怎样除掉酶反应混合物里的自由ATP? - Biology版 - 未名存档

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Biology版 - 怎样除掉酶反应混合物里的自由ATP?

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话题: atp话题: 磷酸化话题: 混合物话题: 蛋白话题: 反应

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e********r 发帖数: 147	1 最近用同位素做蛋白磷酸化实验，需要把混合物中的ATP去除，但保留里面被磷酸化的蛋白，请教有什么样的柱子或者纯化方法可以干这件事？GE的ProbeQuant G-50能行不？还是要用超滤管，感觉后面这个太花时间，酶的半衰期短不行啊。谢谢
e****s 发帖数: 1125	2 分小分子和蛋白，分子筛当然是首选。想快速和简单的话，弄个脱盐柱就好了。有很多的离心或者针筒式脱盐柱子，几分钟就搞定了。
k******0 发帖数: 1073	3 用TCA沉淀蛋白质和同时终止磷酸化反应。
e********r 发帖数: 147	4 这个不好使吧，才20ul的体系，TCA损失大，而且不好溶？用TCA沉淀蛋白质和同时终止磷酸化反应。

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