a*******g
发帖数: 33 | 1 大家好，我在做老鼠关节炎模型，需要提取RNA,但是不理想。有没人做过这个可以分析
下经验的？谢谢我先把踝关节剪下 （长1cm左右），然后液氮冷冻，放－80保存。裂解
是用Roche的Megbead，RNA提取是按照Qiagen的纤维组织RNA提取Kit。没有做DNase消化
。用Agilent2100检测，很多样品只有很粗的一条带，在18s band附近，估计是genomic
DNA? |
x*****d
发帖数: 704 | 2 Qiagen Fibrous Tissue kit自带一个小的DNase kit，要做DNase digest的。你的RIN
多少？ 也有可能是有降解。 |
a*******g
发帖数: 33 | 3 最好的一个是8.4，很多都无法计算，只有一条带
RIN
【在 x*****d 的大作中提到】
: Qiagen Fibrous Tissue kit自带一个小的DNase kit，要做DNase digest的。你的RIN
: 多少？ 也有可能是有降解。
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p***y
发帖数: 162 | 4 RIN8.4的应该没什么问题
其他的应该就是RNA降解了吧
如果你只是做RT-PCR的话，可能还能用 |
a*******g
发帖数: 33 | 5 是能用，可是CT值比较高，30-40，这样RNA降解后的结果可信吗？ |
x*****d
发帖数: 704 | 6
一般RIN 7以上就可以了. 你这个只有一条带也有可能是Agilent的Chip有问题. 要是怕
降解就用RNA Later ICE试试.
【在 a*******g 的大作中提到】
: 最好的一个是8.4，很多都无法计算，只有一条带
:
: RIN
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