的言论---->
按照我朋友去世老板的理论(他原本还计画想靠这个拿若奖的)，讲浅白点，T2D是糖基
跟去糖基化酵素失调引起的。基本上，体内的糖基化平衡会跟血糖循环互相调控，糖基
化可大范围调控血糖循环中磷酸化程度。而相比之下，去糖基化酵素比糖基酵素更受调
控，并且除了ENERGY IMBALANCE外还有很多因素可调控，所以严格来说是去糖基化酵素
失调导致T2D。而AD已有被号称T3D的趋势，也有可能是所以严格来说是去糖基化酵素失
调导致。但是这理论至今还在T2D是单因素或多因素引起辩论中，所以T2D的成因还未定
论。但可以讨论的是，T2D是老化的现象之一，所以现阶段，T2D(或AD也是)也有可能是
一个只能延缓而无法有效真正终身回复的现象。可是你不去延缓这现象，你就有可能老
化的快而死的快，这就是个人的选择了。 <--------我一定是太闲了，请不要理我。 |
|
c***s
发帖数: 70028 | 18 2008年去世的埃德纳·帕克曾被认为是世界上最长寿的人。
西欧一家非主流报纸日前发布消息说，俄罗斯科学家已经搞出了“长生不老药”，并可在两年内将该药投入市场。关于“长生不老药”该报道是这样解释的：莫斯科大学的科学家研制出一种抗氧化剂，这种“新药”能够有效抑制氧对人体的有害影响。医学家们早就知道，人体中的氧几乎都会转变成水，其中只有1%有可能变成超氧化物并转化为有毒物质。抗氧化剂就是用来阻止氧向有害物转化的药品。然而，国际老年病学研究领域的权威人士早就指出，临床试验和多年的实践表明，现有的各类抗氧化剂并不能降低年龄增长对人体细胞产生的影响，因而也就不能达到延缓衰老的目的。但“长生不老药”的发明者却坚称，他们研制的这种抗氧化剂不仅可以延长人的寿命，还能使人一直保持年轻、健康的状态。报道说，目前该药已经在动物实验中取得成功，眼下正准备进行人体实验，并可望在两年内走进药房。这消息听起来够振奋人心的，但靠不靠谱呢？服用一粒药丸，就能建康长寿——这是科学，还是神话？
你能活到800岁吗
中广网报道，莫斯科国立大学物理化学生物学研究所所长斯库拉乔夫院士和英国剑桥大学的遗传学家格雷教授都认为，人的寿命... 阅读全帖 |
|
发帖数: 1 | 19 听说疫苗难度很大,主要是下面几点
1、新冠病毒有着庞大的结构，是高度糖基化的球形颗粒，至少有66个糖基化位点，这
么多位点想“逮准”是很难的。
2、当年，艾滋病病毒（HIV）也是“高度糖基化”的，至今35年过去了，抗HIV疫苗依
然没有取得成功，现在抗艾主要还是依靠药物。
3、疫苗其实是唤起免疫应答来狙击病毒，高度糖基化决定了这种病毒很容易变异。本
来“逮准”就难，逮到了又会再变，这当然就难上加难了。
4、HIV的糖基化位点是流感病毒的3-6倍，所以到现在还搞不出疫苗来。而新冠病毒呢
？又是HIV病毒的至少2倍以上，搞疫苗谈何容易呀。 |
|
j****e
发帖数: 12067 | 20 【 以下文字转载自 Headline 讨论区 】
发信人: Cnews (chinanews), 信区: Headline
标 题: “长生不老药”2年内投入市场 人能活到1000岁
发信站: BBS 未名空间站 (Sat Oct 9 21:25:41 2010, 美东)
2008年去世的埃德纳·帕克曾被认为是世界上最长寿的人。
西欧一家非主流报纸日前发布消息说，俄罗斯科学家已经搞出了“长生不老药”，并可在两年内将该药投入市场。关于“长生不老药”该报道是这样解释的：莫斯科大学的科学家研制出一种抗氧化剂，这种“新药”能够有效抑制氧对人体的有害影响。医学家们早就知道，人体中的氧几乎都会转变成水，其中只有1%有可能变成超氧化物并转化为有毒物质。抗氧化剂就是用来阻止氧向有害物转化的药品。然而，国际老年病学研究领域的权威人士早就指出，临床试验和多年的实践表明，现有的各类抗氧化剂并不能降低年龄增长对人体细胞产生的影响，因而也就不能达到延缓衰老的目的。但“长生不老药”的发明者却坚称，他们研制的这种抗氧化剂不仅可以延长人的寿命，还能使人一直保持年轻、健康的状态。报道说，目前该药已经在动物实验中取得... 阅读全帖 |
|
i***l
发帖数: 1656 | 21 楼上都对，
可能是蛋白有修饰
或者寡聚了
如果怀疑磷酸话，用磷酸酶消化，比较前后变化来证明； 怀疑糖基化，就用糖基酶处
理，处理前后跑胶比较。
但是一般糖基化的也不会100%，我做O LinK的糖基化，大多是其中一条本身的带，另一
条大些的糖基划的带；好像磷酸化也是一条本身大小的，一条或几条磷酸化的带，取决
于到底几个磷酸化位点，效率多少。
OLIGOER的问题 在高温下，穿膜区有非特异性疏水作用，导致聚合。这时候反而37度变
性更好。
但是，感觉从你描述来看，这个不太像，一般寡居的蛋白会形成Ladder，单体
，二聚，四聚，等等，不只两条带。 |
|
z**n
发帖数: 22303 | 22 美国可以信誓旦旦的编造理由攻打他国，一个让孟山都高管做头头的FDA还真信不过。
转基因食品存在健康影响吗?
生物技术公司宣称,基因工程并不比传统的杂交更不可预测或是更危险,因此不应该对
转基因作物进行特殊或者系统的安全评价。事实上,基因修饰从根本上与传统杂交有所
区别, 已经有强有力的证据证明转基因作物的安全性。
基因工程通常将一些来自一种(或者多种)生物的遗传材料引入到另一种生物的 DNA 中,
通常是完全不同的另一个种。这一过程从不基于植物的正常繁殖过程。相反,外来的
DNA 或者通过感染疾病细菌或者采用包裹着外来 DNA 的精细金属粒子撞击细胞。这一
人 工 DNA 插入过程破坏了通常意义上维持物种遗传完整性的自然生物机制。在这一过
程的不 同阶段,实验室使细胞数量增长的方法称之为“组织培养”。
这一技术存在着诸多缺陷。这个方法使得转基因作物隐含了大量的风险,而传统的杂交
生产的植物不存在这些问题:
由于插入的基因通常来自其他的生物,比如细菌或者是人工合成的,产生的蛋白通常对
于动物或者人类的饮食而言比较新。蛋白的产生可能也需要在植物体内形成新的生物化
学过程或者是影响一个已经存... 阅读全帖 |
|
f********n
发帖数: 6465 | 23 2003.01--至今，本人首次利用改进的PCR方法克隆了新的Pim-1激酶的同源异型体Pim-
1L，发现可作为前列腺癌，白血病的诊断指标和生物标记，以及重要的耐药糖蛋白(P糖
蛋白，乳腺癌耐药糖蛋白-BCRP) 的激活酶，并作为一个极其重要的癌基因，在癌症及
发育障碍疾病治疗中为一个非常重要的药靶。
至今世界上没有一个有效的可用于临床的靶向Pim- 1L激酶的药物。目前，本人已
经找到一个小分子化合物抑制Pim- 1L激酶活性，并进行了分子机理，信号转导通路和
药效研究，准备进行针对前列腺癌，白血病的临床试验。
首次发现了Pim- 1L酶激活P糖蛋白，乳腺癌耐药糖蛋白 BCRP这两种糖蛋白并促进
它们的糖基化修饰，因此针对这种机制，我们已筛选到针对糖基化的化合物，调节了糖
蛋白在细胞膜的表达，增加了化疗药物进入细胞的效果。我们还发现了该化合物逆转耐
药的功能及其分子机理。
已发表论文或已经投出的SCI 收录的第一作者论文8篇，合作作者论文5篇。第一作
者发表的文章影响因子6.8左右，合作作者发表的文章影响因子24.0左右。递交申请美
国专利一项， 国际专利P |
|
J********n
发帖数: 534 | 24 "因为用了Endo H和PNGase F两个糖基化酶分子量只减少了几个kD"
Endo H对糖的种类和修饰敏感，PNGase跟蛋白结构有关。
要看用什么系统表达的，几个N糖基化位点。如果4个位点以上，很轻易就上10kD。 |
|
v**********m
发帖数: 5516 | 25 糖基化是在ER或高尔基体中完成，蛋白在这个成熟过程中不是完全折叠，所以所有可能
的氨基酸序列都可能被糖基化。宿主细胞的类型也很重要，同样的序列在不同的表达体
系中的糖修饰类型和修饰比例都会不同。 |
|
发帖数: 1 | 26 从新冠特点谈谈未来1-2年的情况，比预期还严重，有6个很麻烦的地方。我现在怀疑真
的可能改变未来社会形态了。
麻烦1：新冠可能是人类历史上最厉害的传染病，之一
传染病并不是致死率越高，就越厉害，如果百分百致死，那么传染效率就很低，比如埃
博拉病毒，致死率非常高，但是传播效率就很低，因为载体（人）很快就死了，没办法
继续当传播工具。
新冠在致死率和传染性之间取得了一个高效率的平衡：传染性非常高，但致死率不高不
低，恰恰让你很难受。如果强力防治，致死率就很低，但社会代价很高；如果你不管他
，传染范围很大，致死率又会急剧升高。
新冠这个特点让现在的政府、社会制度很难及时采取最有效率的措施，可以说是十分精
准地攻击了各国社会制度的弱点。所以，各国纷纷中招。
我之前写过一篇文章，结论是：现在各国的制度，根本防不住新冠的全球大爆发。无论
先出现在哪个国家，都防不住。
麻烦2：50%的新冠感染者没有症状，数量太多
无症状感染者数据不公开等相关事项，其实我在2月底就看到一些，但是咱也不敢说。
这不，人民日报挑开了，咱才敢出来聊一聊这个问题，问题比预期的要严重的多。（我
是说国外的情况，不要瞎想）
感染... 阅读全帖 |
|
s*******7
发帖数: 160 | 27 如题，已排除N-糖基化，因为用了Endo H和PNGase F两个糖基化酶分子量只减少了几个
kD。不知磷酸化一般可增加多少，还有其他什么修饰可增加多一些呢？
谢谢！ |
|
s*******r
发帖数: 769 | 28 1. 如果蛋白很纯，SDS一条带，怎么确定这个蛋白就是你要的蛋白？
N端block了，没法测序；
没有抗体，没法western；
2.如果蛋白不纯，比如很多杂带，你怎么确定你要的蛋白在里面？用什么方法？
3. 怎么测试蛋白的热稳定性？用什么biopgysics的方法？
4. 用质谱测MW，有时有偏离，那么表达后修饰都有那些需要考虑进去？
（不考虑糖基化）
5. 怎么确定蛋白是否有糖基化修饰？
6. 蛋白浓缩的时候有沉淀，一般你会怎么办？
愿闻高见。 |
|
s******y
发帖数: 28562 | 29 有几个地方补充一下
2.如果蛋白不纯，比如很多杂带，你怎么确定你要的蛋白在里面？用什么方法？
把符合尺寸的带切下来，送去做质谱
3. 怎么测试蛋白的热稳定性？用什么biopgysics的方法？
一大堆经典方法。自己去查
4. 用质谱测MW，有时有偏离，那么表达后修饰都有那些需要考虑进去？
（不考虑糖基化）
表达后修饰可以直接用质谱来测。只要你告诉对方你有这个需要，他们就会
给你做
5. 怎么确定蛋白是否有糖基化修饰？
质谱是最直接的方法。
6. 蛋白浓缩的时候有沉淀，一般你会怎么办？
严格控制条件，一定要加够DTT. 然后把透析的烧杯密封起来
透析完之后，用高速离心把沉淀成分去掉 |
|
D****g
发帖数: 275 | 30 是不是膜蛋白？如果是的话，很有可能是糖基化，可以用糖基化剪切酶十一时． |
|
s******y
发帖数: 28562 | 31 很多常见的modification是可以让蛋白跑得异常的高的。比方说磷酸化或者糖基化。
90左右的带应该是没有修饰过的分子。250的带很可能是磷酸化的分子。如果250的带不
是很sharp而是有拖尾的话，则可能是糖基化。 |
|
发帖数: 1 | 32 新型冠状病毒2019-nCov的爆发引起了人们对于此突发性公共卫生事件的高度关注。冠
状病毒的刺突糖蛋白（Spike glycoprotein, S glycoprotein）是疫苗、治疗性抗体的
研发以及临床诊断的关键靶点。
为了协助对该流行性疾病进行医学防护措施研发，2020年2月15日，美国卫生总署(NIH)
与德克萨斯大学奥斯汀分校Jason S. McLellan研究组（McLellan组在病毒结构方面做
了很多重要的工作，包括MERS等，有着丰富的经验）进行合作在预印版平台bioRxiv发
表文章Cryo-EM Structure of the 2019-nCoV Spike in the Prefusion Conformation
，利用冷冻电镜技术分析了新型冠状病毒表面S蛋白的近原子结构。另外作者们通过生
物物理以及结构方面的证据发现，SARS-CoV-2的S蛋白结合人体ACE2（宿主细胞受体血
管紧张素转化酶2）【1,2】的亲和力要远高于SARS-CoV的S蛋白，解释了新型冠状病毒
传染性之强的主要原因。
新型冠状病毒是会引发发热、严重呼吸道疾病及肺炎的人传人的病原... 阅读全帖 |
|
V*****2
发帖数: 7930 | 33 国内吹嘘这药如何好，就百度了一下：
其作用机制在于本品与核蛋白有较强的结合力，插入到DNA的双螺旋两股之间，可与DNA
形成复合物，从而阻止DNA的复制与RNA的转录。
氯喹大量积聚于受感染的红细胞内，原虫的食物泡和溶酶体是其浓集的部位。使消化血
红蛋白的血红蛋白酶受损失，疟原虫不能消化所摄取的血红蛋白，导致疟原虫生长发育
所必需的氨基酸缺乏，并引起核糖核酸崩解。此外，氯喹还能干扰脂肪酸进入磷脂，控
制谷氨酸脱氢酶和己糖激酶等。氯喹主要作用于红内期裂殖体，经48~72小时,血中裂殖
体被杀灭。本品对间日疟的红外期无效，故不能根治间日疟。恶性疟可根治。氯喹对配
子体也无直接作用，故不能作病因预防及中断传播之用。
研究表明，有如下几种机制：
1、由于氯喹可以改变内吞体的pH值, 对通过内吞体途径侵⼊细胞的病毒感染具
有显著的抑制作⽤，如博尔纳病病毒、禽白血病毒、寨卡病毒等。
2、氯喹可以通过抑制病毒基因表达影响病毒复制。体内外试验表明，氯喹能改变HIV病
毒gp120包膜的糖基化模式，抑制CD4+T细胞内HIV病毒的复制。
3、氯喹作为⼀种良好的自... 阅读全帖 |
|
发帖数: 1 | 34 1、经常食用含糖量过高的甜食
对各种甜食的喜爱都会导致皮肤早衰。食用含糖量过高的食物是过早出现皱纹的主
要原因之一，因为血液里的糖本身就会与蛋白质相结合发生糖基化，从而最终产生一种
有害的物质，而这种产物将破坏皮肤上的胶原蛋白和弹性蛋白，从而使面部产生皱纹。
2、脂肪摄入不足
身体脂肪过剩会对身体有害，但是适量的脂肪对身体也是必需的，它可以吸收抗氧
化剂和维生素，同时紧致皮肤。
3、空腹节食
空腹节食减肥容易使体重发生波动，而体重波动越大，对皮肤伤害越大。因为你的
体重波动时，皮肤会随之而张弛。
4、吸烟
吸烟不仅对肺部和心脏有损害，而且会显著加速皮肤的老化。
5、睡眠不足
足够的睡眠对修复身体各个系统是十分必要的，当然也包括对皮肤的修复。睡眠不
足将长期损伤皮肤，使皮肤过早老化。
去除皱纹变年轻就按这五个部位
1、眼睛
眼睛周围的皮肤最容易出现皱纹和水肿， 而且此处的皮肤一旦松弛，就很难恢复
原来的状态。按摩眼睛周围时，用中指的指肚沿下眼睑的内侧向外侧，稍微用力进行滑
动按摩，返回时在肌肤上轻轻地滑动， 这样反复做3次。上眼睑亦是同样要领；按摩眼
角周围时，从外眼角向太阳穴方向，左右... 阅读全帖 |
|
s*********a
发帖数: 1409 | 35 在外人看来，我的婚姻我的生活真是幸福的不能再幸福了，我有两个天使一样的女儿，
我的老公高高大大一表人才，是标准的好爸爸好老公。我们过得不富裕，可是也不拮据
。可是我还是觉得很累，朋友见我都说我越来越瘦，我想应该是因为我心里总是很担心
吧。我老公大概8年前查出来有2型糖尿病，那个时候我们刚认识不久。大概命里注定吧
，最后我还是和他结婚，并且有了两个孩子。可是我很受不了我老公对自己的身体不上
心。这里的糖妈妈们都知道怎么控制好血糖吧，很简单，少吃多餐，多动，多检测。多
做做实验找出适合自己的饮食和运动方法。这在我看来并不是很难啊。可是这么多年了
，我老公一直控制得不好。他虽然很注意不吃甜食，少吃或不吃米饭，可是他喜欢面食
。而且他一直都是一日三餐，饿了才吃，一吃就要吃饱。我给他找了很多资料，告诉他
3顿正餐少吃些，中间要加餐。可是他从来不记得自己加餐。另外他生活很不规律，晚
上都是1点以后睡觉。又经常坐长途飞机回国。每次糖基化蛋白都接近7,早上空腹血糖
一般在120-130。现在医生给换了另一种降糖药，还是控制得不好。可是我老公好像并
不担心，依然过着正常人一日三餐晚睡早起的生活。血糖不好... 阅读全帖 |
|
r****o
发帖数: 105 | 36 你最好做个阴性对照看看那些条带是不是杂蛋白。
我觉得75KD的那条带很有可能只是杂蛋白吧。之所以
你能在WB上看到这条带应该是因为它量太大，二抗
与它有非特异性结合的原因。
糖基化不可能让24KD的SIZE增大那么多，况且
你用的pichia 比较低等，只能加一些最简单的N-LINK
糖基在上面。
BTW：我们实验室也有人做这个系统。也是表达
HUMAN或者MOUSE的蛋白。你们有没有表达什么酶过呢？
如果有活性如何呢？ |
|
f********n
发帖数: 6465 | 37 姓名 谢迎秋 性别 男 出生 年月1971.09
1989.09－1993.07 山东农业大学 作物（师范）专业， 获农学学士学位；
1983.09－1996.07 山东农业大学 植物育种专业， 获农学硕士学位；
1996.09－1999.07 中国科学院遗传所 植物生物技术与基因工程专业，获理学博士学
位；
2000.02－2002.12 美国纽约州卫生研究院，博士后， 研究方向为毒理学，生物代谢
分子生物学，癌症与药物代谢，导师 Dr. Xinxin Ding 教授；
2003.01--至今 美国马里兰大学医学院，博士后副研究员，主要研究方向为药理学，
糖蛋白糖基化,磷酸化修饰与耐药性，蛋白酶抑制剂药物筛选，研发与药理，临床药物
动力学,癌症基因调控 |
|
h**********8
发帖数: 650 | 38 主要研究方向为药理学，
糖蛋白糖基化,磷酸化修饰与耐药性，蛋白酶抑制剂药物筛选，研发与药理，临床药物
动力学,癌症基因调控 ////////
真主 Shen xian!
。x |
|
g*****p
发帖数: 451 | 39 核酸和蛋白质的结合可以用高盐来打开
因为大部分核酸和蛋白结合都是些静电相互作用
所以你在做亲和层析之前可以加上高盐再用柱子纯化
蛋白质纯化了以后一般还是用UV测一下，因为这是检测核酸污染最简单的办法
连跑个琼脂糖胶都没这个简单
毕竟纯化的蛋白有可能有核酸污染，结合脂类
糖基化或是磷酸化
不是说你用个蛋白胶跑跑发现一条带了就叫提纯了的
而且一般来说蛋白质浓度测定用个紫外光吸收是最简单的办法
只要有芳香族氨基酸，就基本可以用这个办法测定
而且理论值一般都还蛮准的，稍微换算一下就行了
况且大部分的人纯化蛋白对蛋白浓度只要有个相对值就可以了
只要不是测定一些酶学实验或是ITC这些常数测定，一般也不需要那么关心到底蛋白浓度
是多少 |
|
s******y
发帖数: 28562 | 40 在我的印象中，在in vitro情况下，在不改变糖基上的结构（就是是否脱氧核糖）的时
候，把U 换成 T 是可以的，大致结构还是能够维持的。
在体内情况下，如果DNA里出现U,会被糖基化酶把那个地方切掉（修复的第一步）。
在RNA 里如果出现T会怎么样？这个我还真的不知道。谁来讲讲？
从生化上来讲，U 不如T 稳定，而且C 有时候会脱氨而变成U, 所以在DNA 里选择用T而
不是U的话有利于在长期储存里保存信息的保真度。不知道这个是否进化压力选择了T作
为DNA单位的原因。 |
|
j*****y
发帖数: 121 | 41 中国生物仿制药的领跑者有中信国健 上海赛金 嘉和生物等，大公司如海正，wuxi
pharma 。。。
中国的生物仿制药目前机会很好，政府大力扶持，但很明显，大部分创业公司都是为了
忽悠钱，能成功的少之又少，估计很多最后要破产或者被大公司并购。
细胞株大部分是从美国购买的。工艺开发是弱势，不过最近从美国大公司回国了一批人
，比如shun luo 等或许能带去一些大公司的核心技术。
质量控制方面，需要提供大量和原研药对比的资料，尤其是糖基化糖型等，怎么说服
sfda。 |
|
m*********3
发帖数: 1425 | 42 刘伯宁
http://blog.sciencenet.cn/home.php?mod=space&uid=454912&do=blog
今年上半年，美国FDA先后批准两种抗体-药物偶联剂（Antibody-drug conjugates，以
下简称ADCs药物）上市，分别为Seattle Genetics公司的Adcetris TM和罗氏公司的
Kadcyla™。与此同时，据《自然·药物发现》杂志统计，2009-2010年共有7种
ADCs药物，2011-2012年至少有17种ADCs药物进入临床研究阶段。目前，在世界范围内
进入临床研究的ADCs药物累计已达三十余种。ADCs候选药物在数量上已经超过同为“改
型抗体”的双特性抗体、抗体片段等类别，成为单克隆抗体药物，尤其是肿瘤治疗用单
抗的研究热点与发展方向。
ADCs药物的概念由来
单克隆抗体用于肿瘤靶向治疗的概念由来已久。一百年多前，德国免疫学家保罗·欧立
希（Paul Ehrlich）最早提出单克隆抗体的“黄金子弹”学说，即：利用单克隆抗体对
抗原的特异性结合实现对癌变细胞的靶向治疗。同时，保罗·欧立希也是临床上化学... 阅读全帖 |
|
m*********3
发帖数: 1425 | 43 刘伯宁
http://blog.sciencenet.cn/home.php?mod=space&uid=454912&do=blog
今年上半年，美国FDA先后批准两种抗体-药物偶联剂（Antibody-drug conjugates，以
下简称ADCs药物）上市，分别为Seattle Genetics公司的Adcetris TM和罗氏公司的
Kadcyla™。与此同时，据《自然·药物发现》杂志统计，2009-2010年共有7种
ADCs药物，2011-2012年至少有17种ADCs药物进入临床研究阶段。目前，在世界范围内
进入临床研究的ADCs药物累计已达三十余种。ADCs候选药物在数量上已经超过同为“改
型抗体”的双特性抗体、抗体片段等类别，成为单克隆抗体药物，尤其是肿瘤治疗用单
抗的研究热点与发展方向。
ADCs药物的概念由来
单克隆抗体用于肿瘤靶向治疗的概念由来已久。一百年多前，德国免疫学家保罗·欧立
希（Paul Ehrlich）最早提出单克隆抗体的“黄金子弹”学说，即：利用单克隆抗体对
抗原的特异性结合实现对癌变细胞的靶向治疗。同时，保罗·欧立希也是临床上化学... 阅读全帖 |
|
e******u
发帖数: 3206 | 44 如一石激起千层浪，颜宁微博上爆料自己三天就发science 引发海内外巨大反响。崇拜
拍手叫好的有，妒忌讥讽者的也有。但事实上隔行如隔山，叫好者和讥讽者可能并不真
正了解对颜宁的工作。那么问题来了，颜宁的工作到底牛不牛？有多牛？颜值到底高不
高？
先要回答的问题是结构生物学到底有多牛？因为颜宁毕竟是做结构的。以最具说服力的
诺贝尔奖为例，百年化学+生理和医学诺奖215项中有13项是结构生物学相关的，占6%[1
]。尤其是其中1962年沃森克里克DNA双螺旋结构的发现，是近代生物学的基础，也是百
年来科学领域最重要的发现之一。再看美国霍华德休斯研究所（HHMI）资助的科学领域
。HHMI是全球最具声望的针对生物和医学的私立基金组织，他们资助的科学家个个含金
量十足。目前有超过300名科学家受到HHMI的资助，而其中40人从事结构生物学相关研
究[2]。抛开这些统计不说，结构是功能的基础，而生物大分子是所有结构中最具挑战
的研究对象，所以结构生物学是化学和生物学共同的追逐对象。科学的赛跑里，在生物
学从化学手里接棒之后，结构生物学就成了化学和生物学的圣杯。结构生物学也是同数
学关系最密切的... 阅读全帖 |
|
y****g
发帖数: 36950 | 45 我是长寿加没有阿兹海默
项目
结果
α-1抗胰蛋白酶缺乏
未携带
胼胝体伴周围神经发育不全
未携带
卡纳万病
未携带
先天性1A型糖基化病
未携带
囊性纤维化
未携带
二氢嘧啶脱氢酶缺乏症
未携带
凝血因子XI缺陷症
未携带
家族性自主神经功能异常
未携带
B型家族性高胆固醇血症
未携带
家族性地中海热
未携带
范可尼贫血
未携带
葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症
未携带
GRACILE综合征
未携带
高雪氏症
未携带
肝糖原贮积症Ib型
未携带
遗传性果糖不能耐受症
未携带
色盲
未携带
肢带型肌营养不良2D型
未携带
中链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症
未携带
IV型粘脂贮积症
未携带
神经元蜡样质脂褐质沉积症
未携带
A型尼曼-匹克病
未携带
甲状腺肿-耳聋综合征
未携带
苯丙酮尿症
未携带
肢近端... 阅读全帖 |
|
发帖数: 1 | 46 王所长的2020 元旦讲话：
玉猪如意乐辞旧，金鼠祥瑞喜迎新。在这辞旧迎新的美好时刻，我谨代表研究所领导班
子成员向全体职工及研究生致以诚挚的问候和美好的祝愿！对大家一年来的辛勤劳动和
默默奉献表示衷心的感谢！向关心和支持研究所发展的各级领导和社会各界朋友致以新
春的祝福！
2019年，武汉病毒所勇挑重担、敢于担当。
统筹协调、重点推进，生物安全大科学研究中心筹建工作取得重要进展。中心第一
届理事会第一次会议在北京召开，国家卫健委、湖北省政府、中科院共建三方形成共识
，联合谋划推动生物安全国家实验室建设。湖北省副省长肖菊华调研武汉病毒所，表示
将全力支持中心建设，进一步争取各方支持，整合资源，积极创建国家实验室。
面向生物安全国家需求，科学研究取得重要进展。在蝙蝠体内新发现一株与埃博拉
病毒同科的丝状病毒；揭示了拉沙病毒囊膜蛋白糖基化修饰的作用机制，为抗病毒药物
的研发提供了候选靶标；筛选得到多种沙粒病毒入侵抑制剂；在病毒动态示踪研究中取
得多项新进展。
【
注：丝状病毒就是RaTG13，2019-nCoV的姐妹
2019-nCoV 结构，“丝状”果然是名不虚传
】
围绕研究所科技发展... 阅读全帖 |
|
发帖数: 1 | 47 瞎话用英文说它还是瞎话
SARS的抗体对SARI无效，这两个S蛋白RBD结构根本不一样
“The Wuhan CoV S-protein and SARS-CoV S-protein shared an almost identical
3-D structure in the RBD domain, thus maintaining similar van der Waals and
electrostatic properties in the interaction interface.”
https://zhuanlan.zhihu.com/p/104854739
整篇文章作者花了半篇内容来证实SARS和SARI病毒的相似性，以及用SARS病毒的抗体来
治疗SARI病毒的合理性，后半篇就是用实验证明SARS的CR3022抗体确实有中和SARI病毒
的作用。但是在这过程中，本来前半篇的预测是SARS和SARI极其相似，但后半篇的实验
结果证明并不是如此，本以为能够结合SARS RBD的很多抗体m396、CR3014都有中和SARI
病毒的作用，实验结果证明并不是如此，所以作者们还... 阅读全帖 |
|
发帖数: 1 | 48 https://zhuanlan.zhihu.com/p/104854739
紧接着作者们表达并纯化出了能够结合SARS RBD并有中和能力的几种抗体，包括m396、
CR3014、CR3022还有一种MERS冠状病毒的抗体。通过ELISA检测这些抗体与新冠RBD结合
的能力（Figure 1e）。他们发现这其中大多数的抗体对新冠RBD并没有明显的结合力。
为了证实这一结果，他们通过BLI实验检测了结合动力，以一个不相关的抗CD40抗体作
为对照。同样，抗体m396——预测能够结合新冠，在高浓度的检测条件下只显示出了很
弱的结合力2uM。研究者们还发现2019新冠的RBD与SARS RBD相比多了几个天冬酰胺残基
。例如，N439残基就在2019新冠RBD的受体结合位点上。这使我们可以猜想可能会发生
天冬酰胺相关的糖基化，使得计算模拟的模型结构远不同于自然结构。后续的研究需要
解决，2019新冠RBD的高分辨率结构，以及这结构为什么不能被这些抗体识别。 |
|
d*********o
发帖数: 6388 | 49 https://www.cell.com/pb-assets/journals/research/cell/Cell_S0092-8674(20)
30262-2.pdf
子陵在听歌
Cell出版社preprint了华盛顿大学Veesler组关于SARS-CoV-2生化特性和结构生物学的
重要文章。这篇文章十分严谨也十分重要，它同时进行了生化功能研究和结构生物学研
究，给出了更高分辨率的S蛋白三聚体两种状态结构。研究反驳了网络传言如“插入论
”。研究发现不具有“插入RRAR”的病毒S蛋白具有更强的细胞结合能力。因此可以推
论，所谓的“人工合成”病毒，其实本身感染细胞的能力更低。而另一方面，它的部分
结论较McLellan组Science文章更有逻辑。
研究首先通过假病毒融合实验，证明了一个重要结论，就是SARS-CoV-2与SARS-CoV具有
几乎相同的Vero E6细胞受体细胞结合能力，这与McLellan组应用SPR得出的结论不同。
而非常有意思的是，该研究设计了一个突变体，Q677TILR SV683，这个突变体敲除了饱
受争议的4个插入氨基酸序列RRAR和furin切割位点。... 阅读全帖 |
|
|
