g***j 发帖数: 40861 | 1 现在我有两种细菌,最终要把他们放在一个系统里。
现在想一个用gfp标记,请问另一个用什么好(用于标记大肠杆菌)?
我试了一下dsred 标记大肠杆菌,感觉不好,信号太弱。
另外最好是标记在染色体上。
谢谢! |
g***j 发帖数: 40861 | 2 mTFP1 这个有人用过标记大肠杆菌或者沙门使君没,如何? |
g***j 发帖数: 40861 | 3 标记沙门氏菌的时候,我试过质粒标记的也试过染色体标记的。
转化以后,菌落肉眼看就很红。
可是镜下单个细胞却看不到红色荧光,只有当细菌聚成一团的时候才能看到一点红光。
这是怎么回事。 |
b******n 发帖数: 4225 | 4 什么启动子啊?
找一个强一点的启动子比较好
【在 g***j 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 标记沙门氏菌的时候,我试过质粒标记的也试过染色体标记的。 : 转化以后,菌落肉眼看就很红。 : 可是镜下单个细胞却看不到红色荧光,只有当细菌聚成一团的时候才能看到一点红光。 : 这是怎么回事。
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c*******0 发帖数: 190 | |
g***j 发帖数: 40861 | 6 谢谢
顶起求更多建议
【在 c*******0 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 用mCherry
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u**********d 发帖数: 573 | 7 好吧,把几个cherry连成一串!
【在 g***j 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 谢谢 : 顶起求更多建议
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I***a 发帖数: 13467 | |
m*****j 发帖数: 144 | 9 强启动子很重要,我试了一些,才发现比较强的
我用的是mOrange,信号很强在e.coli中,唯一问题是蛋白成熟需要更多的时间,你可以
去官网下载使用说明书,上面有很详细的资料说明
【在 g***j 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 谢谢 : 顶起求更多建议
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h**********r 发帖数: 671 | 10 td-Tomato和mcherry都可以,用tac或者trc promoter都可以,不想用IPTG诱导的话,
去掉或者破坏lacI
可以看看这个AEM
Broad-Host-Range Plasmids for Red Fluorescent Protein Labeling of
Gram-Negative Bacteria for Use in the Zebrafish Model System
APPLIED AND ENVIRONMENTAL MICROBIOLOGY, June 2010, p. 3467–3474 Vol. 76, No
. 11
doi:10.1128/AEM.01679-09 |