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Biology版 - qPCR问题请教!
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c****r
发帖数: 199
1
用SYBR Green做了qPCR, 看dissociation curve的时候发现,虽然只有一个
peak, 但是当template的浓度变低时,这个peak所在的位置也跟着shift到低一
些的温度。大虾们给说说这是怎么回事情?
谢谢!
k****o
发帖数: 589
2
shift前后的峰型都一样吗?
c****r
发帖数: 199
3
峰型倒是差不多,是不是因为template太少的缘故?不明白呀。
A***g
发帖数: 191
4
以我的经验,这个峰型的位置(就是温度值了)跟反应体系的成分有关系的。比如我的
实验中如果直接用cDNA和同样的cDNA稀释一定倍数(10倍或20倍)以后,两个峰的位置
会不一样。但是稀释20倍和稀释50倍或100倍的峰的位置差异不大,好像是因为20倍的
稀释就足够降低cDNA反应体系中成分带来的影响了。
i*S
发帖数: 175
5
有多低?我认为一两度不成问题。
t**a
发帖数: 255
6
确实是因为template太少,造成最终产物浓度不一样. 你可以看一下你的扩增曲线,
到最后
plateau heights 是不是也不一样啊?

【在 c****r 的大作中提到】
: 峰型倒是差不多,是不是因为template太少的缘故?不明白呀。
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