s*********t
发帖数: 600 | 1 用100ul的上样环可以吗？不能再少了吧？
最多能上样多少体积？用1ml的上样环可以吗？
谢谢指教！ |
s******y
发帖数: 28562 | 2 只要你乐意，上多少都可以。但是峰会变胖
一般而言我从来不上超过200ul的样
但是蛋白本来就很纯的时候也有500ul 的。反正就是出来一个胖峰。
【在 s*********t 的大作中提到】
: 用100ul的上样环可以吗？不能再少了吧？
: 最多能上样多少体积？用1ml的上样环可以吗？
: 谢谢指教！
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s*********t
发帖数: 600 | 3 那跟上样环有关系吗？能用1ml的上样环上200ul样品吗？
我手头只有100ul和1ml两个上样环
【在 s******y 的大作中提到】
: 只要你乐意，上多少都可以。但是峰会变胖
: 一般而言我从来不上超过200ul的样
: 但是蛋白本来就很纯的时候也有500ul 的。反正就是出来一个胖峰。
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s******y
发帖数: 28562 | 4 哦！原来你是这个意思啊！
那没有问题，就是注入的时候要小心产生泡泡
另外，如果你不明白我的意思的话，我的意思是上样环里不应该是空的，
而是一开始就应该在洗完之后注射进满满的缓冲液，所以反正你本来
就不是对一个空的上样环来注射的。明白我的意思了吧？
【在 s*********t 的大作中提到】
: 那跟上样环有关系吗？能用1ml的上样环上200ul样品吗？
: 我手头只有100ul和1ml两个上样环
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s*********t
发帖数: 600 | 5 好像明白。上样环都是先用buffer洗过的，里面充满buffer的。
就是说随便往上样环里面注入多少样品，只要不超过柱体积和上样环的体积，都是可以
的，对吧？
比如，如果是100ul的上样环，注入200ul样品就不行了吧？反过来，1ml的，可以随便
上样1ml以下的样品，对吧？
周末了，实验室一个人也没有，只有我在苦逼的过柱子，找不到人请教 。。。
谢谢sunnyday老师指点！
【在 s******y 的大作中提到】
: 哦！原来你是这个意思啊！
: 那没有问题，就是注入的时候要小心产生泡泡
: 另外，如果你不明白我的意思的话，我的意思是上样环里不应该是空的，
: 而是一开始就应该在洗完之后注射进满满的缓冲液，所以反正你本来
: 就不是对一个空的上样环来注射的。明白我的意思了吧？
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s******y
发帖数: 28562 | 6 对的，因为假如是100ul的上样环，注入200ul样品的话就会有100流到废液
里面去了。所以在你的情况下只好用1ml的环了。
有的人会采用先注射100ul，上得差不多之后停止走柱再来100ul，
但是这种方法很不好掌握，我强烈不建议。
最后，一般原则是注入体积尽可能要和环的大小接近，比方说如果你只有50ul
的话，如果用1ml的环，在注入过程中就会由于液面的扰动而被稀释。
【在 s*********t 的大作中提到】
: 好像明白。上样环都是先用buffer洗过的，里面充满buffer的。
: 就是说随便往上样环里面注入多少样品，只要不超过柱体积和上样环的体积，都是可以
: 的，对吧？
: 比如，如果是100ul的上样环，注入200ul样品就不行了吧？反过来，1ml的，可以随便
: 上样1ml以下的样品，对吧？
: 周末了，实验室一个人也没有，只有我在苦逼的过柱子，找不到人请教 。。。
: 谢谢sunnyday老师指点！
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s*********t
发帖数: 600 | 7 明白了！ sunnyday老师真是好人啊！！！
【在 s******y 的大作中提到】
: 对的，因为假如是100ul的上样环，注入200ul样品的话就会有100流到废液
: 里面去了。所以在你的情况下只好用1ml的环了。
: 有的人会采用先注射100ul，上得差不多之后停止走柱再来100ul，
: 但是这种方法很不好掌握，我强烈不建议。
: 最后，一般原则是注入体积尽可能要和环的大小接近，比方说如果你只有50ul
: 的话，如果用1ml的环，在注入过程中就会由于液面的扰动而被稀释。
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