w******y
发帖数: 2504 | 1 新手作RT，遇到如下几个问题，还请大家不吝赐教：
1.用的小鼠的心脏组织提的RNA；
2.提的时候A260/A280的值在1.5左右；
3.纯化之后，这个值只有1.00甚至更低；
4.跑了RT之后发现，趋势和别人报道的相反；
5.引物还是很特异的。
想请教一下，这个纯化怎么越纯越低呢；还有纯化会否是我后面不理想的结果的原因呢？
谢谢 |
C*******e
发帖数: 4348 | 2 跑胶或者run chip没？
RNA有没有降解？ |
O******e
发帖数: 4845 | 3 多半是降解了。跑个胶看看吧。
呢？
【在 w******y 的大作中提到】
: 新手作RT，遇到如下几个问题，还请大家不吝赐教：
: 1.用的小鼠的心脏组织提的RNA；
: 2.提的时候A260/A280的值在1.5左右；
: 3.纯化之后，这个值只有1.00甚至更低；
: 4.跑了RT之后发现，趋势和别人报道的相反；
: 5.引物还是很特异的。
: 想请教一下，这个纯化怎么越纯越低呢；还有纯化会否是我后面不理想的结果的原因呢？
: 谢谢
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n*****e
发帖数: 119 | 4 什么叫“提”？什么叫“纯化”？这两个在你哪里有什么区别？能不能 准确地 描述一
下你做了什么？什么试剂？
至少先做到这些。否则怎么判断啊！ |
m****m
发帖数: 4741 | 5 既然测了RNA 260/280，不会不知道比值应该接近2.0吧
这个跑胶也看不出啥结果的
【在 O******e 的大作中提到】
: 多半是降解了。跑个胶看看吧。
:
: 呢？
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n***w
发帖数: 2405 | 6 如果是用nanodrop测得话，降解得了话不会影响这个比值多少吧。跑胶倒是可以看看。 |
T**********t
发帖数: 1604 | 7 260/280偏低，说明280的吸收太高了，或者是有蛋白污染，或者用的buffer里有紫外吸
收干扰物质。光是RNA降解应该不会导致260//280低那么多的。 |
s********n
发帖数: 342 | |
w******y
发帖数: 2504 | |
