g***j 发帖数: 40861 | 1 怎么以前可以做出来,现在出不来了
同样的program 同样的底物 |
I***a 发帖数: 13467 | 2 放久了,扩不出来也正常,
有时候就是引物没问题,其他条件一样,扩不出来,也不少见。 |
r******y 发帖数: 21907 | 3 放哪儿了?我4度1年的都没问题。。。
【在 g***j 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 怎么以前可以做出来,现在出不来了 : 同样的program 同样的底物
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g***j 发帖数: 40861 | 4 零下20度
也许反复冻融的问题
【在 r******y 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 放哪儿了?我4度1年的都没问题。。。
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r******y 发帖数: 21907 | 5 我一般常用的就放4度没问题的
【在 g***j 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 零下20度 : 也许反复冻融的问题
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e****s 发帖数: 1125 | 6 我们实验室差不多10年的primers都还在用。都是-20保存的。 |
m*****z 发帖数: 1451 | 7 至于吗
10年。。。
【在 e****s 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 我们实验室差不多10年的primers都还在用。都是-20保存的。
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m**********g 发帖数: 24 | |
c**********e 发帖数: 230 | 9 我们实验室的人说的, 恐龙的dna都还在呢, dna很tough. primer有那么容易降解吗?
呵呵 |
w******n 发帖数: 767 | 10 其他问题排除了吗? 确定是primer问题?
【在 g***j 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 怎么以前可以做出来,现在出不来了 : 同样的program 同样的底物
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s******s 发帖数: 13035 | 11 一般不太可能,尤其是在TE里面。
【在 g***j 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 怎么以前可以做出来,现在出不来了 : 同样的program 同样的底物
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s******s 发帖数: 13035 | 12 你以前同样的做法如果比较难p,现在出不来很正常,rp问题
【在 g***j 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 怎么以前可以做出来,现在出不来了 : 同样的program 同样的底物
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m*****z 发帖数: 1451 | 13 我有碰到primer放在室温2个月不work了的
害我trouble shooting了好几天
【在 c**********e 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 我们实验室的人说的, 恐龙的dna都还在呢, dna很tough. primer有那么容易降解吗? : 呵呵
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g***j 发帖数: 40861 | 14 也许
不过底物还是原来的底物
master mix 还是原来的牌子
其实不算难P
现在引物降解点,底物降解点,酶失活点,就P不出来的
原来引物我都是放TE里,然后分出一点来放4度用
后来懒了,放水里,也不分了,都放-20,用时手搓化,反复冻融估计有伤害
【在 s******s 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 你以前同样的做法如果比较难p,现在出不来很正常,rp问题
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s******s 发帖数: 13035 | 15 放水这个习惯很不好.
【在 g***j 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 也许 : 不过底物还是原来的底物 : master mix 还是原来的牌子 : 其实不算难P : 现在引物降解点,底物降解点,酶失活点,就P不出来的 : 原来引物我都是放TE里,然后分出一点来放4度用 : 后来懒了,放水里,也不分了,都放-20,用时手搓化,反复冻融估计有伤害
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