s*********t 发帖数: 600 | 1 用100ul的上样环可以吗?不能再少了吧?
最多能上样多少体积?用1ml的上样环可以吗?
谢谢指教! |
s******y 发帖数: 28562 | 2 只要你乐意,上多少都可以。但是峰会变胖
一般而言我从来不上超过200ul的样
但是蛋白本来就很纯的时候也有500ul 的。反正就是出来一个胖峰。
【在 s*********t 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 用100ul的上样环可以吗?不能再少了吧? : 最多能上样多少体积?用1ml的上样环可以吗? : 谢谢指教!
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s*********t 发帖数: 600 | 3 那跟上样环有关系吗?能用1ml的上样环上200ul样品吗?
我手头只有100ul和1ml两个上样环
【在 s******y 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 只要你乐意,上多少都可以。但是峰会变胖 : 一般而言我从来不上超过200ul的样 : 但是蛋白本来就很纯的时候也有500ul 的。反正就是出来一个胖峰。
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s******y 发帖数: 28562 | 4 哦!原来你是这个意思啊!
那没有问题,就是注入的时候要小心产生泡泡
另外,如果你不明白我的意思的话,我的意思是上样环里不应该是空的,
而是一开始就应该在洗完之后注射进满满的缓冲液,所以反正你本来
就不是对一个空的上样环来注射的。明白我的意思了吧?
【在 s*********t 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 那跟上样环有关系吗?能用1ml的上样环上200ul样品吗? : 我手头只有100ul和1ml两个上样环
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s*********t 发帖数: 600 | 5 好像明白。上样环都是先用buffer洗过的,里面充满buffer的。
就是说随便往上样环里面注入多少样品,只要不超过柱体积和上样环的体积,都是可以
的,对吧?
比如,如果是100ul的上样环,注入200ul样品就不行了吧?反过来,1ml的,可以随便
上样1ml以下的样品,对吧?
周末了,实验室一个人也没有,只有我在苦逼的过柱子,找不到人请教 。。。
谢谢sunnyday老师指点!
【在 s******y 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 哦!原来你是这个意思啊! : 那没有问题,就是注入的时候要小心产生泡泡 : 另外,如果你不明白我的意思的话,我的意思是上样环里不应该是空的, : 而是一开始就应该在洗完之后注射进满满的缓冲液,所以反正你本来 : 就不是对一个空的上样环来注射的。明白我的意思了吧?
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s******y 发帖数: 28562 | 6 对的,因为假如是100ul的上样环,注入200ul样品的话就会有100流到废液
里面去了。所以在你的情况下只好用1ml的环了。
有的人会采用先注射100ul,上得差不多之后停止走柱再来100ul,
但是这种方法很不好掌握,我强烈不建议。
最后,一般原则是注入体积尽可能要和环的大小接近,比方说如果你只有50ul
的话,如果用1ml的环,在注入过程中就会由于液面的扰动而被稀释。
【在 s*********t 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 好像明白。上样环都是先用buffer洗过的,里面充满buffer的。 : 就是说随便往上样环里面注入多少样品,只要不超过柱体积和上样环的体积,都是可以 : 的,对吧? : 比如,如果是100ul的上样环,注入200ul样品就不行了吧?反过来,1ml的,可以随便 : 上样1ml以下的样品,对吧? : 周末了,实验室一个人也没有,只有我在苦逼的过柱子,找不到人请教 。。。 : 谢谢sunnyday老师指点!
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s*********t 发帖数: 600 | 7 明白了! sunnyday老师真是好人啊!!!
【在 s******y 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 对的,因为假如是100ul的上样环,注入200ul样品的话就会有100流到废液 : 里面去了。所以在你的情况下只好用1ml的环了。 : 有的人会采用先注射100ul,上得差不多之后停止走柱再来100ul, : 但是这种方法很不好掌握,我强烈不建议。 : 最后,一般原则是注入体积尽可能要和环的大小接近,比方说如果你只有50ul : 的话,如果用1ml的环,在注入过程中就会由于液面的扰动而被稀释。
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