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- 从纯化到星辰---CSH蛋白质纯化课侧记(七)
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r****o
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本文献给YL
(七)古怪的CDC6
这里再给大家讲一个在大肠杆菌中表达蛋白质的例子,一个很夸张的例子,但是很有启发性。
Bruce Stillman 是冷泉港的现任主管,是一个绝对的牛人。不但科学做得很好,而且还很爱
国。他是澳洲人,在美国待了N年,却从没有加入美国国籍,所以他只是外籍院士。我们的晚间报
告有一个是他作的。他主要研究真核生物的DNA复制。这是一个到现在为止都没有完全弄明白的领
域。在报告里面,他特别提到了表达纯化CDC6蛋白的经历,我觉得十分有意思。这个蛋白, 用他
的话说,是"a pain in the ass"。
CDC6是干什么的呢?这要从ORC说起。真核生物的DNA有多个复制起始位点(replication
origin),ORC(Origin Replication Complex)是一个很大的蛋白复合体,可以识别这些复制起始位
点。ORC在整个细胞周期里面都是与DNA结合的。在G1期里面,CDC6这个蛋白会与ORC结合,同
时让MCM(DNA解旋酶)也装载到ORC上,形成一个pre-replication protein complex。这个co
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