g***j
发帖数: 40861 | 1 现在我有两种细菌，最终要把他们放在一个系统里。
现在想一个用gfp标记，请问另一个用什么好（用于标记大肠杆菌）？
我试了一下dsred 标记大肠杆菌，感觉不好，信号太弱。
另外最好是标记在染色体上。
谢谢！ |
g***j
发帖数: 40861 | 2 mTFP1 这个有人用过标记大肠杆菌或者沙门使君没，如何？ |
g***j
发帖数: 40861 | 3 标记沙门氏菌的时候，我试过质粒标记的也试过染色体标记的。
转化以后，菌落肉眼看就很红。
可是镜下单个细胞却看不到红色荧光，只有当细菌聚成一团的时候才能看到一点红光。
这是怎么回事。 |
b******n
发帖数: 4225 | 4 什么启动子啊？
找一个强一点的启动子比较好
【在 g***j 的大作中提到】
: 标记沙门氏菌的时候，我试过质粒标记的也试过染色体标记的。
: 转化以后，菌落肉眼看就很红。
: 可是镜下单个细胞却看不到红色荧光，只有当细菌聚成一团的时候才能看到一点红光。
: 这是怎么回事。
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c*******0
发帖数: 190 | |
g***j
发帖数: 40861 | 6 谢谢
顶起求更多建议
【在 c*******0 的大作中提到】
: 用mCherry
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u**********d
发帖数: 573 | 7 好吧，把几个cherry连成一串！
【在 g***j 的大作中提到】
: 谢谢
: 顶起求更多建议
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I***a
发帖数: 13467 | |
m*****j
发帖数: 144 | 9 强启动子很重要，我试了一些，才发现比较强的
我用的是mOrange,信号很强在e.coli中，唯一问题是蛋白成熟需要更多的时间，你可以
去官网下载使用说明书，上面有很详细的资料说明
【在 g***j 的大作中提到】
: 谢谢
: 顶起求更多建议
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h**********r
发帖数: 671 | 10 td-Tomato和mcherry都可以，用tac或者trc promoter都可以，不想用IPTG诱导的话，
去掉或者破坏lacI
可以看看这个AEM
Broad-Host-Range Plasmids for Red Fluorescent Protein Labeling of
Gram-Negative Bacteria for Use in the Zebrafish Model System
APPLIED AND ENVIRONMENTAL MICROBIOLOGY, June 2010, p. 3467–3474 Vol. 76, No
. 11
doi:10.1128/AEM.01679-09 |
