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发帖数: 30882 | 1 强文：公民的表达——打破僵局的希望 by 郭于华
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楼主
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近年来，如果让人们用具有主观感受色彩的词来形容社会现状，恐怕很多人会说出
“停滞”、“沉闷”、“僵局”之类的词语，进而让我们意识到带有普遍性的“失望”
甚至“绝望”的社会心态。这种感受来自于经济高速增长而人们获得的利益和改善的不
足，也来自于“大国崛起”的声势下个人经济社会地位提升幅度的反差。
社会各阶层的普遍失望表现在各个方面：人们失望于改革带来的经济增长收益分配
不公，造成富者愈富，贫者愈贫，而且强者恒强，弱者恒弱；人们失望于教育、就业、
升迁机会的不平等，竞争成为“拼爹”游戏，以至向上流动愈发困难；人们失望于血与
火的强拆不止，拆掉了房屋财产也拆毁了民心民意；人们失望于特供制度下食品安全问
题长期得不到解决；人们失望于精英大量移民海外，放弃对这块国土的责任义务；人们
失望于各类“美美”毁了慈善、公益事业，并导致社会信任体系崩解；人们失望于高压
维稳下合法的利益诉求无法正当表达；人们失望于红歌高唱却唱不来幸福感和凝聚... 阅读全帖 |
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s**t
发帖数: 17016 | 2 来自主题: LeisureTime版 - 表达的欲望 杰出的艺术，是长出来的，而不是打扮出来的。这生长的动力，来自于艺术家自身的表
达欲望。一流的艺术家，会用他积累的技艺帮助这欲望更顺畅地流泻出来。二流的艺术
家，会用他的技艺来装饰这欲望。三流的艺术家，只有装饰，没有表达欲望。
观摩一件艺术品就是与艺术家一次谈心。如果一个人把自己包得严严实实，并没什么内
心想法要告诉你，他想要证明他如何有魅力，如何会说话，你还会愿意跟这样的人谈心
么？
所以判断一件艺术品，首先要判断的，就是支撑它的表达欲望有多强烈。
表达欲望不强烈，作品就缺少灵魂，这样的作品更接近工艺品，而不是艺术品。
表达欲望不强烈，艺术家便会去掩饰。结果是，最后的成品看起来非常精致，非常有欺
骗性。
杰出的作品，往往有着出奇的坦诚，往往都在偏离美的定义，也正因此逼近了美。
而虚假的作品，表现的更多是姿态，往往都在刻意靠拢美的定义，反而因之背离了美。
缺少经验的观者，容易被虚假的作品迷惑。正如缺少经验的观众，容易被主持人煽动。
实际越是无情的主持人，越喜欢煽情。在人类世界里，充满了欺骗和误导。求真是最难
的事，而努力获得通往求真之路的判断力，则是最迫切需要的。
假的艺术家，喜欢研究大... 阅读全帖 |
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t******n
发帖数: 2939 | 3 ☆─────────────────────────────────────☆
Saob (Saob) 于 (Fri Jan 27 19:44:31 2012, 美东) 提到:
如，中文里“感情”这个词。比如，我们两已经沒有什么感情了。
英语怎么翻？
We have no feeling for each other anymore
We have no love for each other anymore
第一，feeling这个词才粗糙，更本表达不出中文里“感情”这个词的意境。
第二, love是爱情，和感情意思有明显区别。
再比如，什么什么伤害了中国人民的感情。
外交部翻译是 hurt the feelings of the Chinese people. 经常被外国人嘲笑，有一
部分原因是这个feeling, 太粗糙，和原句想表达的意思差了好几个级别。英语这句话
感觉是个幼儿园小孩赌气，说"you hurt my feeling!". 其实这里哪里仅仅是feeling
的意思。
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太多太多中文词汇没有英语可以表达出相同的细腻感。但是，反之则不然。英语里面表
达... 阅读全帖 |
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e*****r
发帖数: 336 | 4 向喜欢的人，向你爱的人表达爱意，你有做到吗？
我没有做到。
怎么说呢？我本来就是一个不是很会表达，比较内敛的一个人，从小到大都很少想
爸爸妈妈说过‘我爱你’这样类似表达爱意的语言，甚至说一些亲昵的举动我做的也不
是很多，可能很小的时候做过，但是渐渐长大那些话语，那些举动在我看来越来越不好
意思去做，其实有时候看着别人家的孩子和爸爸妈妈肆无忌惮的表达爱意的时候我也有
想过自己和父母去表达爱意，奈何，想想太美好，现实很骨感。哈哈!有点说笑了。。
不过真的很难克服自己的心里障碍去放肆表达。
现任男票，老爱问我有没有想她，还会突然然我说句爱他，，，每次他问我：有没
有想我啊？我的回答就是：你猜。之前他还会笑笑的猜，说我想他，后来就让我说实话
，有时候会说恩，想他了，然后感觉特别不好意思，然后立马扯开话题。后来有时候会
回他：想个粑粑啊想。。。，然后他就愣住了，，后来有一次假装生气说： 好吧，挂
电话了啊，没意思，，其实也就那天 我突然意识到，是不是有些东西真的必须要说出
来，任凭让一个人自己去感受，是很难得在大部分情况下。
有时候会觉得自己是闷骚么？嘴上说不出口的... 阅读全帖 |
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s**t
发帖数: 17016 | 5 杰出的艺术，是长出来的，而不是打扮出来的。这生长的动力，来自于艺术家自身的表
达欲望。一流的艺术家，会用他积累的技艺帮助这欲望更顺畅地流泻出来。二流的艺术
家，会用他的技艺来装饰这欲望。三流的艺术家，只有装饰，没有表达欲望。
观摩一件艺术品就是与艺术家一次谈心。如果一个人把自己包得严严实实，并没什么内
心想法要告诉你，他想要证明他如何有魅力，如何会说话，你还会愿意跟这样的人谈心
么？
所以判断一件艺术品，首先要判断的，就是支撑它的表达欲望有多强烈。
表达欲望不强烈，作品就缺少灵魂，这样的作品更接近工艺品，而不是艺术品。
表达欲望不强烈，艺术家便会去掩饰。结果是，最后的成品看起来非常精致，非常有欺
骗性。
杰出的作品，往往有着出奇的坦诚，往往都在偏离美的定义，也正因此逼近了美。
而虚假的作品，表现的更多是姿态，往往都在刻意靠拢美的定义，反而因之背离了美。
缺少经验的观者，容易被虚假的作品迷惑。正如缺少经验的观众，容易被主持人煽动。
实际越是无情的主持人，越喜欢煽情。在人类世界里，充满了欺骗和误导。求真是最难
的事，而努力获得通往求真之路的判断力，则是最迫切需要的。
假的艺术家，喜欢研究大... 阅读全帖 |
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z********2
发帖数: 6488 | 6 【 以下文字转载自 LeisureTime 讨论区 】
发信人: shot (野水横木), 信区: LeisureTime
标 题: 表达的欲望
发信站: BBS 未名空间站 (Thu Apr 25 13:29:29 2013, 美东)
杰出的艺术，是长出来的，而不是打扮出来的。这生长的动力，来自于艺术家自身的表
达欲望。一流的艺术家，会用他积累的技艺帮助这欲望更顺畅地流泻出来。二流的艺术
家，会用他的技艺来装饰这欲望。三流的艺术家，只有装饰，没有表达欲望。
观摩一件艺术品就是与艺术家一次谈心。如果一个人把自己包得严严实实，并没什么内
心想法要告诉你，他想要证明他如何有魅力，如何会说话，你还会愿意跟这样的人谈心
么？
所以判断一件艺术品，首先要判断的，就是支撑它的表达欲望有多强烈。
表达欲望不强烈，作品就缺少灵魂，这样的作品更接近工艺品，而不是艺术品。
表达欲望不强烈，艺术家便会去掩饰。结果是，最后的成品看起来非常精致，非常有欺
骗性。
杰出的作品，往往有着出奇的坦诚，往往都在偏离美的定义，也正因此逼近了美。
而虚假的作品，表现的更多是姿态，往往都在刻意靠拢美的定义，反而因之背离了美... 阅读全帖 |
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t********r
发帖数: 4908 | 7 ☆─────────────────────────────────────☆
brooks (橙蓝) 于 (Tue Mar 2 09:52:45 2010, 美东) 提到:
昨天又受刺激了, 对门的小男孩和咱儿子一般大, 上同一家学校, 人家美国父母还没有
花啥心思推儿子, 到现在学校要求读的100本书好不容易读了50本, 咱儿子100本书都读
完了.
昨天小男孩来我家玩, Andy刚读完一本叫"Grandpa Toad's secret"的书, 是和我一起
读的,
中间我帮忙不少. 小男孩自己很顺利就读完了, 我还问人家"What does this book
talk about?" 小男孩立马就绘声绘色地开始review了, 语言组织能力之强, 和美国人
做presentation 一样, 1,2,3, 转折衔接很自然,三言两语就把故事给review完了, 又
生动又简练还突出了重点.
再瞧瞧自家儿子,无论是用中文还是用英文, 都是啃吃啃吃, 里面无数个然后或者and
then,
又臭又长, 人物背景通通模糊, 听得人稀里糊涂. 这差的可不是一点半点啊.
你说人天生... 阅读全帖 |
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b*****d
发帖数: 61690 | 8 人民日报：保障公民表达权促进决策民主化
http://www.sina.com.cn 2011年11月16日03:41 人民网-人民日报
让公民“说话”更畅通(加强和创新社会管理系列报道⑦)
张洋
□政府应尊重公民说话的权利，让公民在表达和参与中实现其利益诉求，让接受监
督成为政府的一种习惯
公民对公共事务充分、自由地表达意见，是民主政治的本质要求，不但是国家政治
文明的体现，也是社会包容的标志。十七大对“表达权”的强调，有力地证明了中国社
会的政治进步和政治文明。
保障公民的表达权是促进决策科学化、民主化的有效途径。吉林省“百姓说事点”
提供了公民表达的渠道，允许公民自由地表达意见，确保广泛的信息网络畅通，减少决
策失误的风险，尽可能地保证了政府作为的确是群众所需。
推进公民的表达权是增强政府开放度、透明度的重要举措。如何制约权力，如何有
效地监督政府是现代社会的重大课题。“同样的群体，同样的问题，解决的途径不同，
结果完全不一样。”“百姓说事点”充分证明，以社会制约权力能够有效防止权力的异
化。政府应尊重公民说话的权利，让公民在表达和参与中实现其利益诉求，让接受监督
成为政府的... 阅读全帖 |
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b*****d
发帖数: 61690 | 9 张玉珂：日本需正视中国民间的情绪表达
2012年08月28日11:49 人民网 微博
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张玉珂
有消息说，8月27日下午，日本驻华大使坐车上悬挂的日本国旗被抢走。中国外交
部发言人办公室晚间回应称，中方有关部门正在对此进行认真调查。中国政府一贯认真
履行《维也纳外交关系公约》，保护外国驻华使馆和人员的安全。
近段时期来，日本方面连连发难，钓鱼岛问题持续发酵。期间，中国多地发生涉日
游行活动，互联网上对日方的抗议声也不绝入耳。尽管这次日本驻华大使座驾风波尚在
进一步调查中，但有一点不容否认的是，日本方面必须正视来自中国民间的情绪表达，
勿在钓鱼岛议题上频挑事端，伤害中国政府和民众的感情。
历史问题和领土问题，是中日关系的两个敏感点。从近几年由此引发的比较突出的
涉日事件来看，中国内部一直存在着多元化的表达方式和渠道。这既有来自中国政府的
立场坚定与真诚克制，希冀通过对话谈判妥善解决问题；又有来自中国民间的呼声呐喊
和直接行动，以自发的公民表达来宣示国民态度。这些多元化的表达殊途同归，那就是
原则问题不容让步，在历史问题上严正拒绝日本混淆视听，在领土问题上坚决捍卫中国... 阅读全帖 |
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j*******7
发帖数: 6300 | 10 信仰自由与信仰表达自由——为网上宗教信仰者辩护
羽毛乱飞
2005-3-22 关天茶舍
《中华人民共和国宪法》第三十五条：中华人民共和国公民有言论、出版、集会、结社
、游行、示威的自由。
《中华人民共和国立法法》第七十八条：宪法具有最高的法律效力，一切法律、行政法
规、地方性法规、自治条例和单行条例、规章都不得同宪法相抵触。
一直以来，天涯社区对于包括基督徒在内的一些宗教信仰者张贴的网络文章采取了比较
严格对待的态度。不管是记叙自身信仰生活的经历和感想，是明确阐述和宣扬自己宗教
信仰，是进行神学或哲学方面的学术性探讨还是对宗教现象进行经济，社会，文化研究
，不少涉及宗教和信仰内容的帖子被封杀删除，理由是“非宗教场所进行传教属于违法
行为”，故而应予以取缔。这个观点值得怀疑与商榷。
正如我国政府所反复强调的，中国是一个有宗教信仰自由的国家。中国的法律明文保护
中国公民的宗教信仰自由和合法合理范围内的宗教活动。同时，中国的《宪法》明确宣
布中国公民有言论自由。中国公民同时在信仰和信仰表达上拥有法律明文赋予的自由。
根据我国《宪法》和国务院《宗教事务条例》的内容，我们有理由认为，目前各个地... 阅读全帖 |
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b*****d
发帖数: 61690 | 11 人民网：依法理性表达爱国热情
http://www.sina.com.cn 2010年10月24日16:56 人民网
郭馨
中国个别城市近日发生了涉日游行。部分群众对前一阶段日本一些人士的错误言行
表达义愤，表达爱国热情，是完全可以理解的；但正如中国外交部发言人几天前表态时
所指出的那样，“我们主张，应当依法、理性表达爱国热情，对非理性、违反法规的行
为是不赞成的。相信广大群众一定会把爱国热情转化为做好本职工作的实际行动，维护
好改革、发展、稳定大局。”这几句话，虽然简短，但说到了点子上，值得大家深思。
在对日问题上，中国政府一向是立场鲜明的。近期沸沸扬扬的“钓鱼岛事件”，中
方就明确指出，“钓鱼岛及其附属岛屿自古以来就是中国的固有领土，中国对此拥有无
可争辩的主权”，日本国内一些人企图通过此类问题“损害中国领土主权，破坏中日关
系，他们的图谋是不会得逞的”。中方也一再表示了发展中日关系、解决中日问题的诚
意，“中日两国互为近邻，坚持发展战略互惠关系的方向，符合两国人民的根本利益。
双方应通过对话协商解决中日关系中的问题，维护两国关系大局。”中国政府的严正立
场维护了国家利益和尊严... 阅读全帖 |
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T*******e
发帖数: 6425 | 12 中国个别城市近日发生了涉日游行。部分群众对前一阶段日本一些人士的错误言行表达
义愤，表达爱国热情，是完全可以理解的；但正如中国外交部发言人几天前表态时所指
出的那样，“我们主张，应当依法、理性表达爱国热情，对非理性、违反法规的行为是
不赞成的。相信广大群众一定会把爱国热情转化为做好本职工作的实际行动，维护好改
革、发展、稳定大局。”这几句话，虽然简短，但说到了点子上，值得大家深思。
在对日问题上，中国政府一向是立场鲜明的。近期沸沸扬扬的“钓鱼岛事件”，中
方就明确指出，“钓鱼岛及其附属岛屿自古以来就是中国的固有领土，中国对此拥有无
可争辩的主权”，日本国内一些人企图通过此类问题“损害中国领土主权，破坏中日关
系，他们的图谋是不会得逞的”。中方也一再表示了发展中日关系、解决中日问题的诚
意，“中日两国互为近邻，坚持发展战略互惠关系的方向，符合两国人民的根本利益。
双方应通过对话协商解决中日关系中的问题，维护两国关系大局。”中国政府的严正立
场维护了国家利益和尊严，表达了中国人民的心声，是掷地有声、毋庸置疑的。然而，
总有一些别有用心的日本人士喜欢撩拨中国人民的神经，寻衅滋事扩大事态，破坏... 阅读全帖 |
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g**1
发帖数: 10330 | 13 中国女人越来越不守妇道？欲望的表达太过出挑
2015年11月22日 08:45
来源：中国青年报
55人参与 3评论
导语：这几年最常听到的关于女性的风评是：“越来越不守妇道”。但稍微深入追问一
下，所谓不守妇道的女人都坏在哪里？得到的答案如出一辙：她们抽烟喝酒、穿着暴露
、出没夜店、夜不归宿，在社交网络上勾三搭四。
女人正在越变越“坏”
如果换成男性，这些行径简直再普通不过，绝不会成为判断好坏的标准，但社会对女性
，永远要苛刻一点。所以，不是女人普遍变坏了，而是女人有机会表现出自己正常的欲
望，而这种表达还没得到普遍的接受，于是显得格外出挑。
“坏女人”的“坏”，在不同的时间地点有不同的标准，“坏”的门槛，有高有低。《
诗经》的时代，是天真未泯的时代，各种束缚还没来，欲望表达是正常的，男人女人桑
间相会水边相望，也照样被歌咏。所以曾园老师说，所谓“思无邪”，并不是那个时代
格外庄重，而是人们根本没有“邪”的概念，压根儿没觉着那有什么不好。
而后风声渐紧，各种严苛的约束被加上来了。《聊斋志异》里，就有大量风评不佳的女
人，出身不好、性格过于活泼、与一个以上的男性有过深入交往，都会被贴上... 阅读全帖 |
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s*l
发帖数: 9421 | 14 《表达》
世上似乎每样东西都在表达自己，无论活的死的、大的小的、孤独与否，都竭力地想把
自己潜在的意愿表达出来。
你看那棵盛开在春天里的白玉兰，竟能将一粒小小的种子演绎得如此神奇；那死亡
谷烈日下可怜的丁点般大的花儿，宁愿失掉全部叶子也要孤零零地把花呈现在你眼前；
还有大地上的芸芸众生，都在用不同的方式表达着，向世界展示着自己独有的存在。哪
怕只是一块冰冷的石头，也在默默中表达着的坚毅。活着的正在表达，没有生命的表达
早已经完成，他们似乎都只为表达而生无法被阻止，想要对它的世界有个交代。
存在的本身就是一种表达，如果你相信这个世界的背后具有某种意志。也许物
质是由神的无情意志化作，而生命则是他有情意愿的体现。就像开在树梢上的白玉兰，
人类正好处在宇宙里所有表达的顶端。 |
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A***g
发帖数: 191 | 15 做了二十多个基因在十几个不同的人的细胞系中的表达量实验。
用的是qPCR方法。我的做法是，以cDNA为模板，以GAPDH为internal control，做看家
基因的模板多稀释20倍。
结果分析呢，我用的是 2-△△CT Method，设定某个基因在某个细胞系中的表达量为1
（这个细胞系也就是我设定的对照），那该基因在不同细胞系中的表达量就都是相对这
个细胞系而言，这样得出来的结果是relative expression level.
可是老板要的结果是最好能一目了然能看清不同基因在同一细胞系中的表达量变化，同
时也能兼顾在其它细胞系中的表达量变化。她说我给她的结果很容易让人误解。因为每
个基因都有一个细胞系为1，看上去好像这两个基因表达量一样似的。
我用的这个公式应该不能够比较不同基因的表达量吧？
同时我为了结果好看，基本上都是选择表达量比较低的细胞系为1，这样有的表达量高
的数值就很大，我老板就以为这个数字这么打是不是表达量很高很高啊？
我家老板要达到的这个目的要怎么分析呢？有没有相关文献啊？ |
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q*p
发帖数: 963 | 16 导语：这几年最常听到的关于女性的风评是：“越来越不守妇道”。但稍微深入追问一
下，所谓不守妇道的女人都坏在哪里？得到的答案如出一辙：她们抽烟喝酒、穿着暴露
、出没夜店、夜不归宿，在社交网络上勾三搭四。
女人正在越变越“坏”
如果换成男性，这些行径简直再普通不过，绝不会成为判断好坏的标准，但社会对女性
，永远要苛刻一点。所以，不是女人普遍变坏了，而是女人有机会表现出自己正常的欲
望，而这种表达还没得到普遍的接受，于是显得格外出挑。
“坏女人”的“坏”，在不同的时间地点有不同的标准，“坏”的门槛，有高有低。《
诗经》的时代，是天真未泯的时代，各种束缚还没来，欲望表达是正常的，男人女人桑
间相会水边相望，也照样被歌咏。所以曾园老师说，所谓“思无邪”，并不是那个时代
格外庄重，而是人们根本没有“邪”的概念，压根儿没觉着那有什么不好。
而后风声渐紧，各种严苛的约束被加上来了。《聊斋志异》里，就有大量风评不佳的女
人，出身不好、性格过于活泼、与一个以上的男性有过深入交往，都会被贴上“坏”的
标签。这种标准，直到近代还管用，脚缠得不好，不受婆婆待见，也是坏女人。电影《
一代宗师》里，叶问带着妻子张永... 阅读全帖 |
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R***0
发帖数: 2 | 17 这个问题，比较复杂，我觉得，要看是否严重，如果你觉得很严重的话，应该去看专家
，这个很重要，不要耽误。
如果你觉得孩子基本正常，那你需要具体分析。
孩子是否可以清楚表达思想，就是说，他想表达什么就可以表达清楚，这个判断很重要
，如果孩子可以清楚表达自己的思想，那就是不愿意表达，这就需要你不断的鼓励，我
知道华人的孩子或多或少的有这个问题，关键是朋友太少，你可以鼓励他多和朋友玩，
时间长了，会有改变的。
如果是表达不清楚，这是另外一个问题，是英语的问题，由于表达不清楚，和朋友的交
流有问题，朋友就不愿意和你的孩子交流，时间长了，你孩子也不愿意交流了。我的同
事的孩子就是这样的，不过他的孩子小些，不到7岁，是老师发现的，老师告诉了家长
，要家长注意。并指出孩子的主要问题是很多单词的表达不准确，导致很多误会。建议
是多看电影，多读书，多查字典等等。后来，我的同事，在一年时间内，每周看2次电
影，1次图书馆，购买了大量的学习工具，包括，团购比较火的Raz kids，Wordly Wise
3000 online等等。现在基本正常了。 |
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发帖数: 1 | 18 Q：逻辑表达能力弱的表现是什么？
A：第一，掌握的词汇量过少。第二，句式表达简单。第三，缺乏连词的使用。第四，
缺乏主谓宾语。第五，句子表达顺序颠倒。
Q：词汇量少？我每次跟孩子出去玩都会告诉孩子这是什么，那是什么，可是孩子在表
达中还是很单调，那可怎么办？
A：家长先不用担心，这种情况在我们中心也比较常见。首先，要给孩子一个安静的时
间，先让他仔细观察一下周围环境的事物。接着，一边引导孩子看一边用简单易懂的表
达向孩子阐述，例如：“香蕉”（同时指一指香蕉）。最后，当孩子掌握了一定的名词
之后，可加入动名词配对的练习，其中注意首先要从实物开始引导，例如拿勺子引导表
达吃饭、拿杯子引导表达喝水，还可以结合一些趣味性的游戏、有声影像、电子游戏、
角色扮演等进行相关配对以及短句、问句的练习引导。同样地，概念的教学也是要先从
实物着手，例如教颜色，要先让孩子学会归类，把不同的颜色分类，接着进行颜色配对
，最后让孩子从几个颜色中选取目标颜色。
Q：我家孩子表达都非常简短单一，说得长一点的时候顺序就颠倒，逻辑非常混乱，这
该怎么办啊？
A：学龄前儿童的思维特点是具体形象性，抽象逻辑思维还处于萌芽状... 阅读全帖 |
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发帖数: 1 | 19 总被人问到：“为什么会回国？”
担心孩子变成香蕉人、找不到根是一个原因，其实还有一个很“狭隘”的私人原因：那
就是，万一我儿子将来酷爱思考（cheng ming cheng jia），他的语言驾驭能力制约了
他的思维深度了怎么办？听起来很玄乎是不是？且听我慢慢道来。
关键字
强势母语
儿子出生在柏林，一岁以后我们到了德国西部一座非常富庶、安逸并且没有排外倾向的
城市工作。我们全家对这座城市的喜爱完全超出了我们的预料，再加上工作的稳定及优
厚待遇使我们几乎不愿设想放弃它的可能性。也就在这时，一位曾在洪堡大学读博士并
教授中文的教授来我家做客，看着我家刚会走路还不会说话的儿子问我：“你想好了吗
，给他哪门语言做母语？”我很疑惑地问：“这还用选吗？家里说中文，外面说德语，
这不是我们梦寐以求的双语都进入母语区吗？”
于是，教授不紧不慢地为我讲述了她接手过的一个学生的故事：
凯（化名）的父亲和母亲都来自农村，不同的是父亲是个理科高材生，母亲却没多少文
化。在凯两岁左右的语言敏感期，一家人随父亲到日本留学读研究生，于是凯被送进了
日本幼儿园，在家里虽然父母也会和他说说中文，但由于母亲的不善言辞、... 阅读全帖 |
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o**********e
发帖数: 18403 | 20 【 以下文字转载自 Military 讨论区 】
发信人: gc01 (gc01), 信区: Military
标 题: 习近平、央视春晚向台湾地震受灾同胞表达慰问zt
发信站: BBS 未名空间站 (Sun Feb 7 10:31:15 2016, 美东)
习近平、央视春晚向台湾地震受灾同胞表达慰问
发表时间：2016-02-07 20:42:36
字号：A-AA+
关键字: 习近平向台湾受灾同胞表达慰问
今天是农历除夕，昨天（2月6日）凌晨台湾南部发生强烈地震，造成人员伤亡和财产损
失。
据新华社7日消息，中共中央总书记习近平对台湾南部地区发生6.7级地震高度关注，对
受灾同胞表示慰问。
习近平指出：6日凌晨，台湾南部地区发生6.7级地震，造成台湾同胞生命财产的重大损
失。我们对灾情表示高度关切，对受灾的台湾同胞表示亲切慰问，对不幸遇难的台湾同
胞表示沉痛哀悼。两岸同胞是血浓于水的一家人，愿意提供各方面的援助。
今晚的央视猴年春节联欢晚会也向台湾地震受灾同胞表达慰问。
昨天的中共中央国务院春节团拜会上，李克强总理表示，这一年，我们也共同经历了一
些重大自然灾害和公共安全事件。这... 阅读全帖 |
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o**********e
发帖数: 18403 | 21 【 以下文字转载自 Military 讨论区 】
发信人: gc01 (gc01), 信区: Military
标 题: 习近平、央视春晚向台湾地震受灾同胞表达慰问zt
发信站: BBS 未名空间站 (Sun Feb 7 10:31:15 2016, 美东)
习近平、央视春晚向台湾地震受灾同胞表达慰问
发表时间：2016-02-07 20:42:36
字号：A-AA+
关键字: 习近平向台湾受灾同胞表达慰问
今天是农历除夕，昨天（2月6日）凌晨台湾南部发生强烈地震，造成人员伤亡和财产损
失。
据新华社7日消息，中共中央总书记习近平对台湾南部地区发生6.7级地震高度关注，对
受灾同胞表示慰问。
习近平指出：6日凌晨，台湾南部地区发生6.7级地震，造成台湾同胞生命财产的重大损
失。我们对灾情表示高度关切，对受灾的台湾同胞表示亲切慰问，对不幸遇难的台湾同
胞表示沉痛哀悼。两岸同胞是血浓于水的一家人，愿意提供各方面的援助。
今晚的央视猴年春节联欢晚会也向台湾地震受灾同胞表达慰问。
昨天的中共中央国务院春节团拜会上，李克强总理表示，这一年，我们也共同经历了一
些重大自然灾害和公共安全事件。这... 阅读全帖 |
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发帖数: 18403 | 22 【 以下文字转载自 Military 讨论区 】
发信人: gc01 (gc01), 信区: Military
标 题: 习近平、央视春晚向台湾地震受灾同胞表达慰问zt
发信站: BBS 未名空间站 (Sun Feb 7 10:31:15 2016, 美东)
习近平、央视春晚向台湾地震受灾同胞表达慰问
发表时间：2016-02-07 20:42:36
字号：A-AA+
关键字: 习近平向台湾受灾同胞表达慰问
今天是农历除夕，昨天（2月6日）凌晨台湾南部发生强烈地震，造成人员伤亡和财产损
失。
据新华社7日消息，中共中央总书记习近平对台湾南部地区发生6.7级地震高度关注，对
受灾同胞表示慰问。
习近平指出：6日凌晨，台湾南部地区发生6.7级地震，造成台湾同胞生命财产的重大损
失。我们对灾情表示高度关切，对受灾的台湾同胞表示亲切慰问，对不幸遇难的台湾同
胞表示沉痛哀悼。两岸同胞是血浓于水的一家人，愿意提供各方面的援助。
今晚的央视猴年春节联欢晚会也向台湾地震受灾同胞表达慰问。
昨天的中共中央国务院春节团拜会上，李克强总理表示，这一年，我们也共同经历了一
些重大自然灾害和公共安全事件。这... 阅读全帖 |
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l*********g
发帖数: 41 | 23 我这个蛋白大概60多kd，在pet29a上表达还可以。现在我在大概22-23aa那里突变出了
个bamhi位点，然后呢插进去一个15aa的avi-tag，策序什么的都正确，可是表达和纯化
出了问题。
在BLR（DE3）里面表达，只有一次纯化到了我的蛋白，后来就是重复不出来，至少有四
五次了，我检查诱导前后的带，也没有发现明显的表达带，但是即使在我纯化到了蛋白
那次也没有看到明显表达带。我怀疑质粒丢失，但是在overnight培养后也提到了
plasmid，现在真的找不到什么原因了。 以前大概相似蛋白在同样载体上，随便一表达
，至少可以看到一条表达的带，但是现在什么也没有了。我在想即使蛋白折叠不好，但
是至少肽链在那里，电泳也应该看到的，除非它被彻底讲解了，真是郁闷啊。请高手指
点！！ |
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m*********r
发帖数: 49 | 24 问题有点长：
我想要过表达一个来源于果蝇的蛋白，最终希望得到比较大量的这种蛋白，纯化之后做
与其他蛋白相互作用的生化实验。
问题是，这个蛋白的活性需要翻译后甲基化修饰，但是真核表达效率高的Sf9-
baculovirus系统没有这种酶，现在选择用有甲基化修饰酶的S2细胞系来表达。
如今已经建立了表达这种蛋白的稳定S2细胞系，表达并用His-tag纯化了几次，得到的
杂蛋白很多目标蛋白量很少，试着优化纯化洗脱的条件也帮助不大，目前我认为表达量
太低是主要原因。如果要在his-tag之后再做第二轮纯化，我怕少得可怜的蛋白经不起
损失了。
大家有什么推荐的解决方法么？如果要换个表达系统的话，有什么比较好的替代的吗？
还有我现在这个蛋白是由metallothionine的Promoter来启动（就是被Cu2+驱动的那个)
，这个启动子效率好像本来就是低，可是这个质粒是别的实验室建立的，我就拿来直
接用了，当初嫌麻烦也就没想着要换个启动子什么的。 |
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o**********e
发帖数: 18403 | 25 【 以下文字转载自 Military 讨论区 】
发信人: gc01 (gc01), 信区: Military
标 题: 习近平、央视春晚向台湾地震受灾同胞表达慰问zt
发信站: BBS 未名空间站 (Sun Feb 7 10:31:15 2016, 美东)
习近平、央视春晚向台湾地震受灾同胞表达慰问
发表时间：2016-02-07 20:42:36
字号：A-AA+
关键字: 习近平向台湾受灾同胞表达慰问
今天是农历除夕，昨天（2月6日）凌晨台湾南部发生强烈地震，造成人员伤亡和财产损
失。
据新华社7日消息，中共中央总书记习近平对台湾南部地区发生6.7级地震高度关注，对
受灾同胞表示慰问。
习近平指出：6日凌晨，台湾南部地区发生6.7级地震，造成台湾同胞生命财产的重大损
失。我们对灾情表示高度关切，对受灾的台湾同胞表示亲切慰问，对不幸遇难的台湾同
胞表示沉痛哀悼。两岸同胞是血浓于水的一家人，愿意提供各方面的援助。
今晚的央视猴年春节联欢晚会也向台湾地震受灾同胞表达慰问。
昨天的中共中央国务院春节团拜会上，李克强总理表示，这一年，我们也共同经历了一
些重大自然灾害和公共安全事件。这... 阅读全帖 |
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c***s
发帖数: 70028 | 26 一项新研究破译出黑猩猩的身体语言，比如它们可以用手势来表达“跟我来”、“住手”或“拿着这个”等意思。
先前的研究已经揭示，这种与人类基因最接近的亲缘动物使用姿势交流。这样就提出一个问题：黑猩猩的交流方式是否与人类语言起源相同。
3日发表于美国《当代生物学》半月刊的新研究结果是，首次创建黑猩猩姿势类别字典，解释黑猩猩彼此在“说”什么。
在研究人员破译的66种黑猩猩姿势中，有些可以孤立使用，有些甚至可以组合起来，创造更为复杂的交流。重要的是，无论是哪只黑猩猩使用这种姿势，表达的意思都保持一致。
来自英国苏格兰的圣安德鲁斯大学研究人员说，黑猩猩传递的信息包括通过组合简单少数姿势表达简单诉求，也有组合更广泛姿势而表达更多社交信息。
研究人员2007年至2009年间在乌干达拍摄了黑猩猩的3400次交流，对其中超过4500种姿势进行研究。
经破译，研究人员确定，当一名母猩猩向它的孩子伸出一只脚，其意思是“爬到我身上”;一只猩猩触摸另一只猩猩的胳膊，意思是“给我挠挠”;而咀嚼树叶，则是要引起异性关注。
研究人员说，他们的观察解释一些姿势和结果之间的明确联系，比如咀嚼树叶有诱惑意
味。但有些动作表达不... 阅读全帖 |
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d**********i
发帖数: 2036 | 27 要让人民充分表达爱国热情》
日期：2012-09-18 来源：人民日报
近日，日本政府不顾中国政府和中国人民的强烈反对和抗议，宣布“购买”钓
鱼岛及其附属岛屿，完成所谓“国有化”手续。这种罔顾历史和现实的非法“购岛”行
径，是对国际公约和人类反法西斯胜利成果的公然背弃，是对来之不易的中日友好关系
的再次践踏。
针对日方的恣意妄为，中国政府依照国际法和国际惯例，理直气壮展开了维护
国家领土主权完整的各项反制措施：发表外交声明，公布中国钓鱼岛及其附属岛屿的领
海基线，派出海监船舶编队开展维权巡航执法，驳回日本方面无理抗议，向各国驻华使
节作专门通报，向联合国提交中国钓鱼岛及其附属岛屿领海基点基线坐标表和海图，向
大陆架界限委员会提交东海部分海域200海里以外大陆架划界案。这一系列有理有利有
节的行动，既体现了泱泱大国的成熟理性，更彰显了保卫领土、捍卫主权永不动摇、绝
不手软的决心。这些措施重创了日本将钓鱼岛主权问题固化的企图，赢得了国际社会的
尊重与认同。
连日来，不少地方的群众尤其是青年人自发走上街头，抗议日本政府非法“购
岛”行径，表达... 阅读全帖 |
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g**1
发帖数: 10330 | 28 习近平、央视春晚向台湾地震受灾同胞表达慰问
发表时间：2016-02-07 20:42:36
字号：A-AA+
关键字: 习近平向台湾受灾同胞表达慰问
今天是农历除夕，昨天（2月6日）凌晨台湾南部发生强烈地震，造成人员伤亡和财产损
失。
据新华社7日消息，中共中央总书记习近平对台湾南部地区发生6.7级地震高度关注，对
受灾同胞表示慰问。
习近平指出：6日凌晨，台湾南部地区发生6.7级地震，造成台湾同胞生命财产的重大损
失。我们对灾情表示高度关切，对受灾的台湾同胞表示亲切慰问，对不幸遇难的台湾同
胞表示沉痛哀悼。两岸同胞是血浓于水的一家人，愿意提供各方面的援助。
今晚的央视猴年春节联欢晚会也向台湾地震受灾同胞表达慰问。
昨天的中共中央国务院春节团拜会上，李克强总理表示，这一年，我们也共同经历了一
些重大自然灾害和公共安全事件。这些不幸磨难把我们的心连得更紧，也警醒我们必须
时刻把人民群众的安危顶在头上。今天凌晨，台湾高雄发生6.7级强烈地震，在此我们
向台湾同胞表示深切的慰问。
点击查看大图
2016年2月3日，习近平在南昌市东湖区彭家桥街道光明社区书画室，接过一位小朋友现
场书写的 “... 阅读全帖 |
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b****a
发帖数: 4465 | 29 “两岸和平发展论坛”（“国共论坛”）与“习洪会”十一月初就要登场了，然而国民
党内部对“一中各表”还是“一中同表”的问题，仍争论不休。国民党主席洪秀柱曾试
图删去“一中各表”，此事让国民党党团对她此次赴陆参加论坛“不放心”。
据台湾“中央社”10月19日报道，26名国民党“立委”18日与国民党主席洪秀柱会面座
谈，国民党党团建议洪秀柱在“习洪会”及国共论坛中要表达“一中各表”，并强调“
中华民国”，也希望在洪秀柱赴陆前再次与“立委”见面。另据与会者转述，洪秀柱表
示“总统大选”后就从未讲过“一中同表”，这次赴陆也不会再讲；但她强调，就算不
选党主席，该走的路还是要走，办论坛不只为国民党，是为台湾人民找出路，党的责任
是引领民意，不是随波逐流。
18日下午，26名国民党“立委”与洪秀柱会面两小时，国民党党团总召廖国栋在会后转
述，除建议洪秀柱表达“一中各表”外，有“蓝委”要求进一步表达“中华民国”，让
习近平总书记更能体会台湾民众最卑微也是最严肃的要求。
有媒体问及洪秀柱是否都答应了这些要求，廖国栋表示，洪秀柱都做了清楚回复，对话
之后，党团干部将开党团大会，整理当天谈话内容，声明稿要等... 阅读全帖 |
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J*G
发帖数: 6489 | 30 发信人: bridged (断桥：向100在线努力，有事写信), 信区: triangle
标 题: 王四新：民主，为什么离不开表达自由?
发信站: 一路BBS (Wed May 6 13:53:14 2009), 本站(yilubbs.com)
王四新 中国传媒大学 副教授
什么是表达自由，从最基本的含义上来讲，比如按照国际人权条约确立的标准，就是
任何人都有持有意见的自由，和使用书面的或口头的或任何他所喜欢的方式，不分国界
地寻求、接受和传递各种信息和思想的自由。
如果没有正当的理由，比如公共安全、保护他人名誉和隐私或为了公共的卫生和道
德，和合法的依据及合理的方式、方法，政府不得限制表达自由。此外，当私主体的行
为构成对信息自由流动和表达自由的侵犯时，政府也有义务予以干涉。
民主离不开表达自由，信息能否自由流动以及公民能否充分地享有表达自由，是民
主政治得以开展的前提，也是衡量政府是否是民主政府的标尺。
政府如果是民主的，就需要市民感受到政府是他们自己的，是代表他们的，要做到
这一点，政府就必须让市民们感受到政府随时倾听着市民的声音，随时以各种各样的方 |
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e*********0
发帖数: 79 | 31 蛋白表达服务/蛋白质工程项目负责人员
岗位职责：
1.从事蛋白表达服务和蛋白质工程相关业务，负责蛋白业务的销售和市场开发，开拓.
发展和维护海外客户；
2.为客户提供产品. 技术. 咨询等服务；
3.负责项目跟踪和技术支持。
职位要求：
1. 本科以上学历，熟悉蛋白质表达纯化. 蛋白发酵工艺流程及技术；
2. 具备扎实的理论基础；思路清晰，有一定的开拓创新能力；能够独立设计与开展相
关研究项目；
3. 工作认真负责，有敬业精神和团队协作精神，具有一定的抗压能力；
4. 熟悉行业海外市场状况，有海外市场开拓或海外市场销售经验优先；
5. 英语六级水平以上，能够熟练进行英语交流和报告写作，能以英语作为工作语言与
国外客户进行无障碍交流；
6. 具备较强的客户开发能力，具有出色的谈判能力. 说服力，亲和力强，善于与不同
国家与地域的客户沟通，有工作责任心和服务意识。
北京安必奇生物科技有限公司是由一批资深留学归国人员创办的抗体研发服务公司。公
司依托深厚的国际资源背景、经验丰富的留美科研人员致力于优质抗体研发服务。公司
现有服务内容主要包括应用杂交瘤技术生产单克隆抗体、利用噬菌体展示技术筛选... 阅读全帖 |
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O**l
发帖数: 12923 | 32 2012-09-18 04:01:20 来源: 人民日报 有6191人参与
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原标题：文明理性展现中国力量
近日，日本政府不顾中国政府和中国人民的强烈反对和抗议，宣布“购买”钓鱼岛及其
附属岛屿，完成所谓“国有化”手续。这种罔顾历史和现实的非法“购岛”行径，是对
国际公约和人类反法西斯胜利成果的公然背弃，是对来之不易的中日友好关系的再次践
踏。
针对日方的恣意妄为，中国政府依照国际法和国际惯例，理直气壮展开了维护国家领土
主权完整的各项反制措施：发表外交声明，公布中国钓鱼岛及其附属岛屿的领海基线，
派出海监船舶编队开展维权巡航执法，驳回日本方面无理抗议，向各国驻华使节作专门
通报，向联合国提交中国钓鱼岛及其附属岛屿领海基点基线坐标表和海图，向大陆架界
限委员会提交东海部分海域200海里以外大陆架划界案。这一系列有理有利有节的行动
，既体现了泱泱大国的成熟理性，更彰显了保卫领土、捍卫主权永不动摇、绝不手软的
决心。这些措施重创了日本将钓鱼岛主权问题固化的企图，赢得了国际社会的尊重与认
同。
连日来，不少地方的群众尤其是青年人自发走上街头，抗议日本政府非法“购岛”行径
，表达了中国人民... 阅读全帖 |
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j*********n
发帖数: 168 | 33 我以为2、3楼朋友说的策略不见得有效。也很难找到可以结合后保护断裂位点的合适蛋
白，共转什么的，也很麻烦。我们实验室也用过类似的办法，不太奏效。
我觉得可行的一是你看一下大概什么位置断掉的，突变一下相应的氨基酸；二是可以换
其他的表达系统，就是不用细菌的，比如昆虫细胞。
如果一定要获得全长表达的蛋白，再完成后续研究，有时是很困难的。
你在大量表达前没有做小的test么？什么时候降解的，应该是可以在test里看出的啊。
如果test的时候就得不到全长表达的蛋白，还做后面的大量表达有什么意义呢？呵呵……
即便是在大量表达，你的裂解样品，过柱液，清洗液，洗脱液，纯化后的，都跑SDS-
PAGE了么？从开始就降解的，还是过程中呢？感觉降解发生在哪里，呵呵，我相信女士
的感觉一般很准，但咱这是科学研究，不是猜猜看，你说呢？ |
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c****y
发帖数: 14 | 34 请教各位大侠：
我想构建一个稳定细胞系，将质粒转染细胞并用抗生素筛选得到抗性12个细胞系，
但是Western blot检测不到蛋白表达。所以我又采用另一种策略构建，先将基因克隆到
Lentivirus vector上，用CMV promoter 启动目标基因表达，这个vector同时有EF1
promoter表达GFP, 重组质粒转染293T 细胞后制备lentivirus, 然后用Lentivirus感染
H1299细胞，再用GFP进行cell sorting得到稳定细胞系，在荧光显微镜下可以看到GFP
信号，所以这些细胞系应该是整合得有我的目标基因，但是，Western blot还是检测不
到蛋白表达。请问这是什么原因？另外，我瞬时转染这些质粒可以检测得到蛋白表达，
说明质粒正确。但为什么稳定细胞系检测不到蛋白表达呢？请问有什么可能的机制？谢
谢帮助！ |
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s******r
发帖数: 2876 | 35 也许你的CMV promoter被甲基化了，换个promoter试试。
请教各位大侠：
我想构建一个稳定细胞系，将质粒转染细胞并用抗生素筛选得到抗性12个细胞系，
但是Western blot检测不到蛋白表达。所以我又采用另一种策略构建，先将基因克隆到
Lentivirus vector上，用CMV promoter 启动目标基因表达，这个vector同时有EF1
promoter表达GFP, 重组质粒转染293T 细胞后制备lentivirus, 然后用Lentivirus感染
H1299细胞，再用GFP进行cell sorting得到稳定细胞系，在荧光显微镜下可以看到GFP
信号，所以这些细胞系应该是整合得有我的目标基因，但是，Western blot还是检测不
到蛋白表达。请问这是什么原因？另外，我瞬时转染这些质粒可以检测得到蛋白表达，
说明质粒正确。但为什么稳定细胞系检测不到蛋白表达呢？请问有什么可能的机制？谢
谢帮助！ |
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H****s
发帖数: 301 | 36 现在在尝试用原核系统（E.coli)表达一个病毒蛋白（400aa)，T7 promoter，BL21(DE3
) host。现在遇到了一个难题，这个基因怎么也克隆不到原核表达载体里去。转化后有
colonies，但是小提质粒后发现没有插入片段。
首先排除的是克隆问题，同样的片段，同样的酶切位点，使用完全同样的试剂，该基因
很容易就克隆到真核表达载体里去。
尝试了cytoplasm表达载体，periplasm表达载体,和不同的宿主菌，都是同样的结果。
（原核表达老手了，头一次遇到这种情况）。
是不是此蛋白毒性太大，即使是一点点的leaky expression都不行？
我现在在想的试验是：（1）做一个这个基因的文库，来看看到底是哪部分有毒性；（2
）使用GroES的leader peptide试试看。
各位有没有什么建议？谢谢。 |
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T**********t
发帖数: 1604 | 37 我就是用的BL21(DE3)pLysS strain，用0.4mM的IPTG诱导，表达4hr，蛋白产量很好。
T7 lysozyme是T7 RNA polymerase的natural inhibitor，它的表达是为了抑制在BL21(
DE3)里比较常见的leaky expression，但是这个表达量不至于抑制被IPTG诱导后的
expression。而且lysozyme不是蛋白酶，不可能降解你的蛋白。
你的蛋白如果用BL21(DE3)表达很好，说明你的蛋白对E.coli没有细胞毒性，你可以不
需要用BL21(DE3)pLysS来表达。
还有就是你看一下你用的是BL21系列还是BL21 Gold系列，这两个系列都有(DE3)和(DE3
)pLysS，但是我用BL21 Gold系列就碰到过表达不出来的问题。我说的BL21和BL21 Gold
都是Stratagene（现在的Agilent Genomics）的产品，不知道别的公司是不是也是这么
标识的。 |
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L***s
发帖数: 133 | 38 做了只转基因小鼠，lox-STOP-lox-gene-EGFP，EGFP是fuse在gene的C末端，target的
位置是ROSA26。
体外细胞试验很好, Cre转染后大量的GFP表达，功能也没问题，该基因不toxic。
好了，小鼠做好后，与Nestin-Cre line 杂交后，兴冲冲做了IHC (rabbit GFP Ab, invitrogen) ，结果很失望，发现GFP表达弱，且阳性细胞少；同样的Cre line 和ROSA26-YFP杂交后，同样的染色，YFP表达很强，阳性细胞很多。
帮忙分析一下原因
1. Fusion protein的问题？可能是fusion protein 表达量低？或是表达量可能并不那
么低，但在PFA fix时导致fusion protein被mask了，所以IHC看不到，证据是lox/lox
比lox/+的阳性细胞要多些。试了citrate buffer antigen retrieval (pH6, 95C,
15min)， 结果更差，一点阳性细胞也没有了。其他可行的antigen retrieval 方
法？
2. 因为target的位置... 阅读全帖 |
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s******s
发帖数: 699 | 39 要表达GST融合蛋白，第一次转进BL21 codon+（找别人借的...）中，挑菌，摇过夜，
存了一份glycerol stock放在－80, 然后剩下的菌IPTG诱导,成功表达。
可是后来用glycerol stock, 同样的条件，却再也不能诱导表达了，我也从冻在四度的
板子上再挑过菌，还是不能表达。
现在的打算是再找别人借一次（主要是有六个蛋白要表达一老借也不是个事），但还是
觉得很奇怪，菌的抗性还保存着说明质粒应该还在啊，当然这个菌不是保存质粒的好选
择，会有重组，可我还是不敢相信六个样品都发生重组。
有人知道这种第一次可以表达第二次就不行的现象是为什么吗？先谢谢大家了。
下面是抱怨帖：博士后天天在后面追着要蛋白，可是我还有ACE马上要过以及自己的课
题还有别的一堆事，真的没有那么多时间来trouble shooting啊>_< |
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Z******5
发帖数: 435 | 40 pll3.7通常是用来表达miRNA或者shRNA的。
最近想构建一个表达蛋白的载体，但是手上只有这套病毒系统。想问问：
1，有没有人用过这套系统表达蛋白？
2，mU6启动子应该是不能用吧，是不是要用CMV启动子，和GFP做融合表达？
3，我要表达的是一个转录因子，担心与GFP融合会影响其功能。考虑将 CMV+GFP 这段
用 CMV+外源基因+IRES+EGFP+SV40 polyA 替换掉，这样构建好的载体就有近10kb了，
会不会影响病毒包装效率？
另外再问一个我要过表达的是一个原癌基因，在安全性方面是不是要非常小心？ |
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y***i
发帖数: 11639 | 41 我们有这样的老鼠的gene expression array 数据：
1. Control cell with geneA
2. Control cell knockout geneA
3. Tumor cell with geneA
4. Tumor cell knockout geneA
1~2 样本是配对的，3~4样本是配对的。第二张图的连线情况就是配对情况
PCA 的图和基因表达分析吻合的有两点：
1. control 和 tumor 基因表达pattern大不相同，基因分析结果也吻合：比较这两者
时有上千的基因显著的up or down regulated （比较红色和蓝色）
2. PCA 显示Normal sample中有无GeneA，基因表达变化不大。这个和array分析结果也
吻合。（比较红方块和红小球）
但有一点PCA 的图和基因表达分析不吻合：
1. PCA 显示 在tumor中有没有GeneA，表达pattern也应该有相当显著的区别，但我用
fold change>3; FDR<0.05的阈值算，只有58个基因有显著变化。（比较蓝方块和蓝小球）
奇怪的是当我把所... 阅读全帖 |
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n********k
发帖数: 2818 | 42 同召唤，他是谁呀，那年评的，怎么找不到这个人的说。
前一阵子本来想回的，不过我不做ES细胞，不是很确定，所以想想算了。我说说我的对
这个简单问题的富杂想法哈，ES是个COMPETENT的状态，所以很多基因在ES都有本地表
达，尤其是NUERAL的，有不少表达量还挺高，但可能是完全不相关的功能，比如说NR1
（？），表达量就很高；TUBB3 是一直作为神经元分化的标记，但是其实在干细胞是有
表达的，而且mRNA是不低的，很多神经基因在干细胞比前体细胞表达更高，文献中有，
我自己也看到。还有，我目前用的TUJ1抗体都是有背景，而且不低，也可能是本底表达
，分化的话， 染色会增强很多很多，所以我不看片子，我不相信任何人的照片，太容
易造假了，不过形态可以帮忙确定。简单的说，就是我不知道ES的情况，但是表达不表
达很多时候是相对的。 |
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r******t
发帖数: 629 | 43 我用ecoli（BL21 DE3）表达人的cyt c，有6 his tag。
结果37度表达就有inclusion body，而30度或者室温就压根不表达，这个也太奇怪了吧。
为啥啊？
我把30度养的culture丢进37度几个小时，它们又很欢快的表达了。
唉，不知道该怎么解决这个问题。
换个cell line？ |
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b*****n
发帖数: 1841 | 44 western检测敲减效率有95%以上，过表达有10倍以上，但是敲减和过表达都导致细胞系
的生长变慢和致瘤能力下降，而且过表达的表型更加明显，打个比方说，对照肿瘤大小
平均是1，敲减的肿瘤大小平均是0.5，但是过表达的平均大小只有0.1不到，非常令人
吃惊。
如何解释这个现象呢？dominant negative的话也不会过表达的表型强于敲减啊。
如何进一步研究呢？
未来如何展示过表达的数据并让reviewer信服？ |
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发帖数: 1 | 45 想问下，如果用普通表达蛋白的plasmid去表达microRNA或者lincRNA，怎么确保最后不
表达出来一个蛋白？是不是需要用一个特殊的plasmid，例如没有ribosomal binding
sequence或者没有其他帮助表达蛋白的sequence?
第二个问题是怎么确保transcription termination? 或者说怎么确保表达出来的
lincRNA最后没有多出来个小尾巴？
希望这方面有经验的大牛能够帮帮忙。如果有什么关于表达lincRNA其他需要注意的地
方也请指教。谢谢。 |
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发帖数: 1 | 46 你的问题没有说明白啊。
在哪里表达？真核细胞里表达看显微镜，还是ecoli表达纯化蛋白？
因为我的做的蛋白质是tail anchored。所以我只干过GFP-TMD，表达量超级高。
而且你不能只表达跨膜区的20AA然后就接上了GFP，一般TMD两端边缘都有两性氨基酸，
外围有charge的氨基酸，比如KRDESC这些都要带上点作为缓冲区域，也有可能是引导如
何TMD插入ER的信号。
如果你是为了看confocal检测这段20AA是否为TMD，是否在ER上，那么信号弱就弱吧，
不重要，赶紧做其他的。
如果是在ecoli里表达，我估计会不溶，需要用periplasmic expression。如果不用，
最好接MBP，做成MBP-GFP-TMD。 |
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d*****d
发帖数: 57 | 47 一个国家的成长与其强盛是有着必然的联系的，一个国家成长没有与强盛的结果挂钩，
显然这种成长就不是全面的，而且这种成长也是存在潜在危险的，当然一个简单的成长
不能说是一种成长，只能说是成长的一个阶段，一个完整的成长是需要各个方面的综合
进步，而不是一个单一的加工单位，在这一点上，中国大陆完全吸取了原苏联的产业布
局不合理现象，也在成长的独立性上完全体现了中国人应该有的特色，这成长的过程中
，中国大陆同样遇到这样或那样的问题，但中国大陆在中国共产党的领导下，还是比较
坚实的走了过来，这一点上可以说中国大陆的执政党还是具有相当能量和智慧的，中国
大陆的稳步成长，形成一个坚实的国力基础，使中国大陆在一个和平状态下，走了一个
世界其他国家没的遭遇的成长快速期，与其他国家不同，中国大陆没有发生政治改变，
也没有发生分裂战争，在同等的历史条件下，中国大陆走了一个可以游离世界纷乱的空
间，这种成长不论是快还是慢，都是值得肯定的。
国家的成长是需要政治表达的，当中国大陆的发展在没有达到一个整体水平时，中国大
陆采取了一种观望和平、谈论和平的保守外交方式，在任何一个世界上其他国家的冲突
之间，表达一种期望... 阅读全帖 |
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发帖数: 1 | 48 在中国就不能表达自己的想法。这个就只能意会不能言传了。然后NBA本身的这个想法
确实也是辱华的，但是说起来美国人也不怎么看NBA的，外国人基本就不怎么看，到了
中国是好东西，是因为我们本身就没有什么给男性可以看的有意思的赛事而已。现在电
竞起来了还好，以前连电竞也没有都是NBA的市场啊。
所以说NBA这点错就搓在表达了，如果不表达装傻只能是一些人辱骂但是不至于被抵制
。这次抵制成了那以后其他的品牌可能也会遭到这种封杀，以后的日子过的可能就更惨
了。
所以不要表达才是真的好，表达了反而会影响到自己的这个推广，你看腾讯15亿，那虎
扑的身家都在NBA全没了，这次倾家荡产全都死了。 |
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