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- 请问板上做病毒的大牛
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1
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d**********2
发帖数: 103
1
小弟有点问题想向各位大牛请教:
小弟在用利用LENTIVIRUS在细胞里面过表达一个蛋白。
用得载体是LV-CMV-GFP, 包装载体是CMV-VSVG 和pHR`-CMV-R8.20-Vpr.
现在的问题在于,可以成功拿到表达GFP的病毒,但是拿不到能表达我的蛋白(GFP
fusion)的病毒(被感染的细胞没有GFP荧光信号)。
我在制造病毒的时候,我知道我的蛋白表达得很好(有特定得PATTERN, 荧光信号也很
强),所以应该是CONSTRUCT应该没有问题。问题可能在于我得蛋白会引起细胞凋亡而
影响病毒得产生和包装,但是我有相应的 non-toxic 的点突变,但是我也无法拿到表
达这个点突变基因的病毒。。。所以比较迷茫,想问问大牛们有啥好的解决方法。。。
。(基因不大,才700多BP。。。)
谢谢!!
d*p
发帖数: 534
2
换一个诱导性的Promoter.
1
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