i******w
发帖数: 407 | 1 lp是做蛋白的，总是要在4度冷室里跑column，我就没想明白，为啥蛋白在37度的细胞
里没事，却在30度的试管里就变性了？这都神马原因啊？ |
x**2
发帖数: 255 | 2 有些蛋白和其他蛋白结合后更稳定
有些蛋白在特定盐浓度条件下更稳定
其他的大家补充，谢谢～ |
b******n
发帖数: 4225 | 3 在细胞中，很有一些别的因子（比如盐浓度，还原剂，蛋白partner或者chaperone）
能帮助稳定蛋白
另外在低温protease也不会那么生猛
【在 i******w 的大作中提到】
: lp是做蛋白的，总是要在4度冷室里跑column，我就没想明白，为啥蛋白在37度的细胞
: 里没事，却在30度的试管里就变性了？这都神马原因啊？
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s******y
发帖数: 28562 | 4 细胞里面的蛋白有各种各样的条件保护着，比方说chaperonin,以及大量的其他蛋白，
所以一个单独的蛋白品种不是那么容易变性，而且细胞里的蛋白是在不停地合成中的，
变性后的东西很快就会被清除掉。
但是在试管里的东西就没有这些保护所以会比较脆弱。而且一旦某个蛋白在体外变性了
，因为没有体内的清除机制，很容易就造成沉淀，然后导致那些本来没有变性的蛋白也
出于疏水力的作用而共沉淀下来。
【在 i******w 的大作中提到】
: lp是做蛋白的，总是要在4度冷室里跑column，我就没想明白，为啥蛋白在37度的细胞
: 里没事，却在30度的试管里就变性了？这都神马原因啊？
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C*********m
发帖数: 213 | 5
【在 i******w 的大作中提到】
: lp是做蛋白的，总是要在4度冷室里跑column，我就没想明白，为啥蛋白在37度的细胞
: 里没事，却在30度的试管里就变性了？这都神马原因啊？
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C*********m
发帖数: 213 | 6 我们这里有位老兄认为应该在室温下提蛋白,做得还蛮好的.
【在 i******w 的大作中提到】
: lp是做蛋白的，总是要在4度冷室里跑column，我就没想明白，为啥蛋白在37度的细胞
: 里没事，却在30度的试管里就变性了？这都神马原因啊？
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b******y
发帖数: 627 | 7 Most proteins are most stable, i.e. with highest population at the native
state, at 4 degree. That is the biggest reason why. There are exceptions,
for example, cold sensitive proteins become unstable at low temperatures.
If your favorite proteins are very stable regardless, you can purify them at
room temperature. |
e****s
发帖数: 1125 | |
