n*****2
发帖数: 1432 | 1 多谢提醒，^_^
现在已经下单和已经到手的自己觉得还行吧：
Seagate 7200.12 1TB (瞄着SSD的deal呢)
XFX GT 240 1G DDR5 (非游戏用户)
Seasonic 650W 80 Plus Gold
Kingston 4*2G DDR3 1600Mhz 1.65v CAS9
华硕那个蓝光光驱是因为基本上我也不用来看碟，顶多装个系统之类的，要好的也没用。
机箱主板CPU都还没下手呢，看来要等到BF了。 |
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s*****o
发帖数: 1565 | 2 老金，到底买CAS9的还是11的？
我看manual上好像说是11
但是是11-11-11-28还是11-11-11-32？ |
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s*****o
发帖数: 1565 | 3 两条是2x4GB, 1.35V
609MHz CAS8
685 9
761 10
800 11
另外两条是2x4GB，1.5V
533 7
609 8
666 9
800（XMP） 9
主板不支持XMP
CPU-Z显示是
665MHz CAS9
这么混用靠谱么...？ |
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b*****c
发帖数: 165 | 7 为什么还要运费？怎么才能搞到free shipping？ |
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h******l
发帖数: 793 | 8 89 - amex 15 = 74刀16g，这年头ram好贵，哈哈 |
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t*****z
发帖数: 1598 | 9 我前两天遇到$52包邮的4x4GB DDR3-1333 ECC RDIMM。犹豫了下，觉得买来也没用，就
放过去了。 |
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a*****8
发帖数: 26 | 11 Order Summary
Sales Order Number: 149897615
Sales Order Date: 11/22/2012 7:51:25 AM
Shipping Method: Super Eggsaver (4-7 Days)
2 x ($44.99) G.SKILL 16GB (2 x 8G) 204-Pin DDR3 SO-DIMM DDR3 1333 (PC3 10600
) Laptop Memory Model F3-10600CL9D-16GBSQ $89.98
Subtotal: $89.98
Tax: $0.00
Shipping and Handling: $0.00
Total Amount: $89.98
Ordered from NewEgg 2 years ago, 4x8G = 32G, only spent $89.98. One pair
used in my Mac Pro, one pair in Thinkpad W520. |
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w****u
发帖数: 3147 | 12 以前内存便宜硬盘贵，现在都不便宜！
就是费钱
10600 |
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h**v
发帖数: 2010 | 14 现在的内存的是DDR3 1.5v，准备全部换掉。newegg有mushkin台式机CAS9 DDR3L 1.35v
的内存，这种直接可以用吧？ |
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n******e
发帖数: 163 | 15 Crispr/Cas9 Genome Editing 已经很成熟，现在只差搞清楚哪里需要编辑。 |
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d*p
发帖数: 534 | 16 I am talking about general cell therapy. Oncogenic is only one part of the
safety issue. For example, one major concern of T cell therapy is over-
activated T cell might cause autoimmune disease, which is a very common
problem in stem cell and organ transplant, including cancer immunotherapy.
Rosenberg, a big name in cancer immune therapy, killed one patient due to
the infused Her2/neu targeting T cell were activated in lung.
Stem cell therapy actually only account for a small part of cell thera... 阅读全帖 |
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l*********1
发帖数: 351 | 17 外行小白请教下：
RNA-programmed genome editing in human cells
RNA-Guided Human Genome Engineering via Cas9
Multiplex Genome Engineering Using CRISPR/Cas Systems
“It’s too early to declare total victory” over TALENs and zinc-fingers,
Church said, “but it looks promising.”
是不是说TALEN engineering的坑就不用跳了啊？多谢指教。 |
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d*******3
发帖数: 15 | 18 我觉得没什么意义，TALEN出来了完全没ZFN啥事了，本来ZFN的特异性就有很大问题，
而且不是每个基因都能有合适的靶点。并且CAS9更快了。。。去看看Keith Joung的
publication就知道了。 |
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h******y
发帖数: 351 | 19 Jaenisch lab最新发表的利用CRISPR同时敲除5个基因的文章。CRISPR前途无限啊。再搞
出几个inducible的CRISPR就更厉害了。
One-Step Generation of Mice Carrying Mutations in Multiple Genes by CRISPR/C
as-Mediated Genome Engineering
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/23643243
Cell. 2013 May 1. pii: S0092-8674(13)00467-4. doi: 10.1016/j.cell.2013.04.02
5.
One-Step Generation of Mice Carrying Mutations in Multiple Genes by CRISPR/C
as-Mediated Genome Engineering.
Wang H, Yang H, Shivalila CS, Dawlaty MM, Cheng AW, Zhang F, Jaenisch R.
Source
W... 阅读全帖 |
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m**********r
发帖数: 26 | 20 Generation of gene-modified mice via Cas9/RNA-mediated gene targeting. Shen
B, Zhang J, Wu H, Wang J, Ma K, Li Z, Zhang X, Zhang P, Huang X. Cell Res.
2013 Apr 2. doi: 10.1038/cr.2013.46
请发至：j*****[email protected]
不胜感谢 |
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m******g
发帖数: 467 | 23 最近被导师说了，觉得我被distracted了，我自己也这么觉得，不过可能真的心智不够
成熟吧，感觉与自己以及导师的预期差了不少。我会努力的！
新年快乐！
Nature 14.01.09
推荐：
原文两篇见science
1. Genome-Scale CRISPR-Cas9 Knockout Screening in Human Cells
评论： CRISPR screen identifies genes
A library of 64,751 guide RNA sequences
Target 18,080 genes in human cells
Genes that are required by cancer and stem cells to survive
稍微了解一下：
1. The effects of genetic variation on gene expression dynamics during
development
2. Diversity of ageing across the tree of life
小知识：
1. Serial Fem... 阅读全帖 |
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m******g
发帖数: 467 | 24 最近被导师说了，觉得我被distracted了，我自己也这么觉得，不过可能真的心智不够
成熟吧，感觉与自己以及导师的预期差了不少。我会努力的！
新年快乐！
Nature 14.01.09
推荐：
原文两篇见science
1. Genome-Scale CRISPR-Cas9 Knockout Screening in Human Cells
评论： CRISPR screen identifies genes
A library of 64,751 guide RNA sequences
Target 18,080 genes in human cells
Genes that are required by cancer and stem cells to survive
稍微了解一下：
1. The effects of genetic variation on gene expression dynamics during
development
2. Diversity of ageing across the tree of life
小知识：
1. Serial Fem... 阅读全帖 |
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m******g
发帖数: 467 | 25 Nature 14.03.06
稍微了解一下：
1. A predictive fitness model for influenza
2. DNA interrogation by the CRISPR RNA-guided endonuclease Cas9
a short trinucleotide protospacer adjacent motif (PAM)
3. Cell-autonomous correction of ring chromosomes in human induced
pluripotent stem cells
lost the abnormal chromosome and duplicated the wild-type homologue
through the compensatory uniparental disomy
小知识：
1. Genes make bacteria magnetic
2. Worms bond to reach new heights
towers with up to 1,000 individuals, r... 阅读全帖 |
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m******g
发帖数: 467 | 26 Science 14.05.16
推荐：
1. The Hunt for Missing Genes
稍微了解一下：
1. Cas9 Targeting and the CRISPR Revolution
2. Border Control - A Membrane-Linked Interactome of Arabidopsis
3. Stick Insect Genomes Reveal Natural Selection's Role in Parallel
speciation |
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m******g
发帖数: 467 | 27 Nature 14.05.22
推荐：
1. High-throughput screening of a CRISPR/Cas9 library for functional
genomics in human cells
稍微了解一下：
1. The role of senescent cells in ageing
小知识：
1. Epigenetics: Keeping one's sex
Genome-defence small RNAs exapted for epigenetic mating-type inheritance |
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l*********y
发帖数: 12 | 29 据我所知广州的那家公司的质量和可靠性都非常好，老鼠运回美国的话海关也没有问题
。不过基因打靶KO小鼠八九万可能下不来，十万出头吧，也已经很便宜了。他们也用新
的技术TALEN及Cas9做KO小鼠，几万就行。 |
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b********e
发帖数: 50 | 30
者。
这里都是做科研的人。做广告没有什么，但不能靠忽悠。以下是你的信息：
上站次数：5次，
发文数：4次。
下面是你的4次发文。是赛业的人也没有关系，告诉大家一些实在的东西比较好吧。
发信人: lovebiology (lovebiology), 信区: Biology
标 题: Re: 一两百万启动经费在小地方做老鼠模型是不是不可行？
发信站: BBS 未名空间站 (Sat Oct 26 19:28:28 2013, 美东)
赛业在转基因，基因敲除模式动物方面做的相当出色，其主要技术骨干均是留学归国人
员，他们帮Stanford, UCSF等科研机构制备了大量的转基因，基因敲除小鼠。
发信人: lovebiology (lovebiology), 信区: Biology
标 题: Re: 海归博士养鼠一对售价18万 销遍近百家实验室(图) (转载)
发信站: BBS 未名空间站 (Fri Dec 6 11:34:05 2013, 美东)
据我所知广州的那家公司的质量和可靠性都非常好，老鼠运回美国的话海关也没有问题
。不过基因打靶KO小鼠八九万可能下不来，十万出头吧，也已经很便... 阅读全帖 |
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l******3
发帖数: 25 | 31 从合作者那里拿来了一个某个基因KO的细胞系，他们是用CRISPR系统建的细胞系。如果
我现在要在此基础上过表达该基因的一个突变体，需要先做mutation吗？ |
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a*****n
发帖数: 2835 | 32 应该不用吧，理论上来说CRISPR系统是瞬时表达的
你可以跟合作者沟通一下 |
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T****u
发帖数: 424 | 34 远还没有到。
Zhang Feng确实很牛。
但Crisp这一系列的paper，除了第一批和Church back to back的那篇science,后面
的double nick,whole genome都是可以想见的，很多人都在做，只是mit资源（人，物
较其他地方多）。
即使Crisp的第一批次的paper，credit很多程度也属于2012年的Science paper，这篇
基本上确定了大的框架，并指出了可以用于genome editing.
http://www.sciencemag.org/content/337/6096/816.full.html
A Programmable Dual-RNA–Guided DNA Endonuclease in Adaptive
Bacterial Immunity
Martin Jinek,1,2* Krzysztof Chylinski,3,4* Ines Fonfara,4 Michael Hauer,2&#
8224;
Jennifer A. Doudna,1,2,5,6‡ Emmanuelle Charpen... 阅读全帖 |
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i**i
发帖数: 2042 | 35 2013年度生物制药领域的重大头条可谓"四大"：大手笔、大数据、大裁员、大争议。同
时，NIH和FDA因政治口水战而陷入关门16天。本文将盘点过去12个月内生物制药领域发
生的"四大"事件始末。
理想丰满、现实骨感：FDA勒令23andMe停止售卖基因检测装置
23andMe公司于2007年开始提供解译基因组服务。该公司由Google联合创始人
SergeyBrin前妻AnneWojcicki创立。该公司试图帮助世界各地的人获取自己的基因数据
，并利用这些数据改善生活。23andMe目前已拿到1.61亿投资，其中Google、Milner、
NEA等都是其投资方。
23andMe在提供个人基因检测服务的公司中颇有名气，主要得益于亲民的价格及便利性
。用户只需花费99美元，将2.5毫升唾液放入试管寄到23andMe公司，即可进行DNA测试
。数周后，客户便可在线查看检测结果。通过该项测试，客户可以了解自己的家族起源
、遗传性疾病和过敏药物等。
科技带来进步，也带来问题，如果恰跟食品或医疗有关的话，FDA定会闲不住。FDA已勒
令初创公司23andMe停止售卖其基因检测装置，甚至还附上一封... 阅读全帖 |
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x******g
发帖数: 289 | 38 1.
Title: A polymer tandem solar cell with 10.6% power conversion efficiency
Author(s): You, Jingbi; Dou, Letian; Yoshimura, Ken; et al.
Source: NATURE COMMUNICATIONS Volume: 4 Article Number: 1446 DOI: 10.
1038/ncomms2411 Published: FEB 2013
Times Cited: 133 (from Web of Science)
Context Sensitive Links
[ View the abstractView abstract ]
2.
Title: Efficient genome editing in zebrafish using a CRISPR-Cas system
Author(s): Hwang, Woong Y.; Fu, Yanfang; Reyon, Deepak; et al.
Sourc... 阅读全帖 |
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b********e
发帖数: 50 | 39 这是本版名ID微博上的一段话。这几年Talen和Cas9很火，想知道这个技术现在到什么
地步了？ 会不会最终完全取代胚胎干细胞方法呢？ 有没有牛人评一下？
“这两天真是太兴奋了。基于EGE系统的大片段基因敲进成功了，使基因敲进和条件性
基因敲除动物制备过程缩短到两三个月，成本也大大降低，使得模式动物能够走入几乎
所有实验室。同时，我们实现了在两个不同基因位点实现同时敲进，使得在动物体内研
究基因相互作用变得更容易。而且，可做物种更多了”。 |
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y***i
发帖数: 11639 | 40 去他的微博看了一下，好像是他们公司自己发展出来的技术
“我们用Extreme Genome Editing (EGE)系统通过基因敲进的方式，分别跟ACTB（细胞
骨架）和LMNB1（核蛋白）加上GFP标签。可以看到其效率比CRISPR/Cas9高很多倍。而
且，通过各种检测，发现90％以上是同源重组，随机插入很少。现在我们正在做多基因
敲进，这对于研究细胞内蛋白相互作用非常有帮助。”
“这是在两个不同基因上分别敲进了DsRed和DTR-EGFP，并做成融合蛋白。这次敲进不
是用ODN, 而是比较大的DNA片段敲进。看来我们的EGE系统真的非常好用。是不是应该
发一篇文章。” |
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v********e
发帖数: 1597 | 41 你这么说起来，我想你们没必要申请专利，也不要发表文章，除非你觉得技术被拿走泄
密的可能性很大；而且申请专利未必能保护的了你们，你想啊，别人要是也用你的技术
做敲除，你找出证据说别人侵权的难度很大；而且，你的专利并不是单独的，你需要用
别人的专利去覆盖，不管是talen,还是cas9,现在肯定已经不少专利的，你们要花很多
钱和精力去处理专利的问题，不划算 |
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r***z
发帖数: 19 | 42 我猜是donor片段两端设计成带有ngg序列的，利用改造过的不会发生切割的cas9指引
donor到要替换的位点，提高效率 |
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T****u
发帖数: 424 | 43 Then that's knockin cell line to a specific position.
Cas9 and TALEN will help. |
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f*********9
发帖数: 258 | 44 用crispr／cas9
给这个蛋白的chr上加个tag然后做RNA IP
或者用biotin label 的oligo pulldown RNA 核protein 做protein seq |
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l********e
发帖数: 415 | 45 crispr/cas9 mediated knockin repair
penetrated |
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c**********n
发帖数: 177 | 46 做结构的大部分实验室也不可能随便就发很大文章吧。大牛实验室是年年都有CNS，小
牛实验室估计是几年有个CNS，剩余的实验室（大多数）其实就是发PNAS，structure，
JBC，JMB，biochem。所以说其实所有分支都差不多吧，没有谁好发文章或者谁不好发。
施一公，颜宁这次确实是手慢了。Anyway，总不能啥结构都被他俩抢走吧。。。
science |
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j******i
发帖数: 939 | 47 我是说思路。结构领域纯体力活嘛。当然说的好听一点就是技术活。开个玩笑，哈哈。
做生物的大家都不容易。
发。 |
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j******i
发帖数: 939 | 48 果然！你可以帮我看看那篇文章的结构吗？我看不懂啊。。 |
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j******i
发帖数: 939 | 50 你做结构吗？跟我在做的一个project有关。你可以帮我看看吗？我消息你。 |
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