由买买提看人间百态

boards

本页内容为未名空间相应帖子的节选和存档,一周内的贴子最多显示50字,超过一周显示500字 访问原贴
Biology版 - qPCR问题请教!
相关主题
求助:qPCR能把cDNA模板稀释十倍做吗?limit of detection with RT-qPCR (SYBR or TaqMan)
诡异的qPCR,请高手指点SYBR real-time PCR误差很大?
求助high GC content的real-time PCR请问影响real-time qPCR扩增效率的因素?
问个qRT-PCR加样顺序的问题qPCR检测到Ct值在32左右的基因用western检测到蛋白会有多强?
DNA-QPCR VS cDNA-REAL TIME PCR ?qPCR标准曲线 不是线性的 有哪些可能性
real time qPCR的效率异常antagonist dose-response curve 求解读
有人做过PCR array么?几个小白问题有关qRT-PCR一问,请大家帮忙
qPCR primer efficiency 问题ChIP-qPCR control primer
相关话题的讨论汇总
话题: qpcr话题: peak话题: template话题: 峰型话题: sybr
进入Biology版参与讨论
1 (共1页)
c****r
发帖数: 199
1
用SYBR Green做了qPCR, 看dissociation curve的时候发现,虽然只有一个
peak, 但是当template的浓度变低时,这个peak所在的位置也跟着shift到低一
些的温度。大虾们给说说这是怎么回事情?
谢谢!
k****o
发帖数: 589
2
shift前后的峰型都一样吗?
c****r
发帖数: 199
3
峰型倒是差不多,是不是因为template太少的缘故?不明白呀。
A***g
发帖数: 191
4
以我的经验,这个峰型的位置(就是温度值了)跟反应体系的成分有关系的。比如我的
实验中如果直接用cDNA和同样的cDNA稀释一定倍数(10倍或20倍)以后,两个峰的位置
会不一样。但是稀释20倍和稀释50倍或100倍的峰的位置差异不大,好像是因为20倍的
稀释就足够降低cDNA反应体系中成分带来的影响了。
i*S
发帖数: 175
5
有多低?我认为一两度不成问题。
t**a
发帖数: 255
6
确实是因为template太少,造成最终产物浓度不一样. 你可以看一下你的扩增曲线,
到最后
plateau heights 是不是也不一样啊?

【在 c****r 的大作中提到】
: 峰型倒是差不多,是不是因为template太少的缘故?不明白呀。
1 (共1页)
进入Biology版参与讨论
相关主题
ChIP-qPCR control primerDNA-QPCR VS cDNA-REAL TIME PCR ?
怎么GENOTYPE HOMOZYGOTE tg MICEreal time qPCR的效率异常
土问:能不能在一个RT里放多个primer?有人做过PCR array么?几个小白问题
在线等:问个real -time pcr仪器的使用问题qPCR primer efficiency 问题
求助:qPCR能把cDNA模板稀释十倍做吗?limit of detection with RT-qPCR (SYBR or TaqMan)
诡异的qPCR,请高手指点SYBR real-time PCR误差很大?
求助high GC content的real-time PCR请问影响real-time qPCR扩增效率的因素?
问个qRT-PCR加样顺序的问题qPCR检测到Ct值在32左右的基因用western检测到蛋白会有多强?
相关话题的讨论汇总
话题: qpcr话题: peak话题: template话题: 峰型话题: sybr