a*****i 发帖数: 361 | 1 有人做EMSA? 可不可以提供一个RNA和蛋白质binding buffer的配方?
我刚开始做,看到网上有一些是用来做DNA和蛋白质的,是不是也可以用来做RNA?
谢谢了! |
a***e 发帖数: 1010 | 2 those buffers are quite similar.
maybe you need some tRNA to reduce unspecific binding. |
a*****i 发帖数: 361 | 3 我看的有的用tRNA,有的用poly(dI:dC)? 究竟那个好些?
还有binding buffer中有的用HEPES,有的用Tris-HCl. 有什么区别? |
a***e 发帖数: 1010 | 4 for DNA, poly(dI::dC) is better.
for RNA, tRNA maybe better.
no difference between HEPES and Tris-HCl buffer. |
l*******k 发帖数: 361 | 5 有些时候你需要自己去试,我做DNA-protein interaction的时候,三种buffer Hepes/
Tris/Phos都用过,也试过不一样的PH, 不一样的东西,不同的buffer效果不一样的 |
a*****i 发帖数: 361 | |
a****o 发帖数: 1786 | 7 MgCl2
DTT
sometimes make big difference |