c****1 发帖数: 1095 | 1 DNA marker不是很便宜,实验室用量很大(小分子量的),老板不肯花钱买,让我们自
己做。老板
提的方法是,用PCR,扩不同大小的产物,然后混在一起。我觉得,自己改装一个质粒
,然后用一个
单一的酶来切,得到不同大小的片段。质粒容易量产,酶切也容易,我想那些公司应该
用的就是这个
办法。不知到哪里可以买到这样已经改装好的质粒。有没有哪位同仁愿意share? |
d***y 发帖数: 8536 | 2 兄弟, 还是劝劝你老板花点这样的小钱吧,真的犯不着 |
g******1 发帖数: 244 | 3 买点兰姆达DNA用HindIII酶切,有现成的图谱比对 |
s******y 发帖数: 28562 | 4 Lambda DNA / HindIII 是一个常用的分子标记。但是分子量没有你说的那么小。
小分子量的还是用你老板说的方法比较实用,而且可以弄到很小的片段
【在 c****1 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : DNA marker不是很便宜,实验室用量很大(小分子量的),老板不肯花钱买,让我们自 : 己做。老板 : 提的方法是,用PCR,扩不同大小的产物,然后混在一起。我觉得,自己改装一个质粒 : ,然后用一个 : 单一的酶来切,得到不同大小的片段。质粒容易量产,酶切也容易,我想那些公司应该 : 用的就是这个 : 办法。不知到哪里可以买到这样已经改装好的质粒。有没有哪位同仁愿意share?
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o********r 发帖数: 775 | 5 这点小钱。。。老板给你的工资+benefits一天也要150刀左右吧,浪费在这上面不值得
。要是老板真不肯买,你还是考虑换老板吧,这么抠门而且思路不清的老板离远点 |
o********r 发帖数: 775 | 6 1kb或者100bp的ladder不是很贵吧?
【在 s******y 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : Lambda DNA / HindIII 是一个常用的分子标记。但是分子量没有你说的那么小。 : 小分子量的还是用你老板说的方法比较实用,而且可以弄到很小的片段
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s******y 发帖数: 28562 | 7 如果从正确的渠道货比三家之后买,其实不是特别贵。但是有的实验室
对这个用量特别大。所以也有人每隔半年自己大量的做一次marker然后
冻起来慢慢用。
【在 o********r 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 1kb或者100bp的ladder不是很贵吧?
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o********r 发帖数: 775 | 8 刚随手查了这个
http://www.neb.com/nebecomm/products/productn3231.asp
212刀500个loading。。。而且发文章的时候解释自己做ladder有点无奈吧?
【在 s******y 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 如果从正确的渠道货比三家之后买,其实不是特别贵。但是有的实验室 : 对这个用量特别大。所以也有人每隔半年自己大量的做一次marker然后 : 冻起来慢慢用。
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b******n 发帖数: 4225 | 9 就说是homemade organic marker
绝对是个proof of concept的东西,前卫潮流洋气
【在 o********r 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 刚随手查了这个 : http://www.neb.com/nebecomm/products/productn3231.asp : 212刀500个loading。。。而且发文章的时候解释自己做ladder有点无奈吧?
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g******1 发帖数: 244 | 10 穷实验室的辛酸,你们永远不会懂啊........
话说我老板最开心的时候就是厂商开demo展会,因为可以拿很多free sample..... |
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m*******r 发帖数: 7495 | 11 甭忙活了
我知道的一个省钱超人,不,是省钱赛亚人级别的lab manager在做了math之后,
都放弃home made改买了
【在 c****1 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : DNA marker不是很便宜,实验室用量很大(小分子量的),老板不肯花钱买,让我们自 : 己做。老板 : 提的方法是,用PCR,扩不同大小的产物,然后混在一起。我觉得,自己改装一个质粒 : ,然后用一个 : 单一的酶来切,得到不同大小的片段。质粒容易量产,酶切也容易,我想那些公司应该 : 用的就是这个 : 办法。不知到哪里可以买到这样已经改装好的质粒。有没有哪位同仁愿意share?
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m*******r 发帖数: 7495 | 12 员工的时间其实是最大的成本
这个算了吗?
【在 g******1 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 穷实验室的辛酸,你们永远不会懂啊........ : 话说我老板最开心的时候就是厂商开demo展会,因为可以拿很多free sample.....
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c****1 发帖数: 1095 | 13 我们实验室经费还算充裕,只是老板把钱看得很紧。没办法改变他的思维,只能自己动
手了。以前他每次回国都会带很多marker回来。
现在我好奇的是,工业上做小分子量marker是用PCR,还是酶切? |
o********r 发帖数: 775 | 14 这样的老板以后会不会让你们自己表达提纯RE/Taq?大家都做lab tech算了
【在 c****1 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 我们实验室经费还算充裕,只是老板把钱看得很紧。没办法改变他的思维,只能自己动 : 手了。以前他每次回国都会带很多marker回来。 : 现在我好奇的是,工业上做小分子量marker是用PCR,还是酶切?
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p****n 发帖数: 9263 | 15 还是抽空子换老板吧,在这种人眼里,学生破刀的都不如几管马克值钱
【在 c****1 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 我们实验室经费还算充裕,只是老板把钱看得很紧。没办法改变他的思维,只能自己动 : 手了。以前他每次回国都会带很多marker回来。 : 现在我好奇的是,工业上做小分子量marker是用PCR,还是酶切?
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f*******e 发帖数: 628 | 16 不如在各个厂商在 campus 做 product show 的时候去要,经常给免费 DNA ladder 的
。实验室所有人轮流去拿一趟,有不少了。 |
D*a 发帖数: 6830 | |
e*******e 发帖数: 1837 | 18 PCR做的极多的话长Taq还是很值的.3天的简单工作提出来的Taq可以用好几年.自己PCR
做marker总感觉不值,问题是量上不去吧.如果真要做估计还是质粒大提酶切比较靠谱.
【在 o********r 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 这样的老板以后会不会让你们自己表达提纯RE/Taq?大家都做lab tech算了
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s******s 发帖数: 13035 | 19 我知道多数做microarray的实验室都自己做Taq,还有偷偷做pfu的.
我们实验室原来做PCR比较多,每个礼拜几百上千的,都去买岂不是饿死
【在 o********r 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 这样的老板以后会不会让你们自己表达提纯RE/Taq?大家都做lab tech算了
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A*******e 发帖数: 284 | 20 Lambda DNA / EcoR I and HindIII double digestion, very good marker |