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Biology版 - 求助:如何回答审稿人关于纯化获得可溶、膜蛋白的意外收获?
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话题: 纯化话题: 膜蛋白话题: 可溶话题: 审稿人话题: 蛋白
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e********r
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我们用最常用His tag + Ni-NTA(未加detergent)纯化到了一个可溶的细菌膜蛋白(
pET30a, 两个跨膜区)。虽然量很少,但有活性。Western blot和MS都鉴定该蛋白是正
确的。我们用这个蛋白做了论文里所有的实验。诱导条件是12度,24小时,0.5 mM
IPTG。
论文审稿后问题不大,但有个审稿意见让我们说明一下是“怎么纯化得到膜蛋白的”。
我猜专家是做蛋白结构的所以觉得很意外,但我怎么回答他比较合适呢?总不能说“我
纯化到了,所以我纯化到了吧”,这样审稿人会发怒滴,呵呵。请各位给个合理的建议
,谢谢。
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分离蛋白的那个白色小柱子叫什么?Ni-NTA亲和层析柱纯化蛋白的问题
关于IPTG诱导蛋白。OD600>1.5是什么状况
有用BL21(DE3 pLysS)表达蛋白的吗?Re: His tag的蛋白质不能纯化, 救命
求助!GST-Pull down 一大小约130KD的蛋白!!!从纯化到星辰---CSH蛋白质纯化课侧记(十六)
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