b*****n
发帖数: 1841 | 1 上网查了一些内容，发现相当一部分人推荐用DNase处理样品。
我想能否在Trizol抽提中加chloroform离心后的水相中加DNase，然后再加0.5ml
Trizol杀灭和去除DNase。
不确定水相中的成分，DNase的活性如何，再用少量Trizol抽提是否能把DNase去除干净。
或者用isopropanol沉淀后再加Dnase处理，再用Trizol去除DNase？这样沉淀的步骤对
RNA的损失比较大。
请大家发表一下意见。 |
x*****e
发帖数: 309 | 2 其实更应该担心是ＤＮＡａｓｅ能否起作用，如何检测ＤＮａｓｅ起作用。有时候问半
天还不如自己做一下，生命短暂，用ｋｉｔ吧，尤其是你的样品是用来做ＲＮＡ-seq。
净。
【在 b*****n 的大作中提到】
: 上网查了一些内容，发现相当一部分人推荐用DNase处理样品。
: 我想能否在Trizol抽提中加chloroform离心后的水相中加DNase，然后再加0.5ml
: Trizol杀灭和去除DNase。
: 不确定水相中的成分，DNase的活性如何，再用少量Trizol抽提是否能把DNase去除干净。
: 或者用isopropanol沉淀后再加Dnase处理，再用Trizol去除DNase？这样沉淀的步骤对
: RNA的损失比较大。
: 请大家发表一下意见。
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s******s
发帖数: 13035 | 3 你trizol, chloroform污染过的水相，DNase不太可能有活性。
反正我都是用kit的。。。
净。
【在 b*****n 的大作中提到】
: 上网查了一些内容，发现相当一部分人推荐用DNase处理样品。
: 我想能否在Trizol抽提中加chloroform离心后的水相中加DNase，然后再加0.5ml
: Trizol杀灭和去除DNase。
: 不确定水相中的成分，DNase的活性如何，再用少量Trizol抽提是否能把DNase去除干净。
: 或者用isopropanol沉淀后再加Dnase处理，再用Trizol去除DNase？这样沉淀的步骤对
: RNA的损失比较大。
: 请大家发表一下意见。
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b*****n
发帖数: 1841 | 4 今天试了一下，这样处理genome DNA全部去除干净，除了RNA量有点损失外，其它一切
都好。
【在 s******s 的大作中提到】
: 你trizol, chloroform污染过的水相，DNase不太可能有活性。
: 反正我都是用kit的。。。
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: 净。
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