g*****n
发帖数: 241 | 1 RT，我用FLAG beads(M2) IP了我的蛋白，结果跑WB之后蛋白对应的带只被蛋白自己的
抗体认，却不被anti-FLAG认？请问大概是什么原因？
谢谢 |
H****s
发帖数: 301 | 2 你的蛋白是用FLAG多肽洗下来的吧，然后有没有做dialysis？如果蛋白样品里有大量的
FLAG多肽的话，你的抗FLAG多肽抗体没有机会去和蛋白上的FLAG结合。
【在 g*****n 的大作中提到】
: RT，我用FLAG beads(M2) IP了我的蛋白，结果跑WB之后蛋白对应的带只被蛋白自己的
: 抗体认，却不被anti-FLAG认？请问大概是什么原因？
: 谢谢
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f**u
发帖数: 346 | 3 如果是像你说的这种情况，那在泳道最下面应该有很强的信号才对。如果没有，说明
FLAG已经跑出去了，也不会影响抗体和蛋白结合吧。 |
H****s
发帖数: 301 | 4 你跑个胶试试就知道了。
【在 f**u 的大作中提到】
: 如果是像你说的这种情况，那在泳道最下面应该有很强的信号才对。如果没有，说明
: FLAG已经跑出去了，也不会影响抗体和蛋白结合吧。
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i***l
发帖数: 1656 | 5 生物实验讨厌的一点就是：没出结果，狂找原因，各种原因。
其中有生物本身的因素，也有试验设计的因素，每一步都有正负对照么？大概的原因枚
举法能有一二十个，你都试试？还是挑顺眼的试试？怎知挑的对？
【在 g*****n 的大作中提到】
: RT，我用FLAG beads(M2) IP了我的蛋白，结果跑WB之后蛋白对应的带只被蛋白自己的
: 抗体认，却不被anti-FLAG认？请问大概是什么原因？
: 谢谢
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