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Biology版 - 蛋白interaction一定要证明是independent of DNA吗?
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话题: dna话题: 要证话题: 蛋白话题: 明是
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k*******n
发帖数: 21
1
一个技术问题,蛋白interaction一定要证明是independent of DNA吗? 老板一定要我
做这个,我看好多文章都没有解决这个问题。
我粗略做了以下,我找到的interaction好像经过et bromide处理过后就没有了。
现在很头疼的在想这个问题,是不是这个project就死了? 没有必要往下做了?
谢谢您给出的任何建议,评论!
a*****n
发帖数: 2835
2
体外用纯蛋白做

【在 k*******n 的大作中提到】
: 一个技术问题,蛋白interaction一定要证明是independent of DNA吗? 老板一定要我
: 做这个,我看好多文章都没有解决这个问题。
: 我粗略做了以下,我找到的interaction好像经过et bromide处理过后就没有了。
: 现在很头疼的在想这个问题,是不是这个project就死了? 没有必要往下做了?
: 谢谢您给出的任何建议,评论!

g*****n
发帖数: 250
3
研究跟DNA有关系的蛋白(如转录,复制,修复等),这个问题还是有必要回答。技术
上应该是可行的。
k*******n
发帖数: 21
4
非常感谢各位的意见! 明白了。
a*******a
发帖数: 4233
5
是需要的, 我老板要求做核蛋白的ip需要用DNAse处理。
不然可能会出现假阳性,两个蛋白都bind在一个nucleosome上,其实并没有
interaction
d*******s
发帖数: 24
6
all depends on the method of detecting protein protein interaction. If you
extract protein first and detect interaction later, you will be fine. If you
included DNA component in interaction reaction, you should be careful.
t*****2
发帖数: 213
7

正解

【在 a*******a 的大作中提到】
: 是需要的, 我老板要求做核蛋白的ip需要用DNAse处理。
: 不然可能会出现假阳性,两个蛋白都bind在一个nucleosome上,其实并没有
: interaction

t**l
发帖数: 109
8
用DNASE处理,我读过一篇paper,他们也做了这个处理,然后说明这个interaction是不
需要DNA的。
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怎么知道一个蛋白在不在细胞核里表达?求教关于学习structure biology 和 protein-protein interaction, 多谢各位老师了
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Re: 请问用什么方法证明蛋白与蛋白的直接作用?怎么从本质上确定一个蛋白确实是一个transcription factor? 跪求大牛帮忙
ITC什么方法可以知道一个DNA片段上的全部protein
两个蛋白相互作用dependent on DNA?请教DNase
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