由买买提看人间百态

boards

本页内容为未名空间相应帖子的节选和存档,一周内的贴子最多显示50字,超过一周显示500字 访问原贴
Biology版 - 请教一个测序问题
相关主题
【求助】用低浓度PCR产物做第二轮PCR请教一个非常规实验(大载体连接)手段是否可行
有用ABI3130 测序系统自己测序的兄弟姐妹么?我都急死了。请教一个DNA sonication的问题
请教克隆的基因链接到质粒里后部分片段丢失是怎么回事?在美国订引物一般要求什么级别的纯化?
问题请教: illumina 测序样品制备RT-PCR求助
300bp的DNA怎么测序结果500bp请问各位cloning高手
单引物PCR特异性条带Addgene上的一些质粒坑爹啊!
这种情况一定要做Southern Blot吗PCR如何将3段来源不同的片段连在一起,然后克隆?
乘着人气高求教个PCR疑难要做长引物pcr,大家有没有啥建议呀~~
相关话题的讨论汇总
话题: 测序话题: dna话题: genomic话题: 柱子话题: 碱裂解
进入Biology版参与讨论
1 (共1页)
s******a
发帖数: 472
1
碱裂解法提取的质粒能不能直接送测序呢?就是不过柱子的那种
我觉得可以,但是我的supervisor说不行。费半天口舌才让我送两个样本试一下。
他的理由是里面有细菌的genomic DNA和很多蛋白质,我怎么觉得站不住脚。
s******a
发帖数: 472
2
大部分genomic DNA和蛋白质应该都在沉淀里吧。

【在 s******a 的大作中提到】
: 碱裂解法提取的质粒能不能直接送测序呢?就是不过柱子的那种
: 我觉得可以,但是我的supervisor说不行。费半天口舌才让我送两个样本试一下。
: 他的理由是里面有细菌的genomic DNA和很多蛋白质,我怎么觉得站不住脚。

s******s
发帖数: 13035
3
理论没啥问题,浓度不要太低就行

【在 s******a 的大作中提到】
: 碱裂解法提取的质粒能不能直接送测序呢?就是不过柱子的那种
: 我觉得可以,但是我的supervisor说不行。费半天口舌才让我送两个样本试一下。
: 他的理由是里面有细菌的genomic DNA和很多蛋白质,我怎么觉得站不住脚。

s******s
发帖数: 13035
4
btw, 想当年国内抽质粒哪有柱子用啊,不是照样测序?

【在 s******a 的大作中提到】
: 碱裂解法提取的质粒能不能直接送测序呢?就是不过柱子的那种
: 我觉得可以,但是我的supervisor说不行。费半天口舌才让我送两个样本试一下。
: 他的理由是里面有细菌的genomic DNA和很多蛋白质,我怎么觉得站不住脚。

h****6
发帖数: 229
5
It is fine. Many genome centers use the method.
b******n
发帖数: 4225
6
当然可以啦,测序是需要引物的,特异性主要靠引物来保证

【在 s******a 的大作中提到】
: 碱裂解法提取的质粒能不能直接送测序呢?就是不过柱子的那种
: 我觉得可以,但是我的supervisor说不行。费半天口舌才让我送两个样本试一下。
: 他的理由是里面有细菌的genomic DNA和很多蛋白质,我怎么觉得站不住脚。

s******a
发帖数: 472
7
谢谢。不然我会觉得自己太蠢。
可惜我没有测出来(不过我发现我用测序引物做PCR也是出2条带,我觉得这个应该是原
因)。
不过“他”坚持认为是我没有做纯化,“他”认为不过柱子就不是纯化。
1 (共1页)
进入Biology版参与讨论
相关主题
要做长引物pcr,大家有没有啥建议呀~~300bp的DNA怎么测序结果500bp
点突变单引物PCR特异性条带
1包子求助各位大侠用PCR扩增整个质粒的问题?这种情况一定要做Southern Blot吗
关于质粒去磷处理,问个比较弱的问题乘着人气高求教个PCR疑难
【求助】用低浓度PCR产物做第二轮PCR请教一个非常规实验(大载体连接)手段是否可行
有用ABI3130 测序系统自己测序的兄弟姐妹么?我都急死了。请教一个DNA sonication的问题
请教克隆的基因链接到质粒里后部分片段丢失是怎么回事?在美国订引物一般要求什么级别的纯化?
问题请教: illumina 测序样品制备RT-PCR求助
相关话题的讨论汇总
话题: 测序话题: dna话题: genomic话题: 柱子话题: 碱裂解