g*****n 发帖数: 241 | 1 RT,我用FLAG beads(M2) IP了我的蛋白,结果跑WB之后蛋白对应的带只被蛋白自己的
抗体认,却不被anti-FLAG认?请问大概是什么原因?
谢谢 |
H****s 发帖数: 301 | 2 你的蛋白是用FLAG多肽洗下来的吧,然后有没有做dialysis?如果蛋白样品里有大量的
FLAG多肽的话,你的抗FLAG多肽抗体没有机会去和蛋白上的FLAG结合。
【在 g*****n 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : RT,我用FLAG beads(M2) IP了我的蛋白,结果跑WB之后蛋白对应的带只被蛋白自己的 : 抗体认,却不被anti-FLAG认?请问大概是什么原因? : 谢谢
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f**u 发帖数: 346 | 3 如果是像你说的这种情况,那在泳道最下面应该有很强的信号才对。如果没有,说明
FLAG已经跑出去了,也不会影响抗体和蛋白结合吧。 |
H****s 发帖数: 301 | 4 你跑个胶试试就知道了。
【在 f**u 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 如果是像你说的这种情况,那在泳道最下面应该有很强的信号才对。如果没有,说明 : FLAG已经跑出去了,也不会影响抗体和蛋白结合吧。
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i***l 发帖数: 1656 | 5 生物实验讨厌的一点就是:没出结果,狂找原因,各种原因。
其中有生物本身的因素,也有试验设计的因素,每一步都有正负对照么?大概的原因枚
举法能有一二十个,你都试试?还是挑顺眼的试试?怎知挑的对?
【在 g*****n 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : RT,我用FLAG beads(M2) IP了我的蛋白,结果跑WB之后蛋白对应的带只被蛋白自己的 : 抗体认,却不被anti-FLAG认?请问大概是什么原因? : 谢谢
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