i********y
发帖数: 23 | 1 想问下，如果用普通表达蛋白的plasmid去表达microRNA或者lincRNA，怎么确保最后不
表达出来一个蛋白？是不是需要用一个特殊的plasmid，例如没有ribosomal binding
sequence或者没有其他帮助表达蛋白的sequence?
第二个问题是怎么确保transcription termination? 或者说怎么确保表达出来的
lincRNA最后没有多出来个小尾巴？
希望这方面有经验的大牛能够帮帮忙。如果有什么关于表达lincRNA其他需要注意的地
方也请指教。谢谢。 |
b******c
发帖数: 27 | 2 try U6 and its terminator, or H1 |
i********y
发帖数: 23 | |
l***s
发帖数: 841 | 4 只是给microRNA等小RNA的PolIII promoter。长的lncRNA, 还是要用PolII promoter,
像mRNA一样。
【在 b******c 的大作中提到】
: try U6 and its terminator, or H1
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l***s
发帖数: 841 | 5 lncRNA当作mRNA polII就行了。也有polyA。 至于miRNA，用polIII的termination
signal.目前的vector都设计好了，直接用就行。
【在 i********y 的大作中提到】
: 想问下，如果用普通表达蛋白的plasmid去表达microRNA或者lincRNA，怎么确保最后不
: 表达出来一个蛋白？是不是需要用一个特殊的plasmid，例如没有ribosomal binding
: sequence或者没有其他帮助表达蛋白的sequence?
: 第二个问题是怎么确保transcription termination? 或者说怎么确保表达出来的
: lincRNA最后没有多出来个小尾巴？
: 希望这方面有经验的大牛能够帮帮忙。如果有什么关于表达lincRNA其他需要注意的地
: 方也请指教。谢谢。
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i********y
发帖数: 23 | 6 谢谢楼上各位。我是楼主。我们实验室有个retrovirus的载体。但是这个载体是给一般
普通的gene用的（i.e. protein-coding gene).我就想确认一下，如果用这个载体来表
达lincRNA,应该没什么问题吧？ |
l***s
发帖数: 841 | 7 应该可以。
【在 i********y 的大作中提到】
: 谢谢楼上各位。我是楼主。我们实验室有个retrovirus的载体。但是这个载体是给一般
: 普通的gene用的（i.e. protein-coding gene).我就想确认一下，如果用这个载体来表
: 达lincRNA,应该没什么问题吧？
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