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- 求助:如何回答审稿人关于纯化获得可溶、膜蛋白的意外收获?
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求助:如何回答审稿人关于纯化获得可溶、膜蛋白的意外收获?
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再问基因克隆纯化蛋白后蛋白质分子量不对的问题。
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求助:如何回答审稿人关于纯化获得可溶、膜蛋白的意外收获?
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请教纯化His-Tag蛋白的beads
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问一个蛋白表达的问题,实在是想不通了
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膜蛋白做Western Blot需要去掉N端糖基?
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6xHis-Tag融合蛋白不吸附Ni柱,求建议.做蛋白和解结构的比较容易解答我的问题
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打抗体用的HIS-FUSION蛋白需要透析掉尿素吗?
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Ni-NTA亲和层析柱纯化蛋白的问题
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Re: His tag的蛋白质不能纯化, 救命
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从纯化到星辰---CSH蛋白质纯化课侧记(十六)
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分离蛋白的那个白色小柱子叫什么?
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话题: 纯化
话题: 膜蛋白
话题: 可溶
话题: 审稿人
话题: 蛋白
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1
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e********r
发帖数: 147
1
我们用最常用His tag + Ni-NTA(未加detergent)纯化到了一个可溶的细菌膜蛋白(
pET30a, 两个跨膜区)。虽然量很少,但有活性。Western blot和MS都鉴定该蛋白是正
确的。我们用这个蛋白做了论文里所有的实验。诱导条件是12度,24小时,0.5 mM
IPTG。
论文审稿后问题不大,但有个审稿意见让我们说明一下是“怎么纯化得到膜蛋白的”。
我猜专家是做蛋白结构的所以觉得很意外,但我怎么回答他比较合适呢?总不能说“我
纯化到了,所以我纯化到了吧”,这样审稿人会发怒滴,呵呵。请各位给个合理的建议
,谢谢。
1
(共1页)
进入Biology版参与讨论
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分离蛋白的那个白色小柱子叫什么?
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Ni-NTA亲和层析柱纯化蛋白的问题
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关于IPTG诱导蛋白。
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OD600>1.5是什么状况
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有用BL21(DE3 pLysS)表达蛋白的吗?
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Re: His tag的蛋白质不能纯化, 救命
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求助!GST-Pull down 一大小约130KD的蛋白!!!
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从纯化到星辰---CSH蛋白质纯化课侧记(十六)
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再问基因克隆纯化蛋白后蛋白质分子量不对的问题。
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