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z******8
发帖数: 1225 | 3 超声超贵重的东西一定要低温（冰浴），超声产生的空泡最高可以有瞬间1500度的高温
，搞坏个把币是玩一样 |
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c*****r
发帖数: 1958 | 5 太高深了........花钱买教训了，以后小心，pat pat! |
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h***e
发帖数: 20195 | 8 丙酮后可以用DMF煮一下，千万别用DMSO，高温会氧化
EDTA可能有麻烦 |
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n******8
发帖数: 558 | 12 lol, Dust My Shoulders Off, i hate acronyms.....
pretty amazing, sounds like a black girl singing |
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f*******e
发帖数: 8974 | 13 这个就是利用沸点来做的，抽真空沸点降低，有助于高沸点的溶剂挥发，比如DMSO这样
的东西，而且因为沸点高，所以不需要极端的冷却就能重新冷凝回来。
像甲醇，乙醇，乙氰这种很多时候不但不需要加热挥发，反倒还要抽真空的状态下低温
挥发，特别是生物的样品 |
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s****a
发帖数: 194 | 16 已报到校友名单(按字母顺序)
afterecho
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SolidCa |
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l*********u
发帖数: 19053 | 17 zz
中国黑龙江省天顺化工科技开发有限公司承担的“T700级碳纤维碳化中试生产线及工艺
研究”项目2月5日通过鉴定。据相关政务公开信息，该项目年产量为5吨碳纤维。这家
企业生产线的特点是成本低廉，污染少，其生产的T700级碳纤维成本可控制在每公斤
200元以内。这被认为解决了国内高性能碳纤维生产成本高、质量不稳定的关键瓶颈问
题。目前中国已有超过10家企业在研制生产高性能碳纤维。
国产碳纤维技术出现突破固然喜人，但也有业内论文警告，近年来国内出现“碳纤维热
”，众多科研院所和企业纷纷启动了碳纤维研究或千吨级产业化项目。虽然当前国内市
场对碳纤维产品需求较大，但几年以后，市场出现过剩将成为必然。
《科技日报》的报道中提到，该项目经过5年艰苦卓绝的创新攻关，终于突破高性能碳
纤维生产的关键技术。据该公司总经理孟凡钧介绍，该项目采用独特的纺丝工艺、DMSO
溶剂回收技术、精密的碳化生产技术及先进的废水处理技术，质量稳定，生产成本低，
环境污染小，生产中废水排放少，生产成本可控制在每公斤200元以内，接近国际先进
企业的生产成本，而当前国内成本大多在每公斤1000元―3000元不等。解决了国产... 阅读全帖 |
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M****e
发帖数: 70 | 18 dude, you scared me:P. to tell you the truth, nothing but
truth, i think so ... well, don't tell boss and buy another
vial then. next time, try not to do that. i suggest you use
a cell storage from Nalgene. add isopropanol into it, put in
the vial with cells (cells are in DMSO and FBS), and put it
@ -80C. it is said to decrease the temp by 1C/hr. after
put it in the -80C two days, you can now transfer it to
liquid N2. when you thaw the tube from N2, put it in 37C
water directly, don't stand outs |
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e**r
发帖数: 1144 | 21 应该不是吧
因为买的酶包装里DMSO是单独提供的 |
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n***e
发帖数: 180 | 22 Phusion的话GC buffer有3.5%DMSO,其它的酶有可能是betaine |
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p******i
发帖数: 1092 | 23 对，没错，我试过PHUSION的GC BUFFER再加 8% 的DMSO…… |
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k****o
发帖数: 589 | 24 手里有个人工合成的小肽，想用它去处理一个细胞系，看看可以定位到哪些
compartments。这个小肽
有一段结构是amphipathic的，溶于DMSO不溶于水，不知道找什么样的标记合适。不打
算用表达融合
蛋白的方法去研究。标记最好不带放射性的，多谢！！ |
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N*****1
发帖数: 404 | 25 请问有人做过CY3 DNA PROBE，它在DMSO中的溶解性怎么样？ |
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s******y
发帖数: 28562 | 26 stacking gel 一般不应该超过1厘米。什么因素决定我不知道
除了量大，样品里的盐分过多或者含有一些改变水结构的有机溶剂（比方说DMSO,
guanadine) 也会让样品带涣散，和上样过多的结果类似 |
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s******y
发帖数: 28562 | 27 当然是酸性的蛋白容易有pH 问题啦。哈哈。
另外，你的biotin bead 里的残留液如果很酸的话也会带来问题。
又另外，你的biotin bead 里有没有类似guanadine or DMSO 这种东西？你是用什么东
西来
洗脱biotin的？ 因为在我的印象中，单纯的SDS-buffer 是不能充分打开biotin-
stravadin
的结合的。 |
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p*******i
发帖数: 449 | 28 用分子筛柱脱盐 没必要透析那么复杂 用低盐缓冲液走一遍分子筛应该就差不多了
猜测你的蛋白用尿素之类的缓冲液做的纯化 所以关键不是用什么脱盐 是你的蛋白质由于
疏水性的问题必然不能达到你要的盐浓度
如果后续检测不影响的话 可以考虑用DMSO促溶
仅仅是点建议 以前做蛋白质的功夫快忘没了 |
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h******u
发帖数: 602 | 29 Try to treat cells with a chemical. This chemical is easy to dissolve in
DMSO. However, if adding to culture meidum, it precipiates.
How to solve this problem? Lower the concentration?
Thanks~~~~~~~~ |
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a****d
发帖数: 1919 | 30 从起始密码子开始，序列是这样的：
ATGCCGGCCGGCCGCGCCGCGCGC
gene本身65％GC含量,1.3Kb
打算从ES cell的cDNA pool中clone到lenti over expression vector，ES cell的cDNA
pool是从mRNA反转录得到的。目前试过TAKARA的LA taq，GC buffer，with or
without DMSO(5%),做了gradient Tm， 从53－58度，结果任何一个条件都不能PCR出片
断。现在想是不是因为起始序列太特别了，有没有特别的办法把这个ORF扩增出来？ |
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s******r
发帖数: 2876 | 31 你先看看这个基因有没有的卖，用纯的plasmid作template容易一点。
在你可以考虑在atg之前寻找合适的primer，先得到PCR product
然后再PCR ORF。
roche有一个high gc的PCR kit，用过还行。
从起始密码子开始，序列是这样的：
ATGCCGGCCGGCCGCGCCGCGCGC
gene本身65％GC含量,1.3Kb
打算从ES cell的cDNA pool中clone到lenti over expression vector，ES cell的cDNA
pool是从mRNA反转录得到的。目前试过TAKARA的LA taq，GC buffer，with or
without DMSO(5%),做了gradient Tm， 从53－58度，结果任何一个条件都不能PCR出片
断。现在想是不是因为起始序列太特别了，有没有特别的办法把这个ORF扩增出来？ |
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s********n
发帖数: 2939 | 33 0.5-2 M betaine and 1-10% DMSO. |
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s******y
发帖数: 28562 | 34 嗯，这么说来还真的有可能是对EB 或者 DMSO （溶剂） 过敏呢。
你说的那种凌晨痛到醒的感觉我也有的。而且就是关节特别痛，涨痛涨痛的那种感觉。 |
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j******9
发帖数: 180 | 35 polyaerylamide DMSO SDS DEPC 二乙基焦碳酸酯 DTT TEMED 氯仿 Triton X
-100 等都用 只有DNA荧光染料类的东西让我有感觉 |
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j******9
发帖数: 180 | 36 今天看医生了
医生显然没听说过YOYO1 因为她马上就开始GOOGLE之
然后找出MSDS之后说其中的有害成分居然是DMSO
MSDS材料说YOYO1本身是NOT AWARE OF ANY TOXICITY
看着这说法应该是没测试过
结合DNA的荧光染料明显可能有毒的啊 居然没测试过
医生说还说没听说过任何癌症有骨关节痛的症状 可是我搜到白血病早期是可以有这种
症状的
然后就查血 抽了两大管 看得我觉得要晕过去了
然后就坐这里在等结果 |
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s******r
发帖数: 2876 | 37 这说法应该是测试过吧。
今天看医生了
医生显然没听说过YOYO1 因为她马上就开始GOOGLE之
然后找出MSDS之后说其中的有害成分居然是DMSO
MSDS材料说YOYO1本身是NOT AWARE OF ANY TOXICITY
看着这说法应该是没测试过
结合DNA的荧光染料明显可能有毒的啊 居然没测试过
医生说还说没听说过任何癌症有骨关节痛的症状 可是我搜到白血病早期是可以有这种
症状的
然后就查血 抽了两大管 看得我觉得要晕过去了
然后就坐这里在等结果 |
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s******y
发帖数: 28562 | 38 No, that is almost impossible.
EB cannot penetrate live cells. Plus, you have a thick layer of horny cell
on top of your skin and therefore there is NO CHANCE EB can
enter your body.
Finally, binding of EB to DNA cannot lead to DNA damage in non-replicating
cells.
It is likely you are sensitive to DMSO or the latex gloves. So you
may have to watch out and see if that is the case. |
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c*****g
发帖数: 408 | 39 FP和RP都是GC含量很高的（72%）。另外两端还有gateway的接头。需要PCR一段5K左右
的基因。Tm都是57度。试了几次都没有成功。用过touchdown梯度的annealing，也加过
DMSO。都不行。请问还有什么可以再试试的吗？谢谢 |
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d****u
发帖数: 1553 | 40 betaine是个办法，还可以加DMSO，还有一些公司提供GC RICH reagent。比如罗氏。 |
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c*******2
发帖数: 25 | 41 phusion, GC buffer,Mgcl2 or DMSO
实验室做的就是基因组GC含量高的细菌，一直用phusion |
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q********n
发帖数: 321 | 42 Most multiple plates are made of PC or PS. They will be damaged by
chloroform. Search for PP or PE plate or check polymer solublity in DMSO. |
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s******y
发帖数: 28562 | 43 4kb is not too long ah.
I used to Pfu Turbo (Strategen) for a gene at that length with GC% =65% and
it works fine. I added 0.1% DMSO in the buffer.
Another suggestion is, you can try to amplify two fragments in the same gene
seperately and then ligate them together later. I found it easier for
tricky sequences. |
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G******7
发帖数: 1352 | 45 1个分子的盐酸盐不会对pH有影响的。 盐酸盐，有水溶性，free base一般不能溶于水
，需要溶解于DMSO等有机溶剂里。
盐酸盐相对于free base往往能保存更长时间。 任何分子，溶液相对于粉末状，稳定性
都下降非常多。 |
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a*****n
发帖数: 2835 | 46 首先看你用的cdna来源的细胞组织有没有目的基因的表达
PCR条件可以加点DMSO，槽式PCR试试，酶可以试试clontech的advantage 2 system
mg+ |
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p******d
发帖数: 3737 | 47 我当年一个基因也是怎么都p不出来，后来反应体系里面加了点DMSO，最后做出来了。
当然，前提条件是有positive control。 |
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