m******g
发帖数: 467 | 1 暂时觉得PfuUltra High-Fidelity还不错，基本打算用这个。不知道大家有没有其他比
较推荐的。
fidelity第一，efficiency第二。谢谢大家的回答！ |
x********e
发帖数: 35261 | 2 phusion
【在 m******g 的大作中提到】
: 暂时觉得PfuUltra High-Fidelity还不错，基本打算用这个。不知道大家有没有其他比
: 较推荐的。
: fidelity第一，efficiency第二。谢谢大家的回答！
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w*e
发帖数: 740 | 3 Q5
【在 x********e 的大作中提到】
: phusion
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s******r
发帖数: 1245 | 4 kapa hifi
【在 m******g 的大作中提到】
: 暂时觉得PfuUltra High-Fidelity还不错，基本打算用这个。不知道大家有没有其他比
: 较推荐的。
: fidelity第一，efficiency第二。谢谢大家的回答！
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r******g
发帖数: 600 | |
m******g
发帖数: 467 | 6 Product 是100bp左右。
感谢大家的回答！
【在 r******g 的大作中提到】
: PCR produce有多大？
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r******g
发帖数: 600 | 7 platinum hifi taq works really well in my 260bp cloning |
b*****s
发帖数: 169 | 8 Pfx50, 是Taq的50x,是我见到最高的。
常用的pfu 是Taq的6x |
b*****s
发帖数: 169 | |
l***y
发帖数: 638 | 10 普通100bp的cloning随便用个渣taq都没啥问题，长片段或者高GC的才考虑搞个好酶
【在 m******g 的大作中提到】
: Product 是100bp左右。
: 感谢大家的回答！
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o*****4
发帖数: 1245 | |
m******g
发帖数: 467 | 12 不是P不P得出来的问题，我是有很多100BP的片段，需要PCR之后测序看看序列，所以希
望精确度很好，不然就容易弄不清实际的序列。 |
x********e
发帖数: 35261 | 13 100bp内突变率很低的 就算Taq精确度也差不到哪去
说到底fidelity都是看概率，你才100个碱基，要p多少个cycle才出一个错啊
【在 m******g 的大作中提到】
: 不是P不P得出来的问题，我是有很多100BP的片段，需要PCR之后测序看看序列，所以希
: 望精确度很好，不然就容易弄不清实际的序列。
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j****x
发帖数: 1704 | 14 phusion号称>50，Q5号称>100
【在 b*****s 的大作中提到】
: Pfx50, 是Taq的50x,是我见到最高的。
: 常用的pfu 是Taq的6x
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p**********t
发帖数: 2636 | 15 PCR的时候尽量减少cycle number，extension temperature不用72度，用65度，也可以
增加fidelity的。
还有，如果你用的是non-model organism有些high fidelity的酶会莫名其妙地不work
。最好要一小管sample试试再说
【在 m******g 的大作中提到】
: 暂时觉得PfuUltra High-Fidelity还不错，基本打算用这个。不知道大家有没有其他比
: 较推荐的。
: fidelity第一，efficiency第二。谢谢大家的回答！
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M******g
发帖数: 152 | |
