c****1
发帖数: 1095 | 1 DNA marker不是很便宜，实验室用量很大（小分子量的），老板不肯花钱买，让我们自
己做。老板
提的方法是，用PCR，扩不同大小的产物，然后混在一起。我觉得，自己改装一个质粒
，然后用一个
单一的酶来切，得到不同大小的片段。质粒容易量产，酶切也容易，我想那些公司应该
用的就是这个
办法。不知到哪里可以买到这样已经改装好的质粒。有没有哪位同仁愿意share？ |
d***y
发帖数: 8536 | 2 兄弟, 还是劝劝你老板花点这样的小钱吧,真的犯不着 |
g******1
发帖数: 244 | 3 买点兰姆达DNA用HindIII酶切，有现成的图谱比对 |
s******y
发帖数: 28562 | 4 Lambda DNA / HindIII 是一个常用的分子标记。但是分子量没有你说的那么小。
小分子量的还是用你老板说的方法比较实用，而且可以弄到很小的片段
【在 c****1 的大作中提到】
: DNA marker不是很便宜，实验室用量很大（小分子量的），老板不肯花钱买，让我们自
: 己做。老板
: 提的方法是，用PCR，扩不同大小的产物，然后混在一起。我觉得，自己改装一个质粒
: ，然后用一个
: 单一的酶来切，得到不同大小的片段。质粒容易量产，酶切也容易，我想那些公司应该
: 用的就是这个
: 办法。不知到哪里可以买到这样已经改装好的质粒。有没有哪位同仁愿意share？
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o********r
发帖数: 775 | 5 这点小钱。。。老板给你的工资+benefits一天也要150刀左右吧，浪费在这上面不值得
。要是老板真不肯买，你还是考虑换老板吧，这么抠门而且思路不清的老板离远点 |
o********r
发帖数: 775 | 6 1kb或者100bp的ladder不是很贵吧？
【在 s******y 的大作中提到】
: Lambda DNA / HindIII 是一个常用的分子标记。但是分子量没有你说的那么小。
: 小分子量的还是用你老板说的方法比较实用，而且可以弄到很小的片段
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s******y
发帖数: 28562 | 7 如果从正确的渠道货比三家之后买，其实不是特别贵。但是有的实验室
对这个用量特别大。所以也有人每隔半年自己大量的做一次marker然后
冻起来慢慢用。
【在 o********r 的大作中提到】
: 1kb或者100bp的ladder不是很贵吧？
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o********r
发帖数: 775 | 8 刚随手查了这个
http://www.neb.com/nebecomm/products/productn3231.asp
212刀500个loading。。。而且发文章的时候解释自己做ladder有点无奈吧？
【在 s******y 的大作中提到】
: 如果从正确的渠道货比三家之后买，其实不是特别贵。但是有的实验室
: 对这个用量特别大。所以也有人每隔半年自己大量的做一次marker然后
: 冻起来慢慢用。
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b******n
发帖数: 4225 | 9 就说是homemade organic marker
绝对是个proof of concept的东西，前卫潮流洋气
【在 o********r 的大作中提到】
: 刚随手查了这个
: http://www.neb.com/nebecomm/products/productn3231.asp
: 212刀500个loading。。。而且发文章的时候解释自己做ladder有点无奈吧？
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g******1
发帖数: 244 | 10 穷实验室的辛酸，你们永远不会懂啊........
话说我老板最开心的时候就是厂商开demo展会，因为可以拿很多free sample..... |
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m*******r
发帖数: 7495 | 11 甭忙活了
我知道的一个省钱超人，不，是省钱赛亚人级别的lab manager在做了math之后，
都放弃home made改买了
【在 c****1 的大作中提到】
: DNA marker不是很便宜，实验室用量很大（小分子量的），老板不肯花钱买，让我们自
: 己做。老板
: 提的方法是，用PCR，扩不同大小的产物，然后混在一起。我觉得，自己改装一个质粒
: ，然后用一个
: 单一的酶来切，得到不同大小的片段。质粒容易量产，酶切也容易，我想那些公司应该
: 用的就是这个
: 办法。不知到哪里可以买到这样已经改装好的质粒。有没有哪位同仁愿意share？
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m*******r
发帖数: 7495 | 12 员工的时间其实是最大的成本
这个算了吗？
【在 g******1 的大作中提到】
: 穷实验室的辛酸，你们永远不会懂啊........
: 话说我老板最开心的时候就是厂商开demo展会，因为可以拿很多free sample.....
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c****1
发帖数: 1095 | 13 我们实验室经费还算充裕，只是老板把钱看得很紧。没办法改变他的思维，只能自己动
手了。以前他每次回国都会带很多marker回来。
现在我好奇的是，工业上做小分子量marker是用PCR，还是酶切？ |
o********r
发帖数: 775 | 14 这样的老板以后会不会让你们自己表达提纯RE/Taq？大家都做lab tech算了
【在 c****1 的大作中提到】
: 我们实验室经费还算充裕，只是老板把钱看得很紧。没办法改变他的思维，只能自己动
: 手了。以前他每次回国都会带很多marker回来。
: 现在我好奇的是，工业上做小分子量marker是用PCR，还是酶切？
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p****n
发帖数: 9263 | 15 还是抽空子换老板吧，在这种人眼里，学生破刀的都不如几管马克值钱
【在 c****1 的大作中提到】
: 我们实验室经费还算充裕，只是老板把钱看得很紧。没办法改变他的思维，只能自己动
: 手了。以前他每次回国都会带很多marker回来。
: 现在我好奇的是，工业上做小分子量marker是用PCR，还是酶切？
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f*******e
发帖数: 628 | 16 不如在各个厂商在 campus 做 product show 的时候去要，经常给免费 DNA ladder 的
。实验室所有人轮流去拿一趟，有不少了。 |
D*a
发帖数: 6830 | |
e*******e
发帖数: 1837 | 18 PCR做的极多的话长Taq还是很值的.3天的简单工作提出来的Taq可以用好几年.自己PCR
做marker总感觉不值,问题是量上不去吧.如果真要做估计还是质粒大提酶切比较靠谱.
【在 o********r 的大作中提到】
: 这样的老板以后会不会让你们自己表达提纯RE/Taq？大家都做lab tech算了
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s******s
发帖数: 13035 | 19 我知道多数做microarray的实验室都自己做Taq，还有偷偷做pfu的.
我们实验室原来做PCR比较多，每个礼拜几百上千的，都去买岂不是饿死
【在 o********r 的大作中提到】
: 这样的老板以后会不会让你们自己表达提纯RE/Taq？大家都做lab tech算了
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A*******e
发帖数: 284 | 20 Lambda DNA / EcoR I and HindIII double digestion, very good marker |
