x****6 发帖数: 4339 | 1 从编辑对DNA的效果来看,可以分为 敲除(knock-out)和 敲入(knock-in)。
敲除,故名思意就是让目标基因失去功能。这个相对容易实现。因为基因经过长期的进
化出来的精细结构,随机的删除或者添加几个碱基对(生物里的0 1)就能让目标基因
失效。
如何实现?CAS9或者其他的核酸酶,在破坏DNA双链以后,细胞会自动修复损伤。这个
修复的机制叫做非同源性末端连接(Non-homology end joining,NHEJ)。就是直接把
绳子断开的两端直接连接回去。但是这个过程不精确,大概率的会随机造成几个碱基对
的删除或者添加。那么正好就可以让基因失效。
这就是贺所采取的手段:基因敲除。
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第二种,敲入。和敲除相反,把一段给定的DNA序列精确的整合进入目标基因组位点。
精确是这里的关键词。敲入的结果就是编辑以后的目标基因的新序列和预先设计的要一
模一样,这就和 随机 的“敲除”形成鲜明对比。显然,敲入 要比敲除 更牛逼:你想
要什么就有什么,而不是靠运气。
如何实现?同样的,用CAS9或者其他的核酸酶切断DNA双链以后,如果同时,细胞里还
有一段人工转入的特殊DNA片段。它携带精确的新序列,并且头尾都和基因组目标位点
的序列重合。这个时候,细胞会通过一种叫做双链破损修复(double strand break
repair,DSBR)的机制来回复DNA的完整性。这个机制会把那段特殊DNA当作补丁打到断
裂的基因组DNA上,从而把断口连接起来。结果就是 人工设计的序列被精确的“写入”
了目标基因组位点。
当然,这个牛逼的方法的效率跟前面一个比起来,低很多(~100倍?)。
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回到He的工作,
他用 基因敲除 把CCR5的原始功能去除了,和文献报道的CCR5_delta32的突变属于同以
类型的突变。而现在剩下来的问题的是:
CCR5_delta32和 LULU, NANA所携带的CCR5突变 虽然都因为不能表达出CCR5原始蛋白而
对HIV(的
一种亚型)形成免疫;但是它们都还是会表达蛋白质产物。CCR5_delta32的产物似乎对
欧洲人没有什么影响。而LULU,NANA突变的CCR5会表达不同产物,这些“新”产物对人
体的影响是什么? 我们只能等LULU NANA来告诉我们。
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我个人的猜测是,她们的这些“新产物”应该和CCR5_delta32的产物一样,不会对人体
有太大影响。
我觉得真正的问题在于,那些脱靶的、还未知的突变将会造成什么影响。 |
m*******k 发帖数: 839 | 2 CCR5原始蛋白除了跟HIV结合外还有没有什么已知的功能?
【在 x****6 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 从编辑对DNA的效果来看,可以分为 敲除(knock-out)和 敲入(knock-in)。 : 敲除,故名思意就是让目标基因失去功能。这个相对容易实现。因为基因经过长期的进 : 化出来的精细结构,随机的删除或者添加几个碱基对(生物里的0 1)就能让目标基因 : 失效。 : 如何实现?CAS9或者其他的核酸酶,在破坏DNA双链以后,细胞会自动修复损伤。这个 : 修复的机制叫做非同源性末端连接(Non-homology end joining,NHEJ)。就是直接把 : 绳子断开的两端直接连接回去。但是这个过程不精确,大概率的会随机造成几个碱基对 : 的删除或者添加。那么正好就可以让基因失效。 : 这就是贺所采取的手段:基因敲除。 : -------------------------------
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x****6 发帖数: 4339 | 3 失效以后,让人更容易感染流感/
【在 m*******k 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : CCR5原始蛋白除了跟HIV结合外还有没有什么已知的功能?
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T*******x 发帖数: 8565 | 4 不错。
【在 x****6 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 从编辑对DNA的效果来看,可以分为 敲除(knock-out)和 敲入(knock-in)。 : 敲除,故名思意就是让目标基因失去功能。这个相对容易实现。因为基因经过长期的进 : 化出来的精细结构,随机的删除或者添加几个碱基对(生物里的0 1)就能让目标基因 : 失效。 : 如何实现?CAS9或者其他的核酸酶,在破坏DNA双链以后,细胞会自动修复损伤。这个 : 修复的机制叫做非同源性末端连接(Non-homology end joining,NHEJ)。就是直接把 : 绳子断开的两端直接连接回去。但是这个过程不精确,大概率的会随机造成几个碱基对 : 的删除或者添加。那么正好就可以让基因失效。 : 这就是贺所采取的手段:基因敲除。 : -------------------------------
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g******y 发帖数: 1 | 5 这段基因从胚胎发育到成人各个阶段的功能都了解清楚了吗?
最怕一知半解的想当然,造成不可挽回的后果 |
x****6 发帖数: 4339 | 6 完全不清楚,至少目前来看,至少不影响小孩出生。
【在 g******y 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 这段基因从胚胎发育到成人各个阶段的功能都了解清楚了吗? : 最怕一知半解的想当然,造成不可挽回的后果
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x********e 发帖数: 35261 | 7 第一句话就错了
【在 x****6 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 从编辑对DNA的效果来看,可以分为 敲除(knock-out)和 敲入(knock-in)。 : 敲除,故名思意就是让目标基因失去功能。这个相对容易实现。因为基因经过长期的进 : 化出来的精细结构,随机的删除或者添加几个碱基对(生物里的0 1)就能让目标基因 : 失效。 : 如何实现?CAS9或者其他的核酸酶,在破坏DNA双链以后,细胞会自动修复损伤。这个 : 修复的机制叫做非同源性末端连接(Non-homology end joining,NHEJ)。就是直接把 : 绳子断开的两端直接连接回去。但是这个过程不精确,大概率的会随机造成几个碱基对 : 的删除或者添加。那么正好就可以让基因失效。 : 这就是贺所采取的手段:基因敲除。 : -------------------------------
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Z**********g 发帖数: 14173 | 8 他第一句说“叔来科普一下基因编辑”
看来是你哥。
【在 x********e 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 第一句话就错了
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l****9 发帖数: 6 | 9 纠正一点,DNA双链断裂后NHEJ修复时,随机发生的插入与删除碱基数并不限于几个,
可能达到数千碱基。 |
x****6 发帖数: 4339 | 10 谢谢更正。
从分布上来讲,几个碱基对的indel频率是最高的。
【在 l****9 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 纠正一点,DNA双链断裂后NHEJ修复时,随机发生的插入与删除碱基数并不限于几个, : 可能达到数千碱基。
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m****d 发帖数: 1 | 11 敲完基因后,就影响并控制蛋白质的合成与结构了,是这样吗?
如果是,那么这新DNA结构,导致新结构与新功能的蛋白质,要是产生的新蛋白质与毒
蛇的毒液相似,这样一人一个毒性,互相残杀上去咬一口就成,或者吃tm奶时,咬一口
,tm完蛋了。
【在 x****6 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 谢谢更正。 : 从分布上来讲,几个碱基对的indel频率是最高的。
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x****6 发帖数: 4339 | 12 是的,
类意思于,你在一个程序里随机把一个迭代换成递归,什么后果? 变了一个程序了。
你说的这种可能理论是存在的,但是概率几乎为零。因为进化出一个新的毒蛋白,那都
是接近100万年的时间尺度的。
除非你用cas9直接把一个已知的毒蛋白序列插到人基因组里,那么不用等100万年,几
个月就齐活
【在 m****d 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 敲完基因后,就影响并控制蛋白质的合成与结构了,是这样吗? : 如果是,那么这新DNA结构,导致新结构与新功能的蛋白质,要是产生的新蛋白质与毒 : 蛇的毒液相似,这样一人一个毒性,互相残杀上去咬一口就成,或者吃tm奶时,咬一口 : ,tm完蛋了。
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w********2 发帖数: 632 | 13 也就是说这货高效率的搞乱了ccr5这个基因,也不在乎你否和ccr5 delta32一样。如果
这样的话,他为啥选的切点和ccr5 delta32的缺失段的起点一样呢?完全可以随便找个
ccr5 frameshift中的点来切,然后让细胞自己乱修。 |